本文關(guān)鍵詞：SDF-1在慢性肝病中的臨床作用及基礎(chǔ)研究

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【摘要】：基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(stromal cell-derived factor-1,SDF-1)是一種趨化因子,參與機(jī)體的血管生成、組織損傷及修復(fù)、刺激成纖維細(xì)胞增殖分化、促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)合成等過程,趨化因子受體-4(chemokine receptor-4,CXCR4)是SDF-1的受體,SDF-1/CXCR4軸被認(rèn)為與多種纖維化相關(guān)疾病相關(guān),如肺纖維化、肝纖維化、腎臟及皮膚纖維化。且有研究表明當(dāng)機(jī)體臟器損傷時(shí),表達(dá)CXCR4+干細(xì)胞會(huì)循SDF-1濃度差歸巢到受損臟器中,分化為相應(yīng)的實(shí)質(zhì)細(xì)胞以修復(fù)受損的臟器。為了進(jìn)一步研究SDF-1/CXCR4在慢性肝病進(jìn)展中的作用,本課題分為兩部分內(nèi)容,第一部分是探討SDF-1/CXCR4在慢性乙肝纖維化中的臨床價(jià)值,第二部分體外實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證SDF-1可促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向肝細(xì)胞分化。第一部分臨床部分目的探討SDF-1/CXCR4在慢性乙型病毒性肝炎(Chronic Hepatitis B,CHB)纖維化中的作用及不同纖維化階段的表達(dá)變化。方法選取2014年6月至2014年11月就診于大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院感染科門診及住院的118例CHB患者,收集患者臨床病史資料及血清學(xué)檢測結(jié)果,包括:性別、年齡、肝臟硬度值(liver stiffness measurement,LSM)、血清中乙肝病毒DNA定量(HBV DNA)、SDF-1、CXCR4、谷丙轉(zhuǎn)氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(aspartate aminotransferase,AST)、γ-轉(zhuǎn)肽酶(GGT)、堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、總膽紅素(total bilirubin,TBIL)、白蛋白(albumin,ALB)、а-L巖藻糖苷酶(а-L-fucosidase,AFU)水平。按HBV DNA數(shù)值將患者分為HBV DNA500 IU/ml組和HBV DNA≥500 IU/ml組;按LSM值不同分為F0-1期(7.3 KPA)、F2期(7.3-9.7 KPA)、F3期(9.7-17.5 KPA)、F4期(17.5 KPA),將F0-1期歸為非肝纖維化組,F2和F3期為肝纖維化組,F4期為肝硬化組。比較HBV DNA500IU/ml組和HBV DNA≥500 IU/ml組、非肝纖維化組和肝纖維化組和肝硬化組間SDF-1、CXCR4、肝功能的表達(dá)差異。結(jié)果1.入選病例在不同纖維化階段的人數(shù)構(gòu)成比118例入院病例中非肝纖維化組51人(43.22%)、肝纖維化組47人(39.83%)、肝硬化組20人(16.95%)。2.血清中SDF-1、CXCR4在不同HBV DNA組間的表達(dá)水平Lg SDF-1值在HBV DNA500 IU/ml組為-0.20±0.47 ng/ml,HBV DNA≥500IU/ml組為-0.37±0.53 ng/ml,兩組之間差異無顯著性(P0.05);Lg CXCR4值在HBV DNA500 IU/ml組為-0.38±0.45 ng/ml,HBV DNA≥500 IU/ml組為-0.50±0.43ng/ml,SDF-1、CXCR4在HBV DNA500 IU/ml組的表達(dá)量較HBV DNA≥500 IU/ml組高,兩組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。3.血清中SDF-1、CXCR4在不同纖維分期的表達(dá)水平Lg SDF-1在非肝纖維化組為-0.43±0.58 ng/ml,纖維化組為-0.17±0.39 ng/ml,肝硬化組為-0.15±0.48 ng/ml;Lg CXCR4在非肝纖維化組為-0.56±0.53 ng/ml,纖維化組為-0.37±0.33 ng/ml,肝硬化組為-0.29±0.43 ng/ml。肝硬化組、肝纖維化組較非肝纖維化組而言血清SDF-1和CXCR4水平均顯著升高,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),肝纖維化組和肝硬化組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.肝功能指標(biāo)在不同肝纖維化分期中的比較肝纖維化組較非肝纖維化組ALT增高(P0.05),AST、GGT隨著肝纖維化程度加重水平逐漸升高,三組之間均有差異(P0.05),肝硬化組中ALP、TBIL、AFU較非肝纖維化組明顯升高,ALB明顯降低(P0.05)。結(jié)論1.SDF-1、CXCR4表達(dá)水平在HBV DNA≥500 IU/ml組比HBV DNA500 IU/ml組中低。2.SDF-1、CXCR4表達(dá)水平隨LSM分期增加而增加,對(duì)肝硬化早期診斷及預(yù)測具有一定意義。3.肝功能受損與肝纖維化分期有關(guān)。第二部分基礎(chǔ)研究目的探討SDF-1體外誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BM-MSCs)肝向分化的作用。方法全骨髓貼壁培養(yǎng)法提取小鼠BM-MSCs,取P2代細(xì)胞用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞表面標(biāo)志物的表達(dá),采用4種誘導(dǎo)方案對(duì)BM-MSCs進(jìn)行誘導(dǎo)分化培養(yǎng)28天:A組:含有15%胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)的完全培養(yǎng)基的陰性對(duì)照組(negative control,NC);B組(HGF組):添加20 ng/ml肝細(xì)胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF);C組(SDF-1組):添加50 ng/ml SDF-1;D組(HGF+SDF-1組):添加20 ng/ml HGF+50 ng/ml SDF-1。以7天為一個(gè)培養(yǎng)周期,即7天、14天、21天、28天四個(gè)時(shí)間點(diǎn),采用免疫細(xì)胞化學(xué)、western blot及實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(real-time quantitative PCR,Real-time PCR)檢測細(xì)胞ALB和細(xì)胞角蛋白18(cytokeratin-18,CK-18)的蛋白和mRNA表達(dá)情況。結(jié)果HGF、SDF-1組均檢測出ALB、CK-18的表達(dá),在各組中的表達(dá)呈時(shí)間依賴性,且兩者聯(lián)用,ALB、CK-18的表達(dá)量均高于單獨(dú)應(yīng)用,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P㩳0.05)。結(jié)論SDF-1能夠誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的肝向分化,并且與HGF有協(xié)同效應(yīng)。
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R575

