幽門螺桿菌對(duì)結(jié)腸炎小鼠的保護(hù)作用及可能機(jī)制研究
本文選題:幽門螺桿菌 切入點(diǎn):潰瘍性結(jié)腸炎 出處:《南京醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文
【摘要】:目的:觀察幽門螺桿菌(Helicobacter pylori, Hp)感染對(duì)葡聚糖硫酸鈉(DSS)誘導(dǎo)的急、慢性結(jié)腸炎小鼠的影響,并對(duì)其可能的免疫機(jī)制進(jìn)行探討。方法:60只C57BL/6小鼠隨機(jī)分為6組:正常對(duì)照組、Hp感染組(接種H. pyloriSS1菌株)、急性結(jié)腸炎組(飲用3%DSS水溶液7天)、慢性結(jié)腸炎組(以飲用2%DSS水溶液5天后,改成正常飲水6天為1個(gè)周期,循環(huán)3個(gè)周期)、(Hp+急性結(jié)腸炎)組(Hp感染6周后行急性UC造模)、(Hp+慢性結(jié)腸炎)組(Hp感染6周后行慢性UC造模)。每日觀察各組小鼠的體重變化、糞便性狀及便血情況,評(píng)估小鼠的疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)。留取小鼠結(jié)腸組織,測量長度及評(píng)估組織病理損傷。采用ELISA. Real-time PCR方法檢測小鼠結(jié)腸粘膜組織IFN-γ、 IL-12、TNF-α、IL-6、IL-17、IL-4、IL-10等細(xì)胞因子的表達(dá)水平。結(jié)果:與急性結(jié)腸炎組、慢性結(jié)腸炎組小鼠相比,(Hp+急性結(jié)腸炎)組、(Hp+慢性結(jié)腸炎)組小鼠的體重下降程度、腹瀉癥狀及便血情況等臨床表現(xiàn)均有明顯緩解,且兩組小鼠的疾病活動(dòng)指數(shù)(DAI)及組織病理學(xué)評(píng)分均明顯降低(P0.05)。與正常對(duì)照組比較,急性結(jié)腸炎組、慢性結(jié)腸炎組小鼠結(jié)腸粘膜組織IFN-γ、TNF-α及IL-6、IL-17表達(dá)水平升高(P0.01),慢性結(jié)腸炎組小鼠結(jié)腸粘膜IL-4表達(dá)水平下降;Hp感染后的(Hp+急性結(jié)腸炎)組和(Hp+慢性結(jié)腸炎)組小鼠下調(diào)IFN-γ、TNF-α及IL-6、IL-17的表達(dá)(P0.01),上調(diào)IL-4表達(dá)水平(P0.05),而IL-10表達(dá)水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論:Hp感染能緩解急、慢性結(jié)腸炎小鼠的臨床癥狀及減輕結(jié)腸病理組織損傷,可能通過調(diào)控Th1/Th2/Th17細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子,減輕腸道局部粘膜炎癥,從而對(duì)UC發(fā)揮保護(hù)作用。目的:為探討幽門螺桿菌(Helicobacter pylori, Hp)對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎(UC)可能的保護(hù)機(jī)制,初步觀察Hp感染對(duì)葡聚糖硫酸鈉(DSS)誘導(dǎo)的急、慢性結(jié)腸炎小鼠腸道菌群的影響。方法:將60只C57BL/6小鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、幽門螺桿菌組(接種H. pyloriSS1菌株)、急性結(jié)腸炎組(飲用3%DSS水溶液7天)、慢性結(jié)腸炎組(以飲用2%DSS水溶液5天后,改成正常飲水6天為1個(gè)周期,循環(huán)3個(gè)周期)、(Hp+急性結(jié)腸炎)組(Hp感染6周后行急性UC造模)、(Hp+慢性結(jié)腸炎)組(Hp感染6周后行慢性UC造模)。留取小鼠糞便標(biāo)本、胃粘膜及結(jié)腸粘膜組織,應(yīng)用16SrDNA絕對(duì)定量PCR方法檢測小鼠腸道擬桿菌屬、擬球梭菌屬、柔嫩梭菌屬、腸桿菌科、類桿菌屬、乳酸菌屬及幽門螺桿菌的含量。結(jié)果:(1)與正常對(duì)照組相比,Hp組小鼠胃粘膜僅幽門螺桿菌數(shù)量明顯增加(P=0.000),余胃粘膜菌群、糞便菌群及結(jié)腸粘膜菌群含量未發(fā)生明顯變化(P0.05)。(2)急性結(jié)腸炎組小鼠糞便標(biāo)本擬桿菌屬含量明顯下降(P=0.038),腸桿菌科則增加(P=0.049);結(jié)腸粘膜菌群主要為擬桿菌屬、腸桿菌科、乳酸菌屬含量明顯降低(P0.05);慢性結(jié)腸炎組小鼠糞便標(biāo)本僅腸桿菌科含量增加(P=0.029);結(jié)腸粘膜菌群主要為腸桿菌科、乳酸菌屬含量明顯升高(P0.05)。(3)(Hp+急性結(jié)腸炎)組小鼠結(jié)腸粘膜腸桿菌科、乳酸菌屬含量較急性結(jié)腸炎組小鼠明顯增加(P0.05);(Hp+慢性結(jié)腸炎)組小鼠結(jié)腸粘膜擬桿菌屬、腸桿菌科比慢性結(jié)腸炎組小鼠明顯降低(P0.05),而乳酸菌屬含量無明顯變化;而與急、慢性結(jié)腸炎組相比,(Hp+急性結(jié)腸炎)組、(Hp+慢性結(jié)腸炎)組小鼠糞便菌群未發(fā)生明顯變化(P0.05)。結(jié)論:急、慢性結(jié)腸炎發(fā)生發(fā)展與主要糞便菌群和結(jié)腸粘膜菌群數(shù)量密切相關(guān)。Hp感染可能通過調(diào)控結(jié)腸炎小鼠結(jié)腸粘膜菌群變化,而不是糞便菌群,從而影響UC的發(fā)生發(fā)展。
