本文關(guān)鍵詞：EZH2相互作用蛋白篩選及鑒定，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:篩選并鑒定鼻咽癌細(xì)胞中EZH2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)的相互作用蛋白,探討EZH2在鼻咽癌形成與進(jìn)展中的作用機(jī)制。方法:1.通過(guò)構(gòu)建Flag-EZH2病毒表達(dá)質(zhì)粒,利用慢病毒系統(tǒng)獲得過(guò)表達(dá)Flag-EZH2的5-8F細(xì)胞系,并提取其細(xì)胞核蛋白。2.采用免疫共沉淀結(jié)合凝膠電泳分離EZH2相互作用蛋白,利用基質(zhì)輔助激光解析電離飛行時(shí)間質(zhì)譜技術(shù)鑒定相互作用蛋白。3.選取RBMX和TF1蛋白,通過(guò)免疫共沉淀和Western Blot的方法再次驗(yàn)證與EZH2的相互作用。結(jié)果:1.構(gòu)建Flag-EZH2病毒表達(dá)質(zhì)粒,獲得過(guò)表達(dá)EZH2的5-8F細(xì)胞系,提取了此細(xì)胞系的胞核蛋白。2.篩選出17中可能與EZH2相互作用的蛋白。3.驗(yàn)證RBMX蛋白與EZH2蛋白之間不存在相互作用,而TF1蛋白(本實(shí)驗(yàn)室自編代號(hào)蛋白)與EZH2蛋白之間存在相互作用。結(jié)論:1.本研究采用免疫共沉淀結(jié)合質(zhì)譜分析在鼻咽癌細(xì)胞中鑒定了EZH2相互作用蛋白,為進(jìn)一步研究EZH2蛋白的功能提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。2.TF1蛋白與EZH2蛋白在鼻咽癌細(xì)胞中相互作用,可能與鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展存在重要的聯(lián)系。
【關(guān)鍵詞】：EZH2 相互作用蛋白 鼻咽癌 免疫共沉淀 質(zhì)譜
【學(xué)位授予單位】：桂林醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R739.63
【目錄】：

• 中文摘要5-6
• ABSTRACT6-7
• 英漢縮略詞對(duì)照表7-8
• 前言8-10
• 1 材料與方法10-21
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料與儀器10
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑10-11
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器11-12
• 1.4 實(shí)驗(yàn)方法12-18
• 1.5 實(shí)驗(yàn)主要試劑配制18-21
• 2 結(jié)果21-28
• 2.1 EZH2相互作用蛋白的質(zhì)譜鑒定21-25
• 2.1.1 EZH2基因克隆及其病毒表達(dá)質(zhì)粒的構(gòu)建與鑒定21
• 2.1.2 過(guò)表達(dá)Flag-EZH2的鼻咽癌細(xì)胞系構(gòu)建21-22
• 2.1.3 EZH2相互作用蛋白的純化與分離22-23
• 2.1.4 質(zhì)譜鑒定EZH2相互作用蛋白23-25
• 2.2 EZH2相互作用蛋白驗(yàn)證25-28
• 2.2.1 RBMX與EZH2相互作用驗(yàn)證25-26
• 2.2.2 TF1與EZH2相互作用驗(yàn)證26-28
• 3 討論28-30
• 3.1 EZH2相互作用蛋白的研究背景及意義28-29
• 3.2 免疫共沉淀結(jié)合MALDI-TOF-MS篩選相互作用蛋白29-30
• 3.3 驗(yàn)證篩選蛋白30
• 4 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-33
• 綜述33-42
• 參考文獻(xiàn)39-42
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄42-43
• 致謝43

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 佟明華,陳思強(qiáng),姚汝華,孔祥平;人肝再生增強(qiáng)因子相互作用蛋白基因的克隆[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2004年01期

2 韓為東;趙亞力;伍志強(qiáng);司藝玲;楊潔;田麗媛;孟元光;;FHL2通過(guò)相互作用抑制Id2的功能活性[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2008年09期

3 肖玉霞;黃梅靖;邵樂(lè)南;;蛋白酪氨酸磷酸酶相互作用蛋白51的研究進(jìn)展[J];國(guó)際口腔醫(yī)學(xué)雜志;2012年05期

4 李勇;黃璇;楊靜;張君嚴(yán);汪玲芳;羅時(shí)文;;酵母雙雜交篩選抑癌基因SuFu相互作用蛋白[J];武漢大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版);2013年04期

5 丁麗華;葉棋濃;;FHL家族研究進(jìn)展[J];生物技術(shù)通訊;2007年06期

6 江泓,唐北沙;遺傳性脊髓小腦型共濟(jì)失調(diào)疾病基因的相互作用蛋白研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).神經(jīng)病學(xué)神經(jīng)外科學(xué)分冊(cè);2000年02期

7 楊謙,張景,張瑩瑩,何鵬,劉新平,藥立波,趙慧賢;人NDRG1的GST融合表達(dá)、純化及相互作用蛋白檢測(cè)[J];第四軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2005年20期

8 王強(qiáng),白增亮,李璇,侯琳,張波;轉(zhuǎn)錄因子COUP-TFII對(duì)端粒酶活性的抑制及其相互作用蛋白的分離和鑒定[J];山東大學(xué)學(xué)報(bào)(理學(xué)版);2004年04期

9 余詩(shī)灝;孟雁;;CDK11~(P58)調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖與凋亡機(jī)制[J];中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào);2009年08期

