發(fā)布時間：2017-05-19 13:20

  本文關(guān)鍵詞：綠原酸對小鼠變應性鼻炎的作用及其機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：變應性鼻炎(allergic rhinitis,AR)即過敏性鼻炎,是指在外界環(huán)境和基因相互影響下,過敏體質(zhì)個體與特異性抗原接觸后,導致由IgE介導的炎性介質(zhì)大量釋放,誘導鼻黏膜多種免疫細胞因子浸潤,多種活性物質(zhì)參與的非感染性變態(tài)疾病。常表現(xiàn)為鼻癢、鼻塞和噴嚏等臨床癥狀,嚴重者伴有頭痛、頭暈、耳鳴等癥狀�，F(xiàn)代研究表明,AR具有發(fā)病范圍廣,發(fā)病率高的特點。綠原酸(Chlorogenic acid)即咖啡鞣酸,研究顯示綠原酸具有抑菌、抗炎和抗病毒的活性,能夠通過降低膽固醇的含量達到保護心血管的作用。同時還證實綠原酸對消化系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)都具有調(diào)節(jié)功能。但是綠原酸對于過敏性鼻炎的治療未見報道。本研究旨在利用動物模型,研究綠原酸對過敏性鼻炎的保護作用。主要分為以下兩個部分,一是采用小鼠腹腔注射抗原佐劑混懸液0.2ml(含OVA 20μg,Al(OH)32mg),隔天1次,共7次進行全身致敏后分別用5%OVA或10%OVA生理鹽水溶液滴鼻,每側(cè)鼻孔10μl,每日1次,誘導過敏性鼻炎模型,通過對小鼠的行為學、鼻腔分泌物、臟器指數(shù)、血清中組胺、IgE含量等相關(guān)評價指標進行檢測,進而評價建立小鼠AR模型的最適OVA滴鼻濃度;二是采用10%OVA生理鹽水溶液滴鼻建立小鼠變應性鼻炎模型。觀察連續(xù)給予不同劑量的綠原酸(50、100、200 mg/kg),觀察AR小鼠行為學的變化,小鼠鼻腔灌洗液及血清中組胺、IgE及細胞因子含量水平變化及小鼠的鼻黏膜組織中生化指標變化。進而探討出綠原酸對于OVA誘導的過敏性鼻炎是否具有保護作用及其相關(guān)機制。實驗方案:1、OVA誘導小鼠過敏性鼻炎模型的建立(1)觀察小鼠的行為學變化情況,記錄小鼠抓鼻和噴嚏的次數(shù);(2)檢測小鼠鼻腔分泌物重量;(3)測定小鼠血清中組胺、IgE的水平;2、綠原酸對OVA誘導的小鼠過敏性鼻炎的影響(1)測定OVA誘導過敏性鼻炎小鼠的行為學的變化情況,記錄小鼠抓鼻和噴嚏的次數(shù);(2)測定ova誘導過敏性鼻炎小鼠的鼻腔分泌物重量;(3)測定ova誘導過敏性鼻炎小鼠的臟器指數(shù);(4)測定ova誘導過敏性鼻炎小鼠的鼻腔灌洗液中il-4、ifn-γ的水平;(5)測定ova誘導過敏性鼻炎小鼠的血清中組胺、ige及細胞因子的水平;(6)測定ova誘導過敏性鼻炎小鼠的鼻黏膜組織中細胞因子mrna的表達。實驗結(jié)果:1、ova誘導小鼠過敏性鼻炎模型的建立(1)與正常組比較,隨著ova滴鼻次數(shù)的增加5%ova模型組和10%ova模型組小鼠噴嚏和抓鼻次數(shù)增加。但10%ova模型組小鼠噴嚏和抓鼻次數(shù)顯著增加,具有統(tǒng)計學意義(p0.001);(2)10%ova模型組在7-10天內(nèi)鼻腔分泌物重量持續(xù)增加,且明顯高于正常組(p0.05)。而5%ova模型組鼻腔分泌物重量具有增加趨勢,第9、第10天明顯高于正常組(p0.05);(3)與正常組比較,10%ova模型組小鼠血清中組胺和ige的含量顯著增高,具有統(tǒng)計學差異(p0.001)。5%ova模型組小鼠血清中組胺含量增高,具有統(tǒng)計學意義(p0.05),但小鼠血清中ige的含量具有升高趨勢,無統(tǒng)計學意義(p0.05)。2.