發(fā)布時(shí)間：2017-11-27 17:20

  本文關(guān)鍵詞：藍(lán)莓對(duì)非酒精性脂肪性肝病大鼠Nqo1、GCLC、UCP2表達(dá)的影響

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【摘要】：目的：通過(guò)探究藍(lán)莓對(duì)非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease, NAFLD)大鼠NADPH醌氧化還原酶(NAD(P)H:quinine oxidoreductase 1,Nqo1)、γ-谷氨酸半胱氨酸轉(zhuǎn)移酶催化亞基(Gamma glutamylcysteine synthetase catalytic subunit, GCLC)及解偶聯(lián)蛋白2(Uncoupling Protein 2, UCP2)表達(dá)的影響,進(jìn)而探討藍(lán)莓對(duì)NAFLD氧化應(yīng)激損傷和能量合成的作用,并研究其可能的作用機(jī)制。方法：以SD大鼠建立非酒精性脂肪性肝病模型,50只大鼠隨機(jī)分配為①正常組(A組,10只)作為對(duì)照；②藍(lán)莓組(B組,10只),以藍(lán)莓原漿(15ml/kg)干預(yù)；③異甘草酸鎂組(C組,10只),以異甘草酸鎂溶液(15mg/kg)干預(yù)；④模型組(D組,10只),按造模方案喂飼；⑤京尼平苷組(E組,10只),以京尼平苷溶液(100mg/kg)干預(yù)。病理學(xué)方法明確造模情況及各干預(yù)組肝臟病理學(xué)改變,血生化方法檢測(cè)肝功能丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(Alanine aminotransferase,ALT)、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(Aspartate amino transferse,AST)及脂代謝指標(biāo)甘油三酯(triglyceride,TG)、總膽固醇(total cholesterol, TC); ELISA法檢測(cè)肝組織丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、還原型谷胱甘肽(Glutathione Tablets, GSH)含量及超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活性。采用Western Blot技術(shù)檢測(cè)Nqo1、GCLC蛋白表達(dá)情況；采用熒光素酶發(fā)光法檢測(cè)肝細(xì)胞內(nèi)ATP的含量,實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)、Western-blot技術(shù)檢測(cè)UCP2的表達(dá)。結(jié)果：①病理檢測(cè)結(jié)果：正常組HE染色肝小葉結(jié)構(gòu)完整,條索清晰,油紅O染色未見(jiàn)紅色脂質(zhì)沉積；模型組HE染色切片可見(jiàn)肝細(xì)胞彌漫性空泡變性及肝小葉結(jié)構(gòu)紊亂,部分區(qū)域出現(xiàn)炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),油紅O染色見(jiàn)明顯脂質(zhì)沉積；藍(lán)莓組與異甘草酸鎂組HE染色肝細(xì)胞空泡變性及炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯較少,藍(lán)莓組與京尼平苷組油紅O染色提示脂質(zhì)沉積較模型組少。②血生化檢測(cè)肝功能與脂代謝指標(biāo)：正常組ALT、AST和TG、TC、FFA含量明顯低于模型組(P0.05),藍(lán)莓組ALT、AST和TG、TC、FFA含量明顯低于模型組(P0.05),但高于正常組(P0.05),異甘草酸鎂組ALT、AST和TG、TC含量低于藍(lán)莓組(P0.05),京尼平苷組ALT、AST和TG、FFA含量與藍(lán)莓組無(wú)顯著差異。③氧化產(chǎn)物和氧化酶含量檢測(cè)：正常組與模型組相比MDA含量明顯較低(P0.05), SOD活性和GSH含量明顯較高(P0.05)；藍(lán)莓組和異甘草酸鎂組MDA含量明顯低于模型組(P0.05), GSH含量、SOD活性明顯高于模型組(P0.05)；異甘草酸鎂組各指標(biāo)與藍(lán)莓組無(wú)顯著差異。④Nqo1和GCLC蛋白表達(dá)：正常組Nqo1及GCLC蛋白表達(dá)低于模型組,藍(lán)莓組和異甘草酸鎂組Nqo1及GCLC蛋白表達(dá)明顯高于正常組(P0.05),低于模型組(P0.05)。⑤ATP含量：模型組顯著低于正常組(P0.05),藍(lán)莓組顯著高于模型組(P0.05),低于京尼平苷組。⑥ UCP2 mRNA和蛋白表達(dá)：正常組表達(dá)均明顯低于模型組(P0.05),藍(lán)莓組表達(dá)高于正常組(P0.05),京尼平苷組表達(dá)低于藍(lán)莓組(P0.05).結(jié)論：藍(lán)莓具有一定抗氧化活性,藍(lán)莓干預(yù)可減輕NAFLD大鼠病理?yè)p傷和脂質(zhì)沉積,減少脂質(zhì)過(guò)氧化產(chǎn)物的產(chǎn)生和增加抗氧化酶活性。其機(jī)制可能是藍(lán)莓自身具有的抗氧化活性物質(zhì)通過(guò)上調(diào)Nqo1、GCLC蛋白表達(dá)和下調(diào)UCP2蛋白及mRNA表達(dá),進(jìn)而減少氧化應(yīng)激產(chǎn)物的產(chǎn)生和調(diào)節(jié)肝細(xì)胞線粒體能量代謝,維持細(xì)胞氧化和抗氧化平衡,減輕肝臟氧化應(yīng)激反應(yīng),從而延緩NAFLD的發(fā)展。
【學(xué)位授予單位】：貴州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R575.5

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