本文關(guān)鍵詞：植物乳桿菌ZDY2013對小鼠胃腸道微生態(tài)的影響及其對幽門螺桿菌感染的預(yù)防作用

  更多相關(guān)文章： 植物乳桿菌ZDY2013 幽門螺桿菌 胃微生態(tài) 小腸微生態(tài) 16S rRNA 高通量測序 PCoA LEfSe

【摘要】：人體胃腸道中棲息著數(shù)百萬億(1014)的微生物菌群,由此形成的微生態(tài)與機(jī)體生長發(fā)育和生理健康息息相關(guān)。現(xiàn)有微生態(tài)研究中,大多數(shù)集中于以糞微生物菌群為代表的遠(yuǎn)端結(jié)腸微生態(tài),而對胃及小腸等近端消化道微生態(tài)的研究甚少。本文通過幽門螺桿菌感染小鼠模型,研究了益生菌候選菌株—植物乳桿菌ZDY2013對小鼠胃微生態(tài)的干預(yù)及其對幽門螺桿菌感染的預(yù)防作用,并進(jìn)而研究了其對小鼠小腸微生態(tài)的即時(shí)及長期影響。熒光定量PCR(Q-PCR)結(jié)果表明,幽門螺桿菌感染小鼠6周后,小鼠胃粘膜炎癥因子IL-1?、IFN-γ和IL-17mRNA水平都表現(xiàn)為顯著性增加(P0.05)。胃組織HE染色也表明幽門螺桿菌感染后,小鼠胃粘膜固有層有明顯的炎癥細(xì)胞浸潤。而在植物乳桿菌ZDY2013預(yù)防組中,這些炎癥癥狀都得到了緩解。這些結(jié)果表明,植物乳桿菌ZDY2013能預(yù)防幽門螺桿菌感染小鼠引起的胃粘膜炎癥反應(yīng)。對小鼠胃微生物菌群16S rRNA基因高通量測序結(jié)果進(jìn)行α多樣性分析時(shí)發(fā)現(xiàn),感染幽門螺桿菌后小鼠微生物菌群Shannon指數(shù)和Simpson指數(shù)都出現(xiàn)顯著性降低(P0.05),而植物乳桿菌預(yù)防組保持在正常水平。表明益生菌灌胃能有效地預(yù)防幽門螺桿菌感染引起的胃微生物菌群多樣性的降低。PCoA分析表明,幽門螺桿菌感染組小鼠微生物菌群與對照組相比有一個(gè)明顯的分離(P0.05,Adonsit test),而植物乳桿菌預(yù)防組小鼠微生物菌群和幽門螺桿菌感染組相比,有一個(gè)明顯的向?qū)φ战M方向的回移,表明益生菌能更好地維持胃微生態(tài)的穩(wěn)定,進(jìn)而防止幽門螺桿菌感染引起的小鼠胃微生態(tài)的改變。為深入研究幽門螺桿菌感染和益生菌灌胃引起的微生態(tài)種群改變,用LEfse分析比較了正常組和幽門螺桿菌感染組及益生菌預(yù)防組胃微生物菌群豐度情況,發(fā)現(xiàn)幽門螺桿菌感染引起了包括Pasteurellaceae,Erysipelotrichaceae,Halomonadaceae,Helicobacteraceae和Spirochaetaceae在內(nèi)的22類菌群的相對豐度的顯著性增加,其中大部分來自于變形菌門。而在植物乳桿菌預(yù)防組,只有6類菌群的相對豐度增加。特別地,幽門螺桿菌屬的相對豐度在植物乳桿菌預(yù)處理組中(0.006)明顯低于感染組(0.0281)(P0.05),表明灌胃植物乳桿菌ZDY2013能顯著地預(yù)防幽門螺桿菌在小鼠胃內(nèi)的定植。然而,對照組和植物乳桿菌處理組小鼠胃微生物菌群的PCoA分析發(fā)現(xiàn),植物乳桿菌灌胃對小鼠的微生態(tài)有顯著性的影響(P0.05),然而后續(xù)的LEfSe分析發(fā)現(xiàn)了有包括Rikenella,Staphlococcus,Bifidobacterium和Corynebacterium的4個(gè)種屬的菌群相對豐度有增加。這些結(jié)果表明,益生菌更多的可能是傾向于維持胃微生態(tài)的平衡,進(jìn)而達(dá)到預(yù)防幽門螺桿感染的目的。用高通量測序技術(shù)進(jìn)一步分析植物乳桿菌對小鼠小腸微生態(tài)的影響發(fā)現(xiàn),植物乳桿菌ZDY 2013灌胃3周能顯著地增加小鼠小腸微生物菌群多樣性(P0.05),改變小腸微生物菌群組成。LEfSe分析發(fā)現(xiàn),在植物乳桿菌灌胃3周后,有包括Helicobacter spp.,Alistipes spp.,Ruminococcus spp.,Myroides spp.,和Clostridium spp.在內(nèi)18種類群的菌群相對豐度出現(xiàn)了顯著性增加(P0.05)。但是在植物乳桿菌灌胃停止6周后,小鼠小腸微生物多樣性和菌群組成趨向于回復(fù)到正常,表明益生菌對小鼠小腸微生態(tài)的改變是暫時(shí)性。綜上所述,植物乳桿菌ZDY 2013灌胃能有效地預(yù)防幽門螺桿菌感染及其引起的胃微生態(tài)改變,但對胃微生態(tài)的影響有限。同時(shí)發(fā)現(xiàn)該益生菌候選菌株對小腸微生態(tài)有短期的調(diào)節(jié)作用。
