發(fā)布時間：2017-11-16 15:30

  本文關(guān)鍵詞：共刺激分子B7-H3在急性胰腺炎中的作用及機制研究

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【摘要】：第一部分抗B7-H3單克隆抗體對小鼠急性胰腺炎模型的影響及機制研究目的:探究抗B7-H3單克隆抗體(m Ab)對小鼠急性胰腺炎模型的影響及機制研究。方法:將小鼠隨機分為對照組、AP組、Ig G治療組、抗B7-H3 m Ab治療組。采用腹腔注射L-精氨酸的方法制備小鼠急性胰腺炎(AP)模型,Ig G治療組于造模前2h注射Ig G,抗B7-H3 m Ab治療組于造模前2h注射抗B7-H3 m Ab,于造模后2d、3d、4d,收集各組小鼠血液、胰腺及肺組織標本。采用蛋白質(zhì)免疫印跡(Western blot)法檢測對照組及AP組小鼠胰腺組織B7-H3蛋白表達。應(yīng)用全自動生化免疫分析儀檢測各組小鼠血清淀粉酶及脂肪酶活性,HE染色評估各組小鼠胰腺及肺組織病理變化,采用Western blot法檢測各組小鼠胰腺組織磷酸化NF-κB蛋白表達變化,ELISA檢測各組小鼠血清腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細胞介素6(IL-6)、白細胞介素1β(IL-1β)水平。結(jié)果:B7-H3蛋白在AP小鼠胰腺組織中存在高表達,AP組血清淀粉酶及脂肪酶水平明顯高于對照組,抗B7-H3 m Ab處理后明顯降低,AP組胰腺組織出現(xiàn)明顯炎癥細胞浸潤及胰腺組織壞死,抗B7-H3 m Ab治療組炎性損傷明顯減弱,AP組肺組織出現(xiàn)明顯肺泡壁增厚及炎癥細胞浸潤,抗B7-H3 m Ab治療組肺泡壁增厚程度減輕,AP組TNF-α、IL-6、IL-1β水平隨時間延長而升高,而抗B7-H3 m Ab治療組促炎因子水平相對降低,抗B7-H3 m Ab治療組磷酸化NF-κB蛋白水平降低。結(jié)論:B7-H3在AP模型中存在高表達,抗B7-H3 m Ab可以減弱炎癥反應(yīng),緩解胰腺及肺組織的損傷。第二部分抗B7-H3單克隆抗體對胰腺腺泡細胞和腹腔巨噬細胞共培養(yǎng)模型的影響及機制研究目的:探究抗B7-H3單克隆抗體(m Ab)對胰腺腺泡細胞和腹腔巨噬細胞共培養(yǎng)模型的影響及機制研究。方法:體外分離并培養(yǎng)小鼠胰腺腺泡細胞,分為對照組、精氨酸組、Ig G治療組、抗B7-H3 m Ab治療組,精氨酸組加入5mg/m L的L-精氨酸;Ig G治療組加L-精氨酸前加入Ig G;抗B7-H3 m Ab治療組加L-精氨酸前加入抗B7-H3 m Ab。ELISA法檢測6h、12h、24h上清液中腫瘤壞死因子α(TNF-α)、白細胞介素6(IL-6)、IL-1β水平。分離并培養(yǎng)腹腔巨噬細胞,應(yīng)用CD11b抗體對腹腔巨噬細胞進行鑒定。將巨噬細胞分為對照組、LPS組、精氨酸組、上清液組。LPS組作為陽性對照,上清液組加入腺泡細胞精氨酸組上清液。ELISA法檢測6h、12h、24h上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β水平。將兩種細胞共培養(yǎng),分為對照組、AP組、Ig G治療組、抗B7-H3 m Ab治療組。精氨酸組加入5mg/m L的L-精氨酸;Ig G治療組加L-精氨酸前加入Ig G;抗B7-H3 m Ab治療組加L-精氨酸前加入抗B7-H3 m Ab。ELISA法檢測上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β水平,Western blot法檢測腺泡細胞磷酸化NF-κB蛋白表達變化,CCK-8檢測腺泡細胞生存率。結(jié)果:成功分離并培養(yǎng)小鼠胰腺腺泡細胞,在腺泡細胞單培模型中精氨酸組檢測到低水平炎癥因子表達,抗B7-H3 m Ab治療組炎癥因子水平與Ig G治療組無統(tǒng)計學差異。成功分離并培養(yǎng)小鼠腹腔巨噬細胞,在巨噬細胞單培模型中,精氨酸組未見炎癥因子表達,而上清液組表達明顯升高。在共培養(yǎng)模型中抗B7-H3 m Ab治療組TNF-α、IL-6、IL-1β水平明顯降低,抗B7-H3 m Ab治療組巨噬細胞中磷酸化NF-κB蛋白水平降低,腺泡細胞生存率升高。結(jié)論:抗B7-H3 m Ab可能通過NF-κB信號通路減少巨噬細胞炎癥因子表達水平,進而緩解胰腺腺泡細胞損傷。第三部分急性胰腺炎患者外周血可溶性共刺激分子B7-H1、B7-H2和B7-H3水平及其臨床意義目的:探究急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)患者血清中可溶性共刺激分子B7-H1、B7-H2和B7-H3水平變化及其對病情進展和嚴重程度的評估價值。方法:以20例健康人血液標本為對照組,收集AP患者發(fā)病1天、3天、7天的血液標本共66例,包括輕癥AP(MAP)24例,中度重癥AP(MSAP)24例,重癥AP(SAP)18例;使用ELISA試劑盒檢測血漿中s B7-H1、s B7-H2和s B7-H3水平,評價其與病情進展及嚴重程度的相關(guān)性。結(jié)果:MAP、MSAP、SAP 3個亞組血清s B7-H1水平明顯高于正常對照組。SAP亞組s B7-H1水平隨病程進展逐漸增加,發(fā)病第7天最高,與第3天比較,差異有統(tǒng)計學意義。第7天時SAP亞組顯著高于MSAP亞組。MAP、MSAP、SAP 3個亞組患者血清s B7-H2水平明顯低于正常對照組,且3個亞組第1天s B7-H2均為最高值,此后呈下降趨勢。MAP亞組第1天s B7-H2與第3天比較,差異有統(tǒng)計學意義。在病程第7天,MAP亞組血清s B7-H2明顯高于MSAP。MAP、MSAP、SAP 3個亞組患者血清s B7-H3水平明顯高于正常對照組。SAP亞組患者s B7-H3呈現(xiàn)出逐漸上升的趨勢,發(fā)病第3天與第7天比較時,差異有統(tǒng)計學意義。發(fā)病第1天時,SAP亞組s B7-H3水平顯著高于MSAP亞組。第3天和第7天同一時點不同亞組比較,MSAP亞組顯著高于MAP,SAP亞組顯著高于MSAP亞組。通過ROC曲線檢測發(fā)現(xiàn)s B7-H3診斷SAP的準確性隨病程延長而逐漸升高,具有較好的診斷價值。結(jié)論:動態(tài)分析AP外周血可溶性共刺激分子B7-H1、B7-H2和B7-H3水平具有評估病情進展和嚴重程度的價值。
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R576

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8 ;[J];;年期

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本文編號：1192826