綠原酸對ova誘導的小鼠過敏性鼻炎的影響(1)綠原酸低、中、高劑量組(50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg)ar小鼠的噴嚏和抓鼻次數(shù)明顯減少,與模型組相比,具有統(tǒng)計學差異(p0.05);(2)與模型組相比,綠原酸高劑量組(200mg/kg)鼻腔分泌物重量顯著減少,具有統(tǒng)計學差異(p0.05)。綠原酸低、中劑量組(50mg/kg、100mg/kg)ar小鼠的鼻腔分泌物重量無統(tǒng)計學差異(p0.05);(3)與模型組相比,綠原酸低、中、高劑量組(50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg)中的脾臟指數(shù)顯著減少,胸腺指數(shù)顯著增加,具有統(tǒng)計學差異(p0.05);(4)與模型組相比,綠原酸中、高劑量組(100mg/kg、200mg/kg)小鼠鼻腔灌洗液ifn-γ的含量明顯上升,il-4的含量明顯降低,具有統(tǒng)計學差異(p0.01)。綠原酸低劑量組(50mg/kg)小鼠鼻腔灌洗液ifn-γ的含量無明顯變化,無統(tǒng)計學差異(p0.05);il-4的含量降低,與模型組相比,具有統(tǒng)計學差異(p0.05);(5)與模型組相比,綠原酸低、中、高劑量組(50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg)可以顯著降低小鼠血清組胺和IgE的含量,具有統(tǒng)計學差異(p0.05);(6)與模型組相比,綠原酸中、高劑量組(100mg/kg、200mg/kg)可以升高小鼠血清IFN-γ的含量,降低小鼠血清IL-4、IL-5和IL-10的含量,同時IFN-γ/IL-4升高,具有統(tǒng)計學差異(P0.05);綠原酸低劑量組(50mg/kg)可以顯著降低小鼠血清IL-4的含量,具有統(tǒng)計學差異(p0.05),對小鼠血清IFN-γ、IL-5和IL-10的含量無顯著變化,無統(tǒng)計學意義(p0.05);(7)與模型組相比,綠原酸中、高劑量組(100mg/kg、200mg/kg)可以顯著降低IL-4、IL-5和IL-10的mRNA相對表達量,升高IFN-γ的m RNA相對表達量,具有統(tǒng)計學差異(P0.05);綠原酸低劑量組(50mg/kg)可以顯著降低IL-4、IL-5的mRNA相對表達量,升高IFN-γ的mRNA相對表達量,具有統(tǒng)計學差異(p0.05),對小鼠IL-10的mRNA相對表達量無顯著變化,無統(tǒng)計學意義(p0.05)。實驗結(jié)論:1.OVA能夠誘導AR小鼠出現(xiàn)急性期的相關(guān)癥狀,OVA的最佳濃度為10%。2.綠原酸可減少AR小鼠噴嚏及抓鼻次數(shù),減少小鼠鼻腔分泌物量,明顯降低AR小鼠的脾臟指數(shù),增加胸腺指數(shù),增加小鼠鼻腔灌洗液IFN-γ的含量,降低小鼠鼻腔灌洗液IL-4的含量,顯著降低AR小鼠血清中組胺、IgE、IL-4、IL-5和IL-10的含量,增加IFN-γ的含量,升高IFN-γ/IL-4的值,下調(diào)AR小鼠鼻黏膜組織IL-4、IL-5和IL-10的mRNA的表達,上調(diào)IFN-γmRNA的表達。
【關(guān)鍵詞】：綠原酸 變應性鼻炎 組胺 IgE 細胞因子 PCR
【學位授予單位】：吉林大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R765.21
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• Abstract7-15
• 第1章 前言15-32
• 1.1 變應性鼻炎概述15
• 1.2 AR的病因研究15-16
• 1.2.1 遺傳因素15-16
• 1.2.2 過敏原誘發(fā)因素16
• 1.2.3 其他因素16
• 1.3 AR的發(fā)病機制的研究進展16-23
• 1.3.1 AR與炎癥介質(zhì)關(guān)系學說17-19
