目的:觀察內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS)在氧化低密度脂蛋白(OxLDL)誘導(dǎo)的人視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)細(xì)胞凋亡中的作用。方法:人RPE細(xì)胞系A(chǔ)RPE19采用低糖DMEM培養(yǎng)基和10%胎牛血清進(jìn)行常規(guī)培養(yǎng)。實驗分為3組:對照組(常規(guī)培養(yǎng)的ARPE19)、OxLDL組(加入5、10、25、50、100μg/mL OxLDL)和LDL組(加入5、10、25、50、100μg/mL LDL)培養(yǎng)24h。分別采用細(xì)胞計數(shù)試劑盒(CCK8)檢測各組細(xì)胞活性,流式細(xì)胞儀檢測凋亡比例,蛋白質(zhì)印跡(Western blotting)檢測ERS相關(guān)蛋白及凋亡相關(guān)酶的表達(dá)。激光共聚焦顯微鏡觀察人RPE細(xì)胞吞噬紅色熒光探針Dil標(biāo)記的氧化低密度脂蛋白(Dil-OxLDL)情況。結(jié)果:CCK8結(jié)果顯示:對照組細(xì)胞存活率為(100±5.637)%,加入5、10、25、50、100μg/mL OxLDL后細(xì)胞活力分別為(105.298±9.395)%、(97.106±5.417)%、(77.015±4.055)%、(67.613±3.853)%和(43.872±9.532)%(P<0.05);加入5、10、25、50...

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【文章目錄】：
0引言
1材料和方法
    1.1材料
    1.2方法
        1.2.1細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 RPE細(xì)胞吞噬檢測
        1.2.3實驗分組和細(xì)胞活力測定
        1.2.4 Annexin V-FITC/PI 雙染色法檢測細(xì)胞凋亡
        1.2.5 Western blotting分析
2結(jié)果
    2.1 RPE細(xì)胞吞噬OxLDL情況
    2.2 CCK8檢測細(xì)胞活力結(jié)果
    2.3 Annexin V-FITC/PI雙染色法檢測細(xì)胞凋亡情況
    2.4 Western blotting檢測ERS相關(guān)蛋白表達(dá)結(jié)果
3討論



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