本文關(guān)鍵詞：國產(chǎn)丙型肝炎抗體檢測試劑盒檢測灰區(qū)的設(shè)置及其處置方案的研究

  更多相關(guān)文章： 丙型肝炎病毒抗體檢測 臨界值 Cutoff值 灰區(qū)范圍 ROC曲線 處置方案

【摘要】：目的:設(shè)置目前在上海地區(qū)臨床實驗室常用的四種國產(chǎn)抗-HCV檢測試劑盒檢測的灰區(qū)范圍,并獲得各方法檢測結(jié)果灰區(qū)樣本的處置方案。方法:(1)分別用榮盛、新波、科華和科美四家國產(chǎn)抗-HCV檢測試劑檢測不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品,評價各國產(chǎn)試劑盒的線性關(guān)系及不精密度;(2)收集抗-HCV臨床初檢陽性樣本656例,分別用榮盛、新波、科華和科美四家國產(chǎn)抗-HCV復(fù)檢,分別計算不同初檢范圍的復(fù)檢率;(3)選擇抗-HCV初復(fù)檢結(jié)果不一致的弱陽性樣本338例,用RIBA確認(rèn)試驗和熒光定量PCR檢測HCV RNA作為確認(rèn),以RIBA和HCV RNA確認(rèn)為“金標(biāo)準(zhǔn)”,繪制ROC曲線,探討其最佳臨界值,即約登指數(shù)最大時的四家國產(chǎn)檢測試劑的最佳臨界測量值/陽性判斷值(S/CO值);(4)以95%的真陽性和真陰性的S/CO值,分析四家國產(chǎn)抗-HCV檢測試劑S/CO值陰、陽性灰區(qū)范圍;(5)分析36份四家國產(chǎn)試劑復(fù)檢抗-HCV結(jié)果不一致且在灰區(qū)范圍內(nèi),RIBA或HCV RNA確認(rèn)為陽性的樣本,分析假陰性率;(6)分析四種不同國產(chǎn)試劑在不同抗-HCV濃度下(S/CO1和S/CO≥1=HCV RNA的檢出率及檢測值;(7)四種國產(chǎn)抗HCV檢測試劑在不同抗-HCV濃度水平與HCV RNA基因型的關(guān)系;(8)發(fā)現(xiàn)12例特殊處于“窗口期”樣本,分析抗體檢測結(jié)果、RIBA確認(rèn)與HCV RNA的關(guān)系,以及基因分型。結(jié)果:(1)標(biāo)準(zhǔn)品濃度在0.5NCU/ml,四家國產(chǎn)檢測系統(tǒng)的批內(nèi)不精密度分別從20.2%~36.2%;總不精密度分別從18.9%~34.8%。新波和科美線性關(guān)系斜率非常接近,分別為2.495和2.510;科華相對較低為1.348;榮盛最低為0.634。(2)四家國產(chǎn)抗-hcv檢測試劑的陰性復(fù)檢率均在90%以上,s/co值12.01,四家國產(chǎn)抗-hcv檢測試劑陽性復(fù)檢率均在95%以上(3)榮盛檢測抗-hcv的最佳臨界s/co值為1.31,敏感性為94.8%,特異性為94.6%,約登指數(shù)為0.894,roc曲線下面積為0.989;新波檢測抗-hcv的最佳臨界s/co值為2.48,敏感性為97.7%,特異性為94.6%,約登指數(shù)為0.923,roc曲線下面積為0.989;科華檢測抗-hcv的最佳臨界s/co值為3.22,敏感性為97.2%,特異性為97.3%,約登指數(shù)為0.945,roc曲線下面積為0.992;科美檢測抗-hcv的最佳s/co值為4.32,敏感性為96.2%,特異性為94.6%,約登指數(shù)為0.908,roc曲線下面積為0.991。(4)四家試劑均陽性的樣本,riba和hcvrna的陽性率高達(dá)96.3%(157/163);而四家試劑結(jié)果不一致的riba和hcvrna的陽性率39.2%(31/79),四家試劑均陰性的樣本,riba和hcvrna的陽性率為26.0%(25/96);(5)36份樣本中,單個試劑假陰性率為27.8%~94.4%之間,兩兩試劑組合后,假陰性率為8.3%~61.1%之間;(6)四家國產(chǎn)檢測結(jié)果的s/co1的樣本hcvrna的檢出率顯著低于s/co≥1樣本的檢出率;抗-hcvs/co1的樣本的hcvrna的檢測中位值分別為3.62、3.22、3.31、3.22,s/co≥1的中位值為6.67、6.65、6.65、6.65(p0.05)。另外,在抗-hcvs/co≥1的每家國產(chǎn)試劑的抗-hcv濃度中位數(shù)分別為:15.5、49.6、15.8、121.4;而hcvrna中位數(shù)值均在6.65左右。(7)113例得到丙肝基因型結(jié)果,其基因型為1a7(6.2%)、1b72(63.7%)、2a11(9.7%)、3a7(6.2%)、3b11(9.7%)、6a5(4.4%);在s/co1和s/co≥1的不同濃度下基因型分布沒有顯著性差異;(8)12例特殊樣本抗體檢測結(jié)果為,四家國產(chǎn)檢測結(jié)果均為陰性或者部分廠家處于陰性或陽性灰區(qū)范圍,RIBA確認(rèn)結(jié)果為陰性或不確定,而HCV RNA病毒載量為弱陽性。12例樣本的RNA基因分型,有8例均為1b型,提示早期感染的基因分型可能以1b為主。結(jié)論:(1)確認(rèn)了四種常用國產(chǎn)抗-HCV抗體檢測試劑的最佳臨界S/CO值,并為臨床提供了四種抗-HCV抗體檢測試劑的灰區(qū)范圍(復(fù)檢范圍);(2)四種抗-HCV抗體檢測試劑灰區(qū)結(jié)果的解決方案,建議科華、新波、科美可作為榮盛的復(fù)檢試劑;科華和科美可作為新波的復(fù)檢試劑;科華和科美兩者可互為對方的復(fù)檢試劑。必要時,可引入雙抗原夾心的檢測方法作為復(fù)檢的補(bǔ)充;(3)嘗試分析了灰區(qū)樣本產(chǎn)生的原因包括分析了說明了在初篩檢測抗-HCV的不同方法(ELISA、TRFIA、CLIA),樣本的S/CO值的大小不能代表HCV RNA含量的多少;HCV基因型與HCV濃度水平無顯著相關(guān)性,在臨床診斷中無任何提示意義;在進(jìn)行血清HCV抗體檢測的同時,可以增加HCV RNA試劑進(jìn)行補(bǔ)充試驗,以減少窗口期樣本的漏檢。
【關(guān)鍵詞】：丙型肝炎病毒抗體檢測 臨界值 Cutoff值 灰區(qū)范圍 ROC曲線 處置方案
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R446.6;R512.63
【目錄】：

