本文選題：炎癥性腸病　切入點：樹突狀細(xì)胞　出處：《吉林大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2015年01期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的:應(yīng)用小干擾RNA(siRNA)沉默樹突狀細(xì)胞(DCs)CD40分子的表達(dá),觀察其對大鼠炎癥性腸病(IBD)的影響。方法:設(shè)計并合成高效的siRNA載體及真核表達(dá)載體pcDNA3-CD40,分別轉(zhuǎn)染入大鼠DCs細(xì)胞。采用PCR和Western blotting法檢測DCs中CD40mRNA及蛋白表達(dá)水平。18只Wistar大鼠采用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)建立IBD大鼠模型,分為對照組、干預(yù)組及過表達(dá)組。對照組大鼠給予生理鹽水腹腔注射;干預(yù)組大鼠給予含有干涉表達(dá)載體pSilencer 4.1-CMV neo-CD40的DCs腹腔注射;過表達(dá)組大鼠給予含有pcDNA3-CD40的DCs腹腔注射。15d后觀察各組大鼠的腹瀉、黏液膿血便等臨床癥狀。結(jié)果:成功構(gòu)建RNA干涉載體并轉(zhuǎn)染DCs,PCR及Western blotting法檢測DCs中CD40mRNA及蛋白表達(dá)水平均下調(diào)。轉(zhuǎn)染后的DCs作用于各組大鼠,與對照組比較,干預(yù)組大鼠的腹瀉、黏液膿血便癥狀得到明顯改善;過表達(dá)組大鼠腹瀉、黏液膿血便情況加重,并有2只大鼠死亡。結(jié)論:siRNA干預(yù)DCs中CD40分子的表達(dá)對大鼠IBD具有治療作用。
[Abstract]:Objective: to silence the expression of CD40 in dendritic cells by small interference RNA-siRNAs. Methods: high efficient siRNA vector and eukaryotic expression vector pcDNA3-CD40 were designed and synthesized and transfected into rat DCs cells respectively. The expression levels of CD40mRNA and protein in DCs were detected by PCR and Western blotting. Wistar rats were used to establish IBD rat model. Rats in the control group were given intraperitoneal injection of normal saline, and rats in the intervention group were given intraperitoneal injection of DCs containing interference expression vector pSilencer 4.1-CMV neo-CD40. Rats in overexpression group were treated with DCs containing pcDNA3-CD40. 15 days later, the diarrhea of rats in each group was observed. Results: the RNA interference vector was successfully constructed and the expression levels of CD40mRNA and protein in DCs were down-regulated by Western blotting and RNA interference vector was successfully constructed. After transfection of DCs, the rats in each group were treated with DCs, and compared with the control group, the rats in the intervention group had diarrhea. The symptoms of mucus purulent stool were obviously improved, diarrhea and mucus purulent stool were aggravated in the overexpressed group, and 2 rats died. Conclusion the intervention of CD40 molecule expression in DCs has therapeutic effect on IBD in rats.
【作者單位】： 吉林大學(xué)第二醫(yī)院消化內(nèi)科;解放軍第208醫(yī)院消化內(nèi)科;吉林工程技術(shù)師范學(xué)院食品工程學(xué)院生物工程教研室;
【基金】：吉林省科技廳自然科學(xué)基金資助課題(201115086)
【分類號】：R574

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