本文關(guān)鍵詞：TTR基因突變c.-743A＞T對(duì)該基因表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:探索甲狀腺激素結(jié)合蛋白(transthyretin,TTR)基因上游調(diào)控區(qū)突變c.-743AT與該基因表達(dá)的關(guān)系。方法:首先構(gòu)建野生型TTR啟動(dòng)子雙熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒和c.-743AT突變型TTR啟動(dòng)子雙熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒,分別作為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。以未接入啟動(dòng)子的雙熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒作為陰性對(duì)照組。采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染法分別將各組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至肝源細(xì)胞株Hep G2。分別于轉(zhuǎn)染后6h、12h、18h、24h、48h、72h取細(xì)胞培養(yǎng)上清液檢測(cè)Gaussia熒光素酶(Gaussia Luciferase,Gluc)和分泌型堿性磷酸酶(secreted alkaline phos-phatase,SEAP)的表達(dá)量。相對(duì)表達(dá)量為Gluc/SEAP。對(duì)三組各時(shí)間點(diǎn)所測(cè)得的相對(duì)表達(dá)量用方差分析進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:突變型啟動(dòng)子組和野生型啟動(dòng)子組相對(duì)表達(dá)量平均值分別為5.97和6.99。陰性對(duì)照組的相對(duì)表達(dá)量平均值則明顯低于前兩組為0.34,是野生型啟動(dòng)子組的4.86%。整體比較各時(shí)間之間的相對(duì)表達(dá)量有顯著差異(F=132.915,P0.001)。每個(gè)組內(nèi)的各時(shí)間點(diǎn)相對(duì)表達(dá)量亦存在顯著差異(F=75.123、54.120和172.748,P0.001)。各組轉(zhuǎn)染24h后的相對(duì)表達(dá)量明顯增加。野生型和突變型TTR啟動(dòng)子組相對(duì)表達(dá)量分別在24h和72h達(dá)到峰值。各組之間相對(duì)表達(dá)量有顯著差異(F=249.518,P0.001),每個(gè)時(shí)間點(diǎn)的組間差異比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。提示分組因素對(duì)表達(dá)是有影響的。各時(shí)間點(diǎn)野生型和突變型TTR啟動(dòng)子組相對(duì)表達(dá)量均明顯高于陰性對(duì)照組,說明野生型和突變型TTR啟動(dòng)子均能誘導(dǎo)表達(dá)。精細(xì)比較時(shí)發(fā)現(xiàn)野生型和突變型TTR啟動(dòng)子組在6h(F=24.460,P=0.008)、18h(F=96.781,P=0.001)、24h(F=28.453,P=0.006)和48h(F=8.954,P=0.040)時(shí)有差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。在18h和48h時(shí)突變型啟動(dòng)子組表達(dá)量較高,在6h、24h時(shí)則相反。分組因素和時(shí)間因素之間存在交互效應(yīng)(F=34.994,P0.001),即各組的相對(duì)表達(dá)量隨時(shí)間變化的趨勢(shì)不全相同。結(jié)論:野生型和突變型TTR啟動(dòng)子均能成功誘導(dǎo)下游基因的表達(dá)。TTR基因突變c.-743AT能夠影響該基因的表達(dá)。
【關(guān)鍵詞】：TTR 調(diào)控區(qū) 突變 表達(dá)
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R776.4
【目錄】：

• 中英縮略詞對(duì)照表4-6
• 中文摘要6-7
• 英文摘要7-9
• 前言9-11
• 1.材料與方法11-19
• 2.結(jié)果19-23
• 3.討論23-27
• 4.結(jié)論27-28
• 參考文獻(xiàn)28-31
• 綜述31-42
• 參考文獻(xiàn)38-42
• 致謝42-43
• 作者簡(jiǎn)介43

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  本文關(guān)鍵詞：TTR基因突變c.-743A＞T對(duì)該基因表達(dá)的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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