目的探討線粒體靶向肽SS31及RIP抑制劑Necrostatin-1 (Nec-1)對H₂O₂誘導的氧化應激損傷ARPE-19細胞的保護作用。方法選擇400μmol·L^-1 H₂O₂構建氧化應激損傷模型;根據MTT結果篩選出1μmol·L^-1 SS31、40μmol·L^-1 Nec-1作為實驗最佳濃度。將培養(yǎng)的細胞分為對照組、SS31+Nec-1組、H₂O₂組、SS31+H₂O₂組、SS31+Nec-1+H₂O₂組、Nec-1+H₂O₂組。利用MTT測定細胞存活率,雙氯熒光素染色測定細胞活性氧自由基(ROS)水平,JC-1染色測定線粒體膜電位,AnnexinV/PI雙染檢測細胞PI陽性率,Western blot法檢測RIP3蛋白表達水平。結果與對照組相比,H<...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑
    1.2 方法
        1.2.1 細胞培養(yǎng)和分組
        1.2.2 MTT測定細胞存活率
        1.2.3 雙氯熒光素染色測定細胞ROS水平
        1.2.4 JC-1染色測定線粒體膜電位
        1.2.5 AnnexinV/PI雙染色檢測細胞PI陽性率
        1.2.6 Western blot 檢測RIP3蛋白表達水平
    1.3 統(tǒng)計學分析
2 結果
    2.1 各組APRE-19細胞存活率情況和形態(tài)變化
    2.2 熒光顯微鏡下雙氯熒光素染色結果
    2.3 各組細胞線粒體膜電位和PI陽性率變化
    2.4 各組細胞RIP3蛋白表達情況
3 討論



本文編號：3767435