• 摘要5-8
• ABSTRACT8-12
• 中英文對照12-15
• 前言15-20
• 第一部分：不同國產(chǎn)丙肝檢測試劑的最佳臨界值確認(rèn)及灰區(qū)范圍確定20-55
• 1.1 材料與方法21-39
• 1.1.1 材料21-24
• 1.1.2 方法24-39
• 1.2 結(jié)果39-51
• 1.2.1 精密度評價實驗39-41
• 1.2.2 656例樣本用四種國產(chǎn)檢測試劑復(fù)檢抗-HCV的結(jié)果41
• 1.2.3 HCV確認(rèn)結(jié)果41-43
• 1.2.4 ROC曲線分析結(jié)果43-47
• 1.2.5 抗-HCV初檢陽性標(biāo)本用四家國產(chǎn)HCV試劑復(fù)檢及RIBA和HCVRNA檢測結(jié)果47-48
• 1.2.6 不同國產(chǎn)試劑抗-HCV S/CO值與RIBA&HCV RNA確證陽性結(jié)果的相關(guān)性48-49
• 1.2.7 不同國產(chǎn)試劑抗-HCV S/CO值與RIBA&HCV RNA確證陰性結(jié)果的相關(guān)性49-51
• 1.3 討論51-54
• 1.4 結(jié)論54-55
• 第二部分 灰區(qū)樣本的處置方案和產(chǎn)生原因分析及臨床提示55-72
• 2.1 材料與方法55-58
• 2.1.1 材料55-57
• 2.1.1.1 研究對象55-56
• 2.1.1.2 儀器與試劑56-57
• 2.1.2 方法57-58
• 2.2 結(jié)果58-67
• 2.2.1 不同抗-HCV檢測試劑盒的結(jié)果比較分析58-61
• 2.2.2 不同試劑組合后假陰性率比較61-62
• 2.2.3 36份RIBA陽性樣本的4個抗原區(qū)分布情況62-63
• 2.2.4 樣本抗-HCV檢測結(jié)果描述63
• 2.2.5 HCV RNA檢測結(jié)果分析63-64
• 2.2.6 HCV RNA分型檢測結(jié)果64-66
• 2.2.7 窗口期樣本的分析66-67
• 2.3 討論67-71
• 2.4 結(jié)論71-72
• 結(jié)論72-73
• 參考文獻(xiàn)73-79
• 致謝79-80

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1009376