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PTEN過(guò)表達(dá)及突變對(duì)活化肝星狀細(xì)胞黏著斑激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響研究

發(fā)布時(shí)間:2017-12-06 12:35

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【摘要】:目的探討過(guò)表達(dá)的野生型第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶張力蛋白同源物基因(PTEN)及其突變體G129E(僅保留蛋白磷酸酶活性而喪失脂質(zhì)磷酸酶活性)對(duì)活化肝星狀細(xì)胞(HSC)黏著斑激酶(FAK)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響。方法 2014年12月—2015年6月,利用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染技術(shù),以腺病毒為載體將野生型PTEN及其突變體G129E轉(zhuǎn)染到體外培養(yǎng)的活化HSC;實(shí)驗(yàn)分為4組:對(duì)照組:腺病毒轉(zhuǎn)染時(shí)以DMEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基代替腺病毒;Ad-GFP組:轉(zhuǎn)染表達(dá)綠色熒光蛋白(GFP)的載體空病毒Ad-GFP;Ad-PTEN組:轉(zhuǎn)染攜帶野生型PTEN并表達(dá)GFP的重組腺病毒Ad-PTEN;Ad-G129E組:轉(zhuǎn)染攜帶G129E并表達(dá)GFP的重組腺病毒Ad-G129E。應(yīng)用Western blotting法檢測(cè)活化HSC中PTEN、FAK、磷酸化FAK〔p-FAK(Tyr397)〕表達(dá),實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測(cè)活化HSC中PTEN、FAK mRNA表達(dá)。結(jié)果腺病毒轉(zhuǎn)染活化HSC 48 h,4組活化HSC中PTEN及其mRNA表達(dá)比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);其中Ad-PTEN組和Ad-G129E組活化HSC中PTEN及其mRNA表達(dá)高于對(duì)照組和Ad-GFP組(P0.05);對(duì)照組與Ad-GFP組、Ad-PTEN組與Ad-G129E組活化HSC中PTEN及其mRNA表達(dá)比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4組活化HSC中FAK及其mRNA表達(dá)比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4組活化HSC中p-FAK(Tyr397)表達(dá)比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);其中Ad-PTEN組和Ad-G129E組活化HSC中p-FAK(Tyr397)表達(dá)低于對(duì)照組和Ad-GFP組(P0.05);對(duì)照組與Ad-GFP組、Ad-PTEN組與Ad-G129E組活化HSC中p-FAK(Tyr397)表達(dá)比較,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論過(guò)表達(dá)的野生型PTEN及其突變體G129E均可通過(guò)抑制活化HSC的FAK磷酸化負(fù)性調(diào)控體外活化HSC的FAK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。
【作者單位】: 華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院消化內(nèi)科;蘇州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院消化內(nèi)科;華北理工大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;華北理工大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】:河北省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(H2013209327) 中國(guó)肝炎防治基金會(huì)天晴肝病研究基金資助項(xiàng)目(CFHPC20132078)
【分類(lèi)號(hào)】:R575.2
【正文快照】: 肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cells,HSC)是肝纖維化的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ),其活化、增殖、黏附、遷移在肝纖維化形成及發(fā)展過(guò)程中占據(jù)核心地位[1],信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)控參與了HSC的活化、增殖、黏附、遷移等過(guò)程。第10號(hào)染色體缺失的磷酸酶張力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homolo

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1 陳文;鄧存良;劉濤;陳楓;黃捷;;腎上腺髓質(zhì)素對(duì)大鼠活化肝星狀細(xì)胞調(diào)亡的影響[J];四川醫(yī)學(xué);2007年02期

2 萬(wàn)維琴;朱丹丹;顧錫娟;段義農(nóng);黃彩群;;Septin4_I2基因活化肝星狀細(xì)胞中的表達(dá)及序列生物信息學(xué)分析[J];中國(guó)病原生物學(xué)雜志;2013年05期

3 劉博偉;于靜;陳源文;李定國(guó);蘭玲;袁媛;賈長(zhǎng)河;張昊;;生長(zhǎng)抑制因子AcSDKP對(duì)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1促活化肝星狀細(xì)胞合成和分泌細(xì)胞外基質(zhì)的影響[J];中國(guó)藥房;2012年05期

4 胡彬;王赫;徐會(huì);王鈞毅;趙娜;楊俊濤;;游離脂肪酸抑制TRAIL誘導(dǎo)的活化肝星狀細(xì)胞凋亡[J];肝臟;2014年02期

5 李光明;謝青;李定國(guó);姜山;劉海防;徐芹芳;金由辛;;抗結(jié)締組織生長(zhǎng)因子小干擾RNA對(duì)鼠原代肝易狀細(xì)胞增殖的影響[J];中華肝臟病雜志;2006年03期

6 ;[J];;年期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 蔣明德;孫浩平;鄭淑梅;;MAPK反義寡核苷酸對(duì)乙醛活化HSC生物特性的影響[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)消化病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編(下冊(cè))[C];2007年

2 易蘇紅;張yN;吳漢軍;張宗h,

本文編號(hào):1258650


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