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PAR-2破壞變應性鼻炎上皮屏障功能及緊密連接蛋白表達的研究

發(fā)布時間:2022-02-08 17:03
  目的:探討變應性鼻炎(Allergic rhinitis,AR)患者鼻粘膜上皮蛋白酶激活受體-2(protease-activated receptors-2,PAR-2)對鼻粘膜上皮屏障功能的影響及與緊密連接蛋白(tight junctions,TJs)表達的相關性。探究AR的發(fā)病機制,為其治療和預防提供理論依據(jù)。方法:1、檢測AR患者鼻黏膜組織(n=18)和健康對照組鼻黏膜組織(n=26)PAR-2和緊密連接蛋白Claudin-1,-3,-4,-7,-8,-9,-12,-18,ZO-1,ZO-2,tricellulin,Occludin,JAM-1表達情況。采用免疫組化(IHC)、免疫印跡(Western blot)、實時熒光定量PCR(RT-qPCR)方法檢測各目的基因表達,并進行PAR-2與TJs mRNA表達的相關性分析。2、取鼻粘膜組織進行鼻粘膜上皮細胞原代培養(yǎng),用粉塵螨變應原Der p1刺激細胞,同時分別用PAR-2激動劑和抑制劑刺激細胞后,收集細胞采用RT-qPCR方法檢測PAR-2和TJs的表達,并進行FD4濃度測定,評價上皮細胞滲透性。結(jié)果:1、PAR-2與TJs在... 

【文章來源】:南昌大學江西省211工程院校

【文章頁數(shù)】:48 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

PAR-2破壞變應性鼻炎上皮屏障功能及緊密連接蛋白表達的研究


AR患者鼻粘膜上皮中TJs和PAR-2表達免疫組化結(jié)果

半定量分析,免疫組化,患者,蛋白


圖 2.2 AR 患者鼻粘膜上皮中 TJs 和 PAR-2 表達免疫組化結(jié)果半定量分析色代表正常對照組,黑色代表 AR 組。TJs 蛋白 Claudin-1,-3,-7,-12、JAM-A、Occlud-1 在 AR 患者鼻粘膜上皮表達較正常對照組低,在 AR 患者鼻粘膜上皮細胞中 PAR-達較對照組高,差異均具有統(tǒng)計學意義,其中*P<0.05,**P<0.01。2.2 AR 患者鼻粘膜上皮中 TJs 和 PAR-2 表達免疫印跡結(jié)果分析使用免疫印跡法對各 TJs 蛋白和 PAR-2 蛋白進行定量分析,對 WB 圖片掃描,灰度分析結(jié)果如圖 2.3 - 2.4 所示:Claudin-1,-3,-7,-12、JAM-A、Occlud-1 在 AR 組表達下降,在 AR 患者鼻粘膜上皮細胞中 PAR-2 表達較對照組異具有統(tǒng)計學差異(p < 0.05)。

免疫印跡,患者,蛋白


圖 2.2 AR 患者鼻粘膜上皮中 TJs 和 PAR-2 表達免疫組化結(jié)果半定量分析藍色代表正常對照組,黑色代表 AR 組。TJs 蛋白 Claudin-1,-3,-7,-12、JAM-A、Occludin、ZO-1 在 AR 患者鼻粘膜上皮表達較正常對照組低,在 AR 患者鼻粘膜上皮細胞中 PAR-2 表達較對照組高,差異均具有統(tǒng)計學意義,其中*P<0.05,**P<0.01。2.2.2 AR 患者鼻粘膜上皮中 TJs 和 PAR-2 表達免疫印跡結(jié)果分析使用免疫印跡法對各 TJs 蛋白和 PAR-2 蛋白進行定量分析,對 WB 圖片進行掃描,灰度分析結(jié)果如圖 2.3 - 2.4 所示:Claudin-1,-3,-7,-12、JAM-A、Occludin、ZO-1 在 AR 組表達下降,在 AR 患者鼻粘膜上皮細胞中 PAR-2 表達較對照組高,差異具有統(tǒng)計學差異(p < 0.05)。


本文編號:3615421

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