發(fā)布時間：2018-03-10 09:08

  本文選題：土三七　切入點：肝竇阻塞綜合征　出處：《中南大學》2014年博士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：第一章土三七誘導小鼠肝竇阻塞綜合征模型的建立及評價 目的： 分別用土三七、云南三七、野百合堿(MCT)、環(huán)磷酰胺(CTX)、四種藥物誘導小鼠HSOS模型,并用磷酸鹽緩沖液(PBS)作為對照組。對各模型組進行比較,以尋求高成功率且穩(wěn)定的造模方法,為進一步探討HSOS發(fā)病機制提供模型基礎。 方法： 135只小鼠隨機分為五組：土三七組、云南三七組、野百合堿組、環(huán)磷酰胺組、和PBS對照組。分別予以野百合堿灌胃7天,土三七、云南三七、環(huán)磷酰胺或PBS灌胃30天后處死小鼠。檢測血清中血常規(guī)及肝功能指標,留取肝組織行HE染色、Masson染色,用修改后的Deleve評分標準進行病理學評分。 結果： 1.土三七組、野百合堿組和環(huán)磷酰胺組分別有24只、23只和5只小鼠成模,PBS對照組和云南三七組小鼠無一成模。 2.與PBS對照組比較,土三七組及野百合堿組小鼠WBC計數(shù)較正常組升高,RBC、PLT較正常組明顯降低(P0.05)；環(huán)磷酰胺組小鼠WBC、RBC及PLT計數(shù)均較正常組有所下降(P0.05)；各成模小鼠肝重/體重、ALT、AST、TBIL、DBIL均明顯升高,ALB明顯降低(P0.05)。 3.根據(jù)修改后的Deleve評分標準,土三七組及環(huán)磷酰胺組成模小鼠多表現(xiàn)為中、重度HSOS,而野百合堿成模小鼠多表現(xiàn)為輕、中度HSOS。 結論： 土三七、野百合堿及環(huán)磷酰胺均能誘導小鼠HSOS模型云南三七未能誘導出HSOS模型。土三七誘導的小鼠HSOS模型成模率達80%,且多為慢性模型,是進一步研究HSOS發(fā)病機制及防治措施的更為理想的模型。 第二章熊去氧膽酸對土三七誘導的小鼠肝竇阻塞綜合征防治作用的觀察 目的： 探討不同劑量熊去氧膽酸對土三七誘導的小鼠HSOS的預防性治療作用。 方法： 115只小鼠隨機分為PBS對照組、土三七組、低劑量熊去氧膽酸干預組(15mg/kg/d)和高劑量熊去氧膽酸干預組(30mg/kg/d),灌胃30天后處死小鼠。留取血清及肝組織。測肝重/體重；檢測血清ALT、 AST、TBIL、DBIL、ALB水平；對肝組織進行HE染色和Masson染色,用修改后的Deleve評分標準進行病理學評分；并用免疫組織化學法檢測肝組織纖溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)的表達水平。 結果： 1.土三七組、低劑量熊去氧膽酸干預組和高劑量熊去氧膽酸干預組各有24只、7只、4只小鼠發(fā)生HSOS。與土三七組比較,各干預組小鼠肝重/體重,血清ALT、AST、TBIL、DBIL有所下降,ALB有所升高,其差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),以高劑量干預組改善更為明顯。 2.各組小鼠肝臟病理評分結果：根據(jù)修改后的Deleve評分標準,土三七組小鼠多表現(xiàn)為中、重度HSOS;低劑量熊去氧膽酸干預組多表現(xiàn)為輕中度HSOS,僅1只為重度；高劑量熊去氧膽酸干預組4只成模小鼠均表現(xiàn)為輕中度HSOS。 3.肝組織PAI-1免疫組化結果：土三七組小鼠肝組織中PAI-1表達水平較正常對照組明顯增高。與土三七組比較,各干預組PAI-1表達水平均明顯降低(P0.05),以高劑量干預組下降更為明顯,兩干預組間差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。 結論： 1.