本文關(guān)鍵詞：PTEN過表達(dá)及突變對活化肝星狀細(xì)胞黏著斑激酶信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響研究

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【摘要】：目的探討過表達(dá)的野生型第10號染色體缺失的磷酸酶張力蛋白同源物基因(PTEN)及其突變體G129E(僅保留蛋白磷酸酶活性而喪失脂質(zhì)磷酸酶活性)對活化肝星狀細(xì)胞(HSC)黏著斑激酶(FAK)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響。方法 2014年12月—2015年6月,利用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染技術(shù),以腺病毒為載體將野生型PTEN及其突變體G129E轉(zhuǎn)染到體外培養(yǎng)的活化HSC;實(shí)驗(yàn)分為4組:對照組:腺病毒轉(zhuǎn)染時(shí)以DMEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基代替腺病毒;Ad-GFP組:轉(zhuǎn)染表達(dá)綠色熒光蛋白(GFP)的載體空病毒Ad-GFP;Ad-PTEN組:轉(zhuǎn)染攜帶野生型PTEN并表達(dá)GFP的重組腺病毒Ad-PTEN;Ad-G129E組:轉(zhuǎn)染攜帶G129E并表達(dá)GFP的重組腺病毒Ad-G129E。應(yīng)用Western blotting法檢測活化HSC中PTEN、FAK、磷酸化FAK〔p-FAK(Tyr397)〕表達(dá),實(shí)時(shí)熒光定量PCR法檢測活化HSC中PTEN、FAK mRNA表達(dá)。結(jié)果腺病毒轉(zhuǎn)染活化HSC 48 h,4組活化HSC中PTEN及其mRNA表達(dá)比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);其中Ad-PTEN組和Ad-G129E組活化HSC中PTEN及其mRNA表達(dá)高于對照組和Ad-GFP組(P0.05);對照組與Ad-GFP組、Ad-PTEN組與Ad-G129E組活化HSC中PTEN及其mRNA表達(dá)比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4組活化HSC中FAK及其mRNA表達(dá)比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4組活化HSC中p-FAK(Tyr397)表達(dá)比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);其中Ad-PTEN組和Ad-G129E組活化HSC中p-FAK(Tyr397)表達(dá)低于對照組和Ad-GFP組(P0.05);對照組與Ad-GFP組、Ad-PTEN組與Ad-G129E組活化HSC中p-FAK(Tyr397)表達(dá)比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論過表達(dá)的野生型PTEN及其突變體G129E均可通過抑制活化HSC的FAK磷酸化負(fù)性調(diào)控體外活化HSC的FAK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。
【作者單位】： 華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院消化內(nèi)科;蘇州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院消化內(nèi)科;華北理工大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;華北理工大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;
【基金】：河北省自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(H2013209327) 中國肝炎防治基金會天晴肝病研究基金資助項(xiàng)目(CFHPC20132078)
【分類號】：R575.2
【正文快照】： 肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cells,HSC)是肝纖維化的細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ),其活化、增殖、黏附、遷移在肝纖維化形成及發(fā)展過程中占據(jù)核心地位[1],信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的調(diào)控參與了HSC的活化、增殖、黏附、遷移等過程。第10號染色體缺失的磷酸酶張力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homolo

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本文編號：1258650