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 Chuan Chen;Ge Wang;;Mechanisms of hepatocellular carcinoma and challenges and opportunities for molecular targeted therapy[J];World Journal of Hepatology;2015年15期

2 Rajagopal N Aravalli;Neil C Talbot;Clifford J Steer;;Gene expression profiling of MYC-driven tumor signatures in porcine liver stem cells by transcriptome sequencing[J];World Journal of Gastroenterology;2015年07期

3 Ding Sun;Lei Qin;Yang Xu;Jian-Xia Liu;Li-Ping Tian;Hai-Xin Qian;;Influence of adriamycin on changes in Nanog, Oct-4, Sox2, ARID1 and Wnt5b expression in liver cancer stem cells[J];World Journal of Gastroenterology;2014年22期

4 陳玉禎;安宏亮;;慢性乙型肝炎患者肝纖維化程度的相關(guān)性分析[J];國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2014年08期

5 顧春瑜;石新慧;王海濱;;肝硬化患者血清肝纖維化指標(biāo)聯(lián)合AFU和AFP檢測的臨床價(jià)值的研究[J];國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2013年15期

6 魏雪菲;徐佩;李菡;陳載融;郭萬華;;血清肝纖維化指標(biāo)和肝功能指標(biāo)聯(lián)合檢測在慢性乙型肝炎肝纖維化診斷中的價(jià)值[J];國際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2012年18期

7 謝晶日;劉洋;梁國英;張楊;王靜濱;劉朝霞;李明;王海強(qiáng);李賀微;;柔肝煎對(duì)慢性乙型肝炎肝纖維化患者肝功能及血清肝纖維化指標(biāo)的影響[J];吉林中醫(yī)藥;2012年07期

8 ;Ex vivo-expanded bone marrow stem cells home to the liver and ameliorate functional recovery in a mouse model of acute hepatic injury[J];Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International;2012年01期

9 Maryam Ayatollahi;Masoud Soleimani;Seyed Ziaadin Tabei;Maryam Kabir Salmani;;Hepatogenic differentiation of mesenchymal stem cells induced by insulin like growth factor-Ⅰ[J];World Journal of Stem Cells;2011年12期

10 王東;武玉杰;李笑巖;白咸勇;馮國營;李京敏;;Shh、Ptch、Gli1與CyclinB1-CDK1在肝癌發(fā)生發(fā)展過程中的改變[J];中華臨床醫(yī)師雜志(電子版);2011年17期

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本文編號(hào)：1281991