人DcR3表達(dá)載體的構(gòu)建及驗(yàn)證
本文選題:誘騙受體 切入點(diǎn):肝星狀細(xì)胞 出處:《中國(guó)免疫學(xué)雜志》2016年10期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的:構(gòu)建人DcR3表達(dá)載體并驗(yàn)證其在體外細(xì)胞表達(dá)情況。方法:從人血液組織中擴(kuò)增出DcR3中長(zhǎng)度915 bp的CDS區(qū),將其克隆到帶有紅色熒光的真核表達(dá)載體p EF1a-IRES-DsRed-Express2上,用Fu Gene HD轉(zhuǎn)染法轉(zhuǎn)染到肝星狀細(xì)胞(LX-2)中,用RT-PCR以及Western blot檢測(cè)其mRNA表達(dá)量和蛋白表達(dá)量。結(jié)果:通過(guò)RT-PCR和Western blot檢測(cè)顯示轉(zhuǎn)染DcR3表達(dá)載體質(zhì)粒的肝星狀細(xì)胞中DcR3的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平均顯著性提高。結(jié)論:成功構(gòu)建出人DcR3表達(dá)載體并在LX-2細(xì)胞中高效表達(dá)。
[Abstract]:Aim: to construct a human DcR3 expression vector and verify its expression in vitro. Methods: the 915bp CDS region of DcR3 was amplified from human blood tissue and cloned into eukaryotic expression vector p EF1a-IRES-DsRed-Express2 with red fluorescence. FU Gene HD transfection was used to transfect into hepatic stellate cells (LX-2). RT-PCR and Western blot were used to detect the expression of mRNA and protein. Results: the levels of DcR3 transcription and translation in hepatic stellate cells transfected with DcR3 expression vector plasmid were significantly increased by RT-PCR and Western blot detection. Human DcR3 expression vector was constructed and highly expressed in LX-2 cells.
【作者單位】: 吉林大學(xué)第二醫(yī)院肝膽胰內(nèi)科;
【基金】:吉林省科學(xué)技術(shù)委員會(huì)面上基金課題(201115083)
【分類號(hào)】:R575.2
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,本文編號(hào):1589711
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