研究背景感音神經(jīng)性聾（Sensorineural hearing loss,SNHL）占耳聾很大部分,主要是因感覺毛細胞丟失或傳入神經(jīng)到聽覺皮層傳導通路受損引起的聽力閾值的升高。內耳突觸數(shù)量改變或功能障礙導致毛細胞與螺旋神經(jīng)節(jié)細胞之間的信號傳遞異常,是引起感音神經(jīng)性聾重要原因之一。基因突變和環(huán)境因素,都可造成毛細胞的不可逆損傷或導致內毛細胞突觸的退化,導致聽力喪失。“耳蝸突觸病”（cochlear synaptopathy,CS）指毛細胞數(shù)量保持不變的情況下,內耳毛細胞與聽神經(jīng)纖維之間的傳遞遞質的突觸減少,可能是感音神性聾尤其是老年性聾重要的發(fā)病機制之一。課題組既往研究發(fā)現(xiàn)Dynamin1蛋白是維持突觸囊泡內吞的關鍵蛋白,并受到miR-30b和miR-140的調控;同時Dynamin1及miR-30b和miR-140在不同年齡段內耳差異表達。即Dynamin1在老年鼠表達下降,miR-30b和miR-140在老年鼠表達上調。但Dynamin蛋白更深入的調控機制及其他參與突觸調控的基因尚不清楚。競爭性內源RNA（competing endogenous RNA,ceRNA）指lncRNA... 

【文章來源】：中國人民解放軍陸軍軍醫(yī)大學重慶市

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

樣品測序質量評估2.3.3成年鼠與老年鼠差異表達分析

陸軍軍醫(yī)大學碩士學位論文15計有335個節(jié)點分子，2595條ceRNA網(wǎng)絡關系（圖2）。其中紅色節(jié)點代表上調，藍色代表下調；紅色線條代表正向關系，藍色代表負向關系，灰色代表miRNA調控其它分子；圓點節(jié)點代表mRNA分子，圓點加外圈黃色代表lncRNA分子，三角形代表miRNA分子。圖形整體結構：1號區(qū)域是mRNA，2號區(qū)域是lncRNA，1、2號區(qū)域總體受到miR-30b-3p的調控(都是miR-30b的靶向分子)；3號區(qū)域是mRNA，4號區(qū)域是lncRNA，3、4號區(qū)域總體受到miR-140-3p的調控(都是miR-140b的靶向分子)。圖2Dnm1，miR-140、miR-30b與差異RNA共表達CeRNA網(wǎng)絡圖以Dnm1，miR-140、miR-30b為核心構建的ceRNA網(wǎng)絡圖：篩選閾值高于0.9且與Dnm1，miR-30b及miR-140有共表達關系的RNA分子為：Gm10684，2900079G21Rik，1700036A12Rik，B830012L14Rik，Gm11815，Gm19967。詳細調控關系見圖3。

陸軍軍醫(yī)大學碩士學位論文16圖3Dnm1、miR-30b及miR-140ceRNA網(wǎng)絡圖（閾值＞0.9）2.4討論內吞作用(endocytosis)即胞吞，是通過包圍細胞外物質形成內吞泡，隨后脫離質膜進入細胞內的過程。突觸將信號從感覺細胞或者神經(jīng)元傳遞至其他神經(jīng)元或者不同的靶細胞是通過釋放神經(jīng)遞質實現(xiàn)的，而神經(jīng)遞質釋放是在突觸前膜活性域進行的，每個內毛細胞含有5-30個活性域，其數(shù)目因物種及部位不同有差異。內毛細胞是耳蝸內主要的聽覺感受細胞，與外毛細胞分別受不同的螺旋神經(jīng)元(spiralganglionNeuron，SGN)支配[23],每一個Ⅰ型螺旋神經(jīng)元發(fā)出一條無髓鞘、無突起的神經(jīng)突與單個內毛細胞形成突觸連接，因在透射鏡下呈帶狀排列，故稱為帶狀突觸（ribbonsynapse）[24]。CME是突觸前膜主要的胞吞方式之一[25]。在這個過程中，Dynamin蛋白可使網(wǎng)格蛋白包被小窩與質膜分開[8]。為深入研究Dnm1在內耳的功能及其調控機制，我們采用轉錄組測序技術，尋找可能參與Dnm1，miR-30b，miR-140調控的lncRNA。轉錄組測序技術的迅速發(fā)展使得轉錄組學研究取得了空前的突破，用于發(fā)現(xiàn)和表征各種新的RNA分子，包括microRNAs，內源性siRNAs，circRNAs及l(fā)ncRNA[8]。從結構上看，lncRNA與mRNA非常相似，具有剪接、聚腺苷酸化和帽狀結構，但是它們不是編碼RNA，不能翻譯成蛋白質。越來越多的研究表明lncRNA與多種器官及疾病如心臟[27]和眼睛[28]，癌癥[29]等有關，在細胞發(fā)育、分化、增殖、遷移、轉移等多種生理過程中發(fā)揮重要作用[30]。lncRNA對神經(jīng)系統(tǒng)的影響也得到了廣泛的研究，lncRNA在發(fā)育階段和成年的大腦中高表達，可影響神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程，如神經(jīng)發(fā)生、突觸發(fā)生、細胞遷移、細胞類型分化、神經(jīng)突生長、突觸可塑性等[31]。在時空上，lncRNA在特定位點(

【參考文獻】：
期刊論文
[1]老年性聾小鼠耳蝸帶狀突觸損傷特點及機制研究[J]. 魏薇,楊麗輝,熊偉,柳柯,馬秀嵐,龔樹生,杜政德.  中華耳科學雜志. 2019(02)
[2]耳蝸毛細胞miR-30b對Dynamin基因靶向調控的研究[J]. 李洋,唐小林,余菲,李華君,袁偉.  四川大學學報(醫(yī)學版). 2018(03)
[3]miR-140在內耳毛細胞中的表達及其對突觸蛋白Dynamin-1的調控作用[J]. 唐小林,李洋,余菲,賈立峰,李華君,袁偉.  第三軍醫(yī)大學學報. 2018(11)
[4]銜接蛋白AP-2在不同發(fā)育時期小鼠耳蝸毛細胞中的表達[J]. 顧翔,陳知己,蔡婷,宋銳,周小清,袁偉.  聽力學及言語疾病雜志. 2015(06)
[5]microRNAs and ceRNAs: RNA networks in pathogenesis of cancer[J]. Xiangqian Su,Jiadi Xing,Zaozao Wang,Lei Chen,Ming Cui,Beihai Jiang.  Chinese Journal of Cancer Research. 2013(02)
[6]KCNQ2/3鉀通道電流特征及M1受體的調節(jié)作用[J]. 賈慶忠,賈占峰,張英俊,劉伯一,張海林.  中國藥理學通報. 2005(10)



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