熊去氧膽酸對土三七誘導的小鼠HSOS有一定的防治作用,能減輕小鼠的臨床癥狀、改善其肝功能,減輕病理損害程度。高劑量熊去氧膽酸組的防治效果較低劑量組更為明顯。 2.各組小鼠肝組織中PAI-1表達水平與肝臟的病變輕重相關,提示PAI-1可作為HSOS病情嚴重程度和療效的監(jiān)測指標。 第三章熊去氧膽酸對土三七誘導的小鼠肝竇阻塞綜合征防治機制的探討 目的： 通過檢測和比較熊去氧膽酸干預對土三七誘導的HSOS小鼠肝組織NTrf2/ARE通路的影響,探討熊去氧膽酸保護作用的可能機制。 方法： 115只小鼠隨機分為PBS對照組、土三七組、低劑量熊去氧膽酸干預組(15mg/kg/d)和高劑量熊去氧膽酸干預組(30mg/kg/d),灌胃30天后處死所有小鼠。檢測各組小鼠肝組織8-OHGD、MDA、GSH、 SOD水平,應用RT-PCR法檢測各組肝組織Nrf2、SOD、γ-GCS mRNA水平；免疫蛋白印跡雜交法(Western blot)檢測肝臟組織γ-GCS及胞漿、胞核Nrf2蛋白表達水平,并比較各組Nrf2的DNA結合活性。 結果： 1.與PBS對照組比較,三個藥物干預組8-OHGD、MDA水平顯著增高(P0.01), GSH、SOD水平顯著降低(P0.01或P0.05)；兩個熊去氧膽酸干預組8-OHGD、MDA水平明顯低于土三七組(P0.01或P0.05), GSH、SOD水平則明顯高于土三七組(P0.01或P0.05) 2.與PBS對照組比較,三個藥物干預組SOD、γ-GCS mRNA水平均明顯增高(P0.01), Nrf2mRNA水平各組間無明顯差異；兩個UDCA干預組SOD、γ-GCS mRNA水平均高于土三七組(P0.01或P0.05),低劑量UDCA干預組與高劑量UDCA干預組組間比較無明顯差異。 3.與PBS對照組比較,三個藥物干預組胞漿γ-GCS、Nrf2蛋白水平均明顯增高(P0.01),兩個UDCA干預組y-GCS蛋白水平高于土三七組(P0.01或P0.05),而Nrf2蛋白水平則低于土三七組；在胞核內,三個藥物干預組Nrf2蛋白水平均高于對照組,兩個UDCA干預組胞核內Nrf2蛋白均高于土三七組,兩個UDCA干預組胞漿、胞核內Nrf2蛋白水平組間比較均無明顯差異； 4.與PBS對照組比較,三個藥物干預組Nrf2的DNA結合活性均明顯增高(P0.01),兩個UDCA干預則高于土三七組(P0.01或P0.05),高劑量UDCA干預組高于低劑量組。 結論： 1.熊去氧膽酸干預可降低土三七誘導的HSOS小鼠肝臟氧化應激損傷,增加肝臟內源性抗氧化物質GSH和SOD水平； 2.熊去氧膽酸可能通過促進Nrf2的生成及核移位從而激活Nrf2/ARE通路增加下游內源性抗氧化酶SOD、γ-GCS等的合成進而增加機體抗氧化應激能力來達到防治HSOS的效果,高劑量干預組效果優(yōu)于低劑量干預組。
[Abstract]:The first chapter of soil 37 induced mouse hepatic sinusoidal obstruction syndrome model and evaluation
Objective:
With soil 37, Yunnan 37, monocrotaline (MCT), cyclophosphamide (CTX), four kinds of drugs in mice induced by HSOS model, and using phosphate buffer (PBS) as the control group. Compared to the model group, the modeling method for high success rate and stability, provide a model for the. A further Study on the pathogenesis of HSOS.
Method錛，

本文編號：1592669