發(fā)布時間：2022-02-17 17:45

　　研究背景感音神經(jīng)性聾（Sensorineural hearing loss,SNHL）占耳聾很大部分,主要是因感覺毛細(xì)胞丟失或傳入神經(jīng)到聽覺皮層傳導(dǎo)通路受損引起的聽力閾值的升高。內(nèi)耳突觸數(shù)量改變或功能障礙導(dǎo)致毛細(xì)胞與螺旋神經(jīng)節(jié)細(xì)胞之間的信號傳遞異常,是引起感音神經(jīng)性聾重要原因之一�；蛲蛔兒铜h(huán)境因素,都可造成毛細(xì)胞的不可逆損傷或?qū)е聝?nèi)毛細(xì)胞突觸的退化,導(dǎo)致聽力喪失�！岸佂挥|病”（cochlear synaptopathy,CS）指毛細(xì)胞數(shù)量保持不變的情況下,內(nèi)耳毛細(xì)胞與聽神經(jīng)纖維之間的傳遞遞質(zhì)的突觸減少,可能是感音神性聾尤其是老年性聾重要的發(fā)病機(jī)制之一。課題組既往研究發(fā)現(xiàn)Dynamin1蛋白是維持突觸囊泡內(nèi)吞的關(guān)鍵蛋白,并受到miR-30b和miR-140的調(diào)控;同時Dynamin1及miR-30b和miR-140在不同年齡段內(nèi)耳差異表達(dá)。即Dynamin1在老年鼠表達(dá)下降,miR-30b和miR-140在老年鼠表達(dá)上調(diào)。但Dynamin蛋白更深入的調(diào)控機(jī)制及其他參與突觸調(diào)控的基因尚不清楚。競爭性內(nèi)源RNA（competing endogenous RNA,ceRNA）指lncRNA... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學(xué)重慶市

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

樣品測序質(zhì)量評估2.3.3成年鼠與老年鼠差異表達(dá)分析

陸軍軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文15計(jì)有335個節(jié)點(diǎn)分子，2595條ceRNA網(wǎng)絡(luò)關(guān)系（圖2）。其中紅色節(jié)點(diǎn)代表上調(diào)，藍(lán)色代表下調(diào)；紅色線條代表正向關(guān)系，藍(lán)色代表負(fù)向關(guān)系，灰色代表miRNA調(diào)控其它分子；圓點(diǎn)節(jié)點(diǎn)代表mRNA分子，圓點(diǎn)加外圈黃色代表lncRNA分子，三角形代表miRNA分子。圖形整體結(jié)構(gòu)：1號區(qū)域是mRNA，2號區(qū)域是lncRNA，1、2號區(qū)域總體受到miR-30b-3p的調(diào)控(都是miR-30b的靶向分子)；3號區(qū)域是mRNA，4號區(qū)域是lncRNA，3、4號區(qū)域總體受到miR-140-3p的調(diào)控(都是miR-140b的靶向分子)。圖2Dnm1，miR-140、miR-30b與差異RNA共表達(dá)CeRNA網(wǎng)絡(luò)圖以Dnm1，miR-140、miR-30b為核心構(gòu)建的ceRNA網(wǎng)絡(luò)圖：篩選閾值高于0.9且與Dnm1，miR-30b及miR-140有共表達(dá)關(guān)系的RNA分子為：Gm10684，2900079G21Rik，1700036A12Rik，B830012L14Rik，Gm11815，Gm19967。詳細(xì)調(diào)控關(guān)系見圖3。