10 徐玉金;姜昌麗;張存;秦鑫;李萌;郝強(qiáng);李維娜;張偉;張英起;;應(yīng)用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選Foxp3△2相互作用蛋白[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2010年07期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 魏平;汪寅章;徐東剛;王嘉璽;;胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1相互作用蛋白研究[A];2006年中華醫(yī)學(xué)會(huì)糖尿病分會(huì)第十次全國(guó)糖尿病學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2006年

2 王梁華;羅以勤;李茂;高云;球誼;孫銘娟;張興群;倪健;焦炳華;;死亡受體6相互作用蛋白質(zhì)的篩選與鑒定[A];中國(guó)海洋生化學(xué)術(shù)會(huì)議論文薈萃集[C];2005年

3 魏平;汪寅章;徐東剛;;胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白-1(IGFBP-1)相互作用蛋白研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第六次全國(guó)內(nèi)分泌學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

4 邱峰;毛小琴;陳世知;邱宗蔭;;GBLP相互作用蛋白研究[A];2008年中國(guó)藥學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)暨第八屆中國(guó)藥師周論文集[C];2008年

5 郭縵;劉穎;瞿湘萍;秦曉群;;BRAP相互作用蛋白的篩選[A];中南地區(qū)第八屆生理學(xué)學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要匯編[C];2012年

6 覃文新;郭鳴雷;李錦軍;姚根富;萬(wàn)大方;顧健人;;BNIPL相互作用蛋白的鑒定[A];中國(guó)蛋白質(zhì)組學(xué)首屆學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2003年

7 李聯(lián)運(yùn);舒紅兵;;與A20相互作用蛋白的篩選和功能研究[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2003年

8 胡勁松;丁乃崢;孫玉慧;陳建國(guó);;p55及其相互作用蛋白的克隆基表達(dá)[A];中國(guó)細(xì)胞生物學(xué)學(xué)會(huì)第八屆會(huì)員代表大會(huì)暨學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2003年

9 郭龍華;楊曉明;賀福初;;TSC1相互作用蛋白的串聯(lián)親和純化[A];中國(guó)蛋白質(zhì)組學(xué)第三屆學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要[C];2005年

10 黃功華;梁景耀;劉新光;梁念慈;;一種可能與人蛋白激酶CK2α'相互作用的蛋白——普利克底物蛋白[A];第七屆全國(guó)酶學(xué)學(xué)術(shù)討論會(huì)論文摘要集[C];2004年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前1條

1 吳志軍邋郝成濤;我國(guó)發(fā)現(xiàn)骨形成調(diào)控新機(jī)制[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2008年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 洪琪;UHRF1通過(guò)兩個(gè)相互作用蛋白調(diào)控乳腺癌細(xì)胞在有氧和缺氧狀態(tài)下的葡萄糖代謝[D];復(fù)旦大學(xué);2012年

2 劉紅巖;TPO受體胞內(nèi)區(qū)相互作用蛋白的篩選與初步功能研究[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

3 陳娟;可卡因安非他明調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄肽相互作用蛋白的篩選[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2005年

4 秦立篷;Spindlin1的蛋白結(jié)構(gòu)解析及相互作用蛋白的尋找[D];中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

5 徐雅琴;細(xì)胞表面膜蛋白NECL2相互作用蛋白的鑒定及其功能研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2005年

6 鄧建川;人肝再生增強(qiáng)因子相互作用蛋白的研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2006年

7 高衍昆;人hPFTAIRE1及其相互作用蛋白的功能研究[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2006年

8 申海蓮;SGT及其相關(guān)蛋白功能的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2005年

9 倪堅(jiān);白色念珠菌Crk1相互作用蛋白的篩選與功能研究[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院（上海生命科學(xué)研究院）;2004年

10 蘭世杰;BCCIP相互作用蛋白的鑒定與功能研究[D];吉林大學(xué);2012年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 古麗莎娜·阿地里江;ClpS及其相互作用蛋白在分枝桿菌中的功能探究[D];清華大學(xué);2015年

2 王雅麗;MY與NC相互作用的功能[D];河北科技大學(xué);2013年

3 趙程程;畢赤酵母中多酶組裝合成人參皂苷前體[D];華東理工大學(xué);2016年

4 周晶晶;篩選ADAR1相互作用蛋白并初步探討其對(duì)miRNA合成的影響[D];成都醫(yī)學(xué)院;2016年

5 曾小燕;假結(jié)核耶爾森氏菌三型分泌系統(tǒng)相互作用蛋白篩選及其功能研究[D];中國(guó)科學(xué)院研究生院(武漢病毒研究所);2016年

6 曾雙;B7-H4在腫瘤細(xì)胞內(nèi)表達(dá)的生物學(xué)意義研究[D];蘇州大學(xué);2016年

7 其布日;酵母雙雜交篩選FKBP38相互作用蛋白及SQSTM1/p62功能初步研究[D];內(nèi)蒙古大學(xué);2016年

8 周文婷;LOX相互作用蛋白的驗(yàn)證及其在乳腺癌遷移與侵襲中的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2016年

9 田斯琦;串聯(lián)親和純化技術(shù)聯(lián)合質(zhì)譜鑒定RSK4變異體的相互作用蛋白[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2016年

10 范成艷;GIPC2相互作用蛋白的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2016年

  本文關(guān)鍵詞：EZH2相互作用蛋白篩選及鑒定，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：439902