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WWOX通過(guò)調(diào)控ERMAP基因抑制鼻咽癌細(xì)胞生長(zhǎng)的作用及機(jī)制研究

發(fā)布時(shí)間:2024-02-27 04:28
  【研究背景與目的】鼻咽癌是在我國(guó)南方地區(qū)高發(fā)的一種惡性的頭頸部腫瘤,發(fā)病率排名位居全球第18位,其有地域集中性、發(fā)病原因復(fù)雜、發(fā)病隱匿、高度的轉(zhuǎn)移和侵襲能力等顯著特點(diǎn),其發(fā)生發(fā)展涉及多個(gè)基因共同參與,揭示其發(fā)病機(jī)理、尋找相關(guān)新的癌基因、抑癌基因進(jìn)行探索,獲得新的治療靶點(diǎn),對(duì)鼻咽癌早期診斷與治療及預(yù)后有著重要意義。WWOX是一個(gè)新的抑癌基因,于2000年首次被發(fā)現(xiàn),其含有2個(gè)WW結(jié)構(gòu)域與1個(gè)氧化還原酶結(jié)構(gòu),WW結(jié)構(gòu)域可以調(diào)節(jié)蛋白與蛋白之間的相互作用。課題組在前期研究中檢測(cè)到在鼻咽癌組織中WWOX基因的表達(dá)水平降低,且與TNM分期相關(guān),隨著疾病進(jìn)展而表達(dá)逐步下降,還與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān),體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)WWOX可以抑制鼻咽癌細(xì)胞的增殖、遷徙與侵襲,但在抑制鼻咽癌發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移的機(jī)制和預(yù)后方面的價(jià)值作用尚未能確定。本課題擬對(duì)WWOX基因在鼻咽癌發(fā)生發(fā)展中的作用以及其下游基因?qū)Ρ茄拾┘?xì)胞惡性生物學(xué)行為的調(diào)控機(jī)制進(jìn)行深入研究。【研究方法】1、設(shè)計(jì)、包裝含有WWOX基因的慢病毒載體,將病毒轉(zhuǎn)染鼻咽癌細(xì)胞株CNE-2Z并構(gòu)建穩(wěn)定轉(zhuǎn)染后的細(xì)胞。采用Affymetrix基因表達(dá)譜芯片檢測(cè)鼻咽癌細(xì)胞CNE-2Z...

【文章頁(yè)數(shù)】:146 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

圖1-2擴(kuò)增曲線(xiàn)

圖1-2擴(kuò)增曲線(xiàn)

圖1-1轉(zhuǎn)染72h后倒置熒光顯微鏡下GFP熒光蛋白的表達(dá)情況(×200)A/a.陰性對(duì)照組;B/b.CNE2Z-WWOX組;Figue1-1.TheexpressionofGFPfluorescentproteinunderinvertedflu....


圖1-1轉(zhuǎn)染72h后倒置熒光顯微鏡下GFP熒光蛋白的表達(dá)情況(×200)A/a.陰性對(duì)照組;B/b.

圖1-1轉(zhuǎn)染72h后倒置熒光顯微鏡下GFP熒光蛋白的表達(dá)情況(×200)A/a.陰性對(duì)照組;B/b.

轉(zhuǎn)染72h后倒置熒光顯微鏡下GFP熒光蛋白的表達(dá)情況(×200)A/aCNE2Z-WWOX組;e1-1.TheexpressionofGFPfluorescentproteinunderinvertedfluorescenc72htransfect....


圖1-3Westernblot檢測(cè)細(xì)胞中WWOX蛋白的表達(dá)情況

圖1-3Westernblot檢測(cè)細(xì)胞中WWOX蛋白的表達(dá)情況

疫蛋白印跡(Westernblot)驗(yàn)證WWOX的表達(dá)情Westernblot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)WWOX在CNE-2Z/CON/WWOX細(xì)胞中的蛋白表達(dá)水平。兩組灰度與GA得出相對(duì)量分別為0.092±0.031、1.35±0.152(如對(duì)照組中WWOX蛋白表達(dá)....


圖1-4Agilent2100樣品RNA質(zhì)控檢測(cè)圖譜

圖1-4Agilent2100樣品RNA質(zhì)控檢測(cè)圖譜

A260/A280分布于:1.90~2;RNA的完整數(shù)分布于:7.5~9.6,28S/18S分布于:2.0~2.7。上述結(jié)果表明RNA質(zhì)檢合格,可以用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。表1-9各組樣本RNA的質(zhì)檢結(jié)果樣本編號(hào)樣本名稱(chēng)ThermoNanoDrop2000Agilen....



本文編號(hào):3912375

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