陸軍軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文16圖3Dnm1、miR-30b及miR-140ceRNA網(wǎng)絡(luò)圖（閾值＞0.9）2.4討論內(nèi)吞作用(endocytosis)即胞吞，是通過包圍細(xì)胞外物質(zhì)形成內(nèi)吞泡，隨后脫離質(zhì)膜進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的過程。突觸將信號從感覺細(xì)胞或者神經(jīng)元傳遞至其他神經(jīng)元或者不同的靶細(xì)胞是通過釋放神經(jīng)遞質(zhì)實(shí)現(xiàn)的，而神經(jīng)遞質(zhì)釋放是在突觸前膜活性域進(jìn)行的，每個內(nèi)毛細(xì)胞含有5-30個活性域，其數(shù)目因物種及部位不同有差異。內(nèi)毛細(xì)胞是耳蝸內(nèi)主要的聽覺感受細(xì)胞，與外毛細(xì)胞分別受不同的螺旋神經(jīng)元(spiralganglionNeuron，SGN)支配[23],每一個Ⅰ型螺旋神經(jīng)元發(fā)出一條無髓鞘、無突起的神經(jīng)突與單個內(nèi)毛細(xì)胞形成突觸連接，因在透射鏡下呈帶狀排列，故稱為帶狀突觸（ribbonsynapse）[24]。CME是突觸前膜主要的胞吞方式之一[25]。在這個過程中，Dynamin蛋白可使網(wǎng)格蛋白包被小窩與質(zhì)膜分開[8]。為深入研究Dnm1在內(nèi)耳的功能及其調(diào)控機(jī)制，我們采用轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)，尋找可能參與Dnm1，miR-30b，miR-140調(diào)控的lncRNA。轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)的迅速發(fā)展使得轉(zhuǎn)錄組學(xué)研究取得了空前的突破，用于發(fā)現(xiàn)和表征各種新的RNA分子，包括microRNAs，內(nèi)源性siRNAs，circRNAs及l(fā)ncRNA[8]。從結(jié)構(gòu)上看，lncRNA與mRNA非常相似，具有剪接、聚腺苷酸化和帽狀結(jié)構(gòu)，但是它們不是編碼RNA，不能翻譯成蛋白質(zhì)。越來越多的研究表明lncRNA與多種器官及疾病如心臟[27]和眼睛[28]，癌癥[29]等有關(guān)，在細(xì)胞發(fā)育、分化、增殖、遷移、轉(zhuǎn)移等多種生理過程中發(fā)揮重要作用[30]。lncRNA對神經(jīng)系統(tǒng)的影響也得到了廣泛的研究，lncRNA在發(fā)育階段和成年的大腦中高表達(dá)，可影響神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程，如神經(jīng)發(fā)生、突觸發(fā)生、細(xì)胞遷移、細(xì)胞類型分化、神經(jīng)突生長、突觸可塑性等[31]。在時空上，lncRNA在特定位點(diǎn)(

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]老年性聾小鼠耳蝸帶狀突觸損傷特點(diǎn)及機(jī)制研究[J]. 魏薇,楊麗輝,熊偉,柳柯,馬秀嵐,龔樹生,杜政德.  中華耳科學(xué)雜志. 2019(02)
[2]耳蝸毛細(xì)胞miR-30b對Dynamin基因靶向調(diào)控的研究[J]. 李洋,唐小林,余菲,李華君,袁偉.  四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2018(03)
[3]miR-140在內(nèi)耳毛細(xì)胞中的表達(dá)及其對突觸蛋白Dynamin-1的調(diào)控作用[J]. 唐小林,李洋,余菲,賈立峰,李華君,袁偉.  第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(11)
[4]銜接蛋白AP-2在不同發(fā)育時期小鼠耳蝸毛細(xì)胞中的表達(dá)[J]. 顧翔,陳知己,蔡婷,宋銳,周小清,袁偉.  聽力學(xué)及言語疾病雜志. 2015(06)
[5]microRNAs and ceRNAs: RNA networks in pathogenesis of cancer[J]. Xiangqian Su,Jiadi Xing,Zaozao Wang,Lei Chen,Ming Cui,Beihai Jiang.  Chinese Journal of Cancer Research. 2013(02)
[6]KCNQ2/3鉀通道電流特征及M1受體的調(diào)節(jié)作用[J]. 賈慶忠,賈占峰,張英俊,劉伯一,張海林.  中國藥理學(xué)通報(bào). 2005(10)



本文編號：3629844