【關(guān)鍵詞】：植物乳桿菌ZDY2013 幽門螺桿菌 胃微生態(tài) 小腸微生態(tài) 16S rRNA 高通量測序 PCoA LEfSe
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R57
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-7
• 縮略語索引7-10
• 第1章 緒論10-22
• 1.1 前言10-11
• 1.2 益生菌治療幽門螺桿菌感染的研究進(jìn)展11-18
• 1.2.1 動物模型研究11-14
• 1.2.2 臨床研究14-18
• 1.3 益生菌控制幽門螺桿菌感染的機(jī)制18-21
• 1.3.1 益生菌對幽門螺桿菌的抑制作用18-19
• 1.3.2 益生菌的抗炎癥作用19-20
• 1.3.3 益生菌對胃微生態(tài)的影響20-21
• 1.4 本文研究內(nèi)容與意義21-22
• 第2章 植物乳桿菌ZDY2013對幽門螺桿菌感染小鼠的預(yù)防作用22-44
• 2.1 前言23
• 2.2 材料與方法23-30
• 2.2.1 材料23-24
• 2.2.2 主要試劑與儀器設(shè)備24
• 2.2.3 相關(guān)試劑與培養(yǎng)基的配制24-25
• 2.2.4 實(shí)驗(yàn)方法25-29
• 2.2.5 生物信息分析方法29
• 2.2.6 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法29-30
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析30-42
• 2.3.1 小鼠體重的動態(tài)變化30-31
• 2.3.2 實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測小鼠胃粘膜炎癥因子變化情況31-32
• 2.3.3 HE染色觀察小鼠胃粘膜炎癥細(xì)胞浸潤情況32
• 2.3.4 16S rRNA基因高通量測序檢測小鼠胃微生態(tài)變化情況32-42
• 2.4 討論42-44
• 第3章 植物乳桿菌ZDY2013對C57BL/6J小鼠小腸菌群的影響44-57
• 3.1 前言44-45
• 3.2 材料與方法45-47
• 3.2.1 材料45-46
• 3.2.2 主要試劑與儀器設(shè)備46
• 3.2.3 相關(guān)試劑與培養(yǎng)基的配制46
• 3.2.4 實(shí)驗(yàn)方法46-47
• 3.2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)方法47
• 3.3 結(jié)果47-54
• 3.3.1 16S rRNA基因高通量測序結(jié)果47-49
• 3.3.2 C57BL/6J小鼠小腸微生態(tài)菌群組成49-50
• 3.3.3 C57BL/6J小鼠胃微生態(tài)菌群 α 多樣性變化50-51
• 3.3.4. PCoA分析C57BL/6J小鼠小腸微生態(tài)菌群 β 多樣性變化51-53
• 3.3.5 LEfSe分析植物乳桿菌干預(yù)相關(guān)小鼠小腸菌群53-54
• 3.4 討論54-57
• 第4章 結(jié)論與建議57-59
• 4.1 結(jié)論57-58
• 4.2 建議58-59
• 致謝59-60
• 參考文獻(xiàn)60-68
• 附錄A1 試劑68-69
• 附錄A2 儀器設(shè)備69-70
• 獲獎情況70
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果70-71
• 附件71-77

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 高峰玉;張啟順;紀(jì)瑞霞;田字彬;;益生菌在根除幽門螺桿菌中的應(yīng)用[J];中國微生態(tài)學(xué)雜志;2014年02期

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本文編號：1133877