• 1.3.2 Th1和Th2細胞平衡學說19-20
• 1.3.3 AR與IgE及其受體關(guān)系學說20-21
• 1.3.4 AR與Th17相關(guān)細胞因子學說21-22
• 1.3.5 AR與Th9細胞學說22
• 1.3.6 AR與IL-33關(guān)系學說22-23
• 1.4 AR的治療研究進展23-26
• 1.4.1 避免接觸變應原23
• 1.4.2 藥物治療23-25
• 1.4.3 免疫治療25-26
• 1.4.4 手術(shù)治療26
• 1.5 AR動物模型的研究進展26-27
• 1.5.1 實驗動物的選擇26
• 1.5.2 變應原的選擇26-27
• 1.6 綠原酸的研究進展27-32
• 1.6.1 綠原酸的抗菌作用28
• 1.6.2 綠原酸的抗病毒作用28
• 1.6.3 綠原酸的抗氧化作用28-29
• 1.6.4 綠原酸的抗腫瘤作用29
• 1.6.5 綠原酸的心血管保護作用29
• 1.6.6 綠原酸的免疫調(diào)節(jié)作用29-30
• 1.6.7 綠原酸的抗肝纖維化作用30
• 1.6.8 綠原酸的調(diào)節(jié)糖、脂代謝作用30
• 1.6.9 綠原酸的抗乳腺炎作用30-32
• 第2章 OVA誘導的小鼠過敏性鼻炎模型的建立32-38
• 2.1 材料32
• 2.1.1 實驗動物32
• 2.1.2 試劑及藥物32
• 2.1.3 主要儀器32
• 2.2 方法32-34
• 2.2.1 造模方法32-33
• 2.2.2 分組與給藥33
• 2.2.3 樣品收集33
• 2.2.4 指標觀察33-34
• 2.2.5 統(tǒng)計學分析34
• 2.3 結(jié)果34-36
• 2.3.1 不同滴鼻劑量OVA對小鼠的行為學指標的影響34-35
• 2.3.2 不同滴鼻劑量OVA對小鼠鼻腔分泌物的影響35-36
• 2.3.3 不同滴鼻劑量OVA對小鼠血清中組胺、IgE的影響36
• 2.4 討論36-38
• 第3章 綠原酸對OVA誘導的小鼠過敏性鼻炎的影響38-53
• 3.1 材料38-39
• 3.1.1 實驗動物38
• 3.1.2 試劑及藥物38-39
• 3.1.3 重要儀器39
• 3.2 方法39-43
• 3.2.1 造模方法39-40
• 3.2.2 分組與給藥40
• 3.2.3 樣品收集40
• 3.2.4. 檢測AR小鼠行為學40
• 3.2.5 檢測AR小鼠鼻腔分泌物的重量40
• 3.2.6 觀察AR小鼠臟器指數(shù)40-41
• 3.2.7 檢測AR小鼠鼻腔灌洗液中IL-4、IFN_(-γ)的水平41
• 3.2.8 檢測AR小鼠血清中組胺、IgE及IL-4、IFN_(-γ)、IL-5 和IL-10的水平41
• 3.2.9 檢測AR小鼠鼻黏膜組織中IL-4、IFN_(-γ)、IL-5 和IL-10mRNA的水平41-43
• 3.3 統(tǒng)計學分析43
• 3.4 結(jié)果43-50
• 3.4.1 綠原酸對AR小鼠行為學影響43-44
• 3.4.2 綠原酸對AR小鼠鼻腔分泌物重量的影響44-45
• 3.4.3 綠原酸對AR小鼠臟器指數(shù)的影響45-47
• 3.4.4 綠原酸對小鼠鼻腔灌洗液中IL-4、IFN_(-γ)含量的影響47
• 3.4.5 綠原酸對小鼠血清組胺和IgE及IL-4、IFN_(-γ)、IL-5 和IL-10的含量的影響47-49
• 3.4.6 綠原酸對小鼠鼻黏膜組織IL-4mRNA、IFN_(-γ) mRNA、IL-5mRNA和IL-10 mRNA表達的影響49-50
• 3.5 討論50-53
• 結(jié)論53-54
• 參考文獻54-64
• 作者簡介及在學期間所取得的科研成果64-65
• 致謝65

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