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mTOR信號(hào)通路在克羅恩病腸壁纖維化中的作用

發(fā)布時(shí)間:2018-02-27 04:04

  本文關(guān)鍵詞: 克羅恩病 腸道纖維化 m-TOR p-S6 出處:《皖南醫(yī)學(xué)院》2017年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文


【摘要】:背景:克羅恩病(Crohn’s disease,CD)是累及胃腸道的免疫異常的慢性炎癥性疾病。炎癥的慢性刺激可以引起腸壁組織細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular matrix,ECM)的沉積從而導(dǎo)致腸壁的狹窄,由于目前對(duì)該病的發(fā)病病因和作用機(jī)制尚不明確,尚無療效確切藥物治療方法,手術(shù)治療易反復(fù)發(fā)作,因此狹窄型CD的治療成為治療難點(diǎn)。目前轉(zhuǎn)化因子-β1(TGF-β1)被認(rèn)為是纖維化過程中的核心因子,而PI3K/AKT/mTOR信號(hào)通路是常見細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路之一,也可參與多種器官的纖維化過程,其在CD腸壁纖維化中是否發(fā)揮作用尚不清楚。目的:探討mTOR信號(hào)通路和克羅恩病(CD)腸壁纖維化之間的關(guān)系,對(duì)實(shí)驗(yàn)小鼠CD腸壁纖維化形成過程中的組織內(nèi)mTOR信號(hào)通路可能所引起的作用進(jìn)行了評(píng)估和分析。方法:將30只BALB/c小鼠隨機(jī)分成對(duì)照組(A組)和模型組(B組),每組各15只,分別為A組予生理鹽水0.1ml灌腸,B組予TNBS/50%酒精0.1ml灌腸6周,每周1次,灌腸劑中TNBS的濃度呈逐漸遞增趨勢(shì),分別為0.4mg、0.4mg、0.8mg、0.8mg、1.2mg、1.2mg.于灌腸6周結(jié)束后第3天處死小鼠,小鼠處死后收取全部結(jié)腸組織進(jìn)行肉眼和病理觀察,在距肛門口4-5cm處收集腸道組織,并進(jìn)行HE染色,觀察結(jié)腸組織的炎癥程度并進(jìn)行炎癥評(píng)分,通過Masson染色評(píng)估膠原蛋白增生情況,Western Blot法檢測(cè)mTOR蛋白及p-S6蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果:1、和對(duì)照組比較,模型組中小鼠在造模過程中出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍、活動(dòng)少、精神萎靡不振、皮毛松散、進(jìn)食量減少、體重減輕等癥狀,大便可出現(xiàn)半稀便和稀便,潛血實(shí)驗(yàn)+-+++不等,但無明顯肉眼血便。2、對(duì)照組小鼠肉眼可觀察到結(jié)腸粘膜粉紅色,模型組肉眼觀察病變結(jié)腸僵硬、扭曲、變形、部分腸腔狹窄,長度變短;對(duì)照組顯微鏡下病理觀察結(jié)腸粘膜和粘膜上皮結(jié)構(gòu)是完整的,未形成潰瘍,杯狀細(xì)胞規(guī)則整齊的排列著,結(jié)構(gòu)清晰可見,腸壁各層結(jié)構(gòu)、厚度正常,而模型組顯微鏡下病理觀察到結(jié)腸的固有層有炎細(xì)胞浸潤、上皮細(xì)胞破碎、杯狀細(xì)胞和隱窩減少甚至消失,膠原蛋白增加,炎癥評(píng)分與組織評(píng)分也較對(duì)照組明顯增高(P0.05)。3、與對(duì)照組相比,模型組小鼠結(jié)腸組織中的mTOR蛋白以及p-S6蛋白含量表達(dá)也明顯增加(P0.05)。結(jié)論:1、采用TNBS/50%酒精灌腸法能夠誘導(dǎo)慢性結(jié)腸炎的腸壁纖維化動(dòng)物模型。該法誘導(dǎo)的動(dòng)物模型的腸壁慢性炎癥和纖維化特征在一定程度上與人類CD相一致。2、在TNBS誘導(dǎo)慢性結(jié)腸炎的動(dòng)物模型中,腸道纖維化是機(jī)體免疫系統(tǒng)對(duì)慢性炎癥反應(yīng)過度所引起的,其中m-TOR信號(hào)中核心蛋白m-TOR及下游蛋白S6蛋白的磷酸化水平的明顯增高表明m-TOR信號(hào)通路可能參與腸壁纖維化的過程。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號(hào)】:R574.62

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):1541019


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