霍亂毒素B亞單位與熒光金在視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞逆行示蹤中的比較
發(fā)布時間:2017-07-04 09:26
本文關(guān)鍵詞:霍亂毒素B亞單位與熒光金在視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞逆行示蹤中的比較
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【摘要】:目的:比較兩種常用逆行示蹤劑霍亂毒素B亞單位(Cholera toxin subunit B,CTB)與熒光金(Fluoro-Gold,FG)在SD大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞(retinal ganglion cells,RGCs)逆行示蹤中的異同。方法:選取22只體重210-240g的雌性SD大鼠,分別在每只大鼠的雙側(cè)上丘和外側(cè)膝狀體內(nèi)同時注射逆行示蹤劑。顱內(nèi)注射CTB且術(shù)后存活1周或2周的大鼠被分別記作CTB-1w組(n=5只,10眼)和CTB-2w組(n=5只,10眼);顱內(nèi)注射FG且術(shù)后存活1周或2周的大鼠被分別記作FG-1w組(n=5只,10眼)和FG-2w組(n=5只,10眼);剩余的2只大鼠顱內(nèi)注射CTB與FG的等比混合溶液而作為對照組。術(shù)后1周或2周后對大鼠處死后取材,將視網(wǎng)膜、視神經(jīng)和腦組織處理后置于熒光顯微鏡下觀察拍照,用Image-Pro Plus6.0軟件對所拍攝的圖片進行分析,具體參數(shù)包括:RGCs平均密度、RGCs突起平均長度、RGCs突起平均數(shù)目、示蹤劑的擴散面積。采用IBM SPSS Statistics 22.0軟件對所測數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析,設(shè)定p0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:在RGCs平均密度和示蹤劑擴散面積上,FG-1w組和FG-2w組均明顯大于CTB-1w組和CTB-2w組(p均0.001),CTB-2w組明顯大于CTB-1w組(p均0.001),但FG-1w組和FG-2w組之間無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(p均0.05)。至于RGCs突起平均長度和RGCs突起平均數(shù)目的統(tǒng)計結(jié)果,CTB-1w組與CTB-2w組之間以及FG-1w組與FG-2w組之間均無統(tǒng)計學(xué)差異(p均0.05),但CTB組的RGCs突起平均長度和RGCs突起平均數(shù)目無論是在第1周還是第2周都明顯的大于FG組(p均0.001)。同時,研究還發(fā)現(xiàn)CTB逆行標記的視神經(jīng)較FG標記的視神經(jīng)在形態(tài)學(xué)上更加清晰。結(jié)論:(1)CTB和FG均能夠在1周和2周時逆行標記SD大鼠的RGCs;(2)CTB標記的RGCs在形態(tài)學(xué)上較FG更為清楚,而FG標記的RGCs在數(shù)目上較CTB更為全面。
【關(guān)鍵詞】:逆行示蹤 霍亂毒素B亞單位 熒光金 視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 視神經(jīng)
【學(xué)位授予單位】:新疆醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R77
【目錄】:
- 摘要5-7
- ABSTRACT7-10
- 縮略語表10-11
- 1 前言11-13
- 2 材料與方法13-20
- 2.1 實驗材料13-15
- 2.1.1 實驗動物與分組13-14
- 2.1.2 實驗儀器與器械14
- 2.1.3 實驗試劑與耗材14-15
- 2.2 實驗方法15-20
- 2.2.1 示蹤劑溶液的配置15
- 2.2.2 上丘及外側(cè)膝狀體的逆行標記15-16
- 2.2.3 組織取材及固定16-17
- 2.2.4 視網(wǎng)膜鋪片的制備17-18
- 2.2.5 腦片和視神經(jīng)切片的制備18
- 2.2.6 圖像采集與分析18-19
- 2.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計19-20
- 3 結(jié)果20-27
- 3.1 RGCS平均密度20-22
- 3.2 RGCS突起平均長度22-23
- 3.3 RGCS突起平均數(shù)目23-24
- 3.4 示蹤劑的擴散面積24-26
- 3.5 CTB和FG在視神經(jīng)顯影中的比較26-27
- 4 討論27-31
- 4.1 示蹤劑的選擇27-28
- 4.2 示蹤劑的標記方法28-29
- 4.3 示蹤劑標記結(jié)果的分析29-31
- 5 結(jié)論31-32
- 參考文獻32-36
- 綜述36-49
- 參考文獻42-49
- 主要研究成果49-50
- 致謝50-51
- 導(dǎo)師評閱表51
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1 楊淑靜;霍亂毒素[J];生物技術(shù)通訊;2000年04期
2 余紅偉;王源升;李瑜;蔣健暉;吳海龍;魏_,
本文編號:517269
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