[Abstract]:Objective : To observe the effect of Helicobacter pylori ( Hp ) infection on acute and chronic colitis mice induced by dextran sulfate ( DSS ) . Methods : 60 C57BL / 6 mice were randomly divided into 6 groups : normal control group , Hp infection group ( 6 weeks after Hp infection ) , acute colitis group ( 3 % DSS aqueous solution 7 days ) , chronic colitis group ( 6 weeks after Hp infection ) . The levels of IFN - 緯 , IL - 12 , TNF - 偽 , IL - 6 , IL - 17 , IL - 4 , IL - 10 and other cytokines in colonic mucosa of mice were significantly lower than those in the control group .
Methods : 60 C57BL / 6 mice were randomly divided into two groups : normal control group , Hp + chronic colitis group , acute colitis group ( 3 % DSS aqueous solution 7 days ) , chronic colitis group ( 6 weeks after Hp infection ) , and no significant difference in IL - 10 expression level ( P = 0.000 ) .
The colonic mucosa flora was mainly the genus Pseudobacterium , Enterobacteriaceae and lactic acid bacteria ( P0.05 ) .
In the chronic colitis group , the intestinal bacilli content increased ( P = 0.029 ) .
There was a significant increase in colonic mucosa flora ( P0.05 ) . ( 3 ) ( 3 ) ( Hp + acute colitis ) group mice were significantly higher than those in acute colitis group ( P0.05 ) .
( P < 0.01 ) . The colonic mucosa of the mice ( Hp + chronic colitis ) group was significantly lower than that in chronic colitis group ( P0.05 ) , but the content of lactic acid bacteria was not changed .
Compared with acute and chronic colitis group ( Hp + acute colitis ) group , there was no significant change in stool flora in mice ( P0.05 ) . Conclusion : The development of acute and chronic colitis is closely related to the number of main fecal flora and colon mucosa . Hp infection may affect the development of UC by regulating the colonic mucosa flora changes of colitis mice rather than fecal flora .
【學(xué)位授予單位】:南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R574.62
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,本文編號(hào):1695642
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