發(fā)布時間：2022-01-26 12:35

　　目的喉鱗狀細(xì)胞癌（Laryngeal Squamous Cell Carcinoma,LSCC）是耳鼻咽喉領(lǐng)域常見的惡性腫瘤,是全身第二大常見的頭頸癌,發(fā)病率呈上升趨勢,且患者復(fù)發(fā)率高,生存率低。從基因水平上研究治療LSCC的新方法已成為目前研究的熱點(diǎn)。據(jù)報(bào)道,Micro RNA-101（miR-101）是包括喉鱗狀細(xì)胞癌（LSCC）在內(nèi)的多種惡性腫瘤中的腫瘤抑制因子。然而,miR-101在LSCC發(fā)展中的作用和分子機(jī)制尚未完全闡明。為進(jìn)一步探討出LSCC的新的治療方案,提高臨床生存率,本次研究把LSCC細(xì)胞系作為研究對象,通過多種實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)一步探究miR-101對LSCC的影響及作用機(jī)制,以期為該病的臨床治療提供理論指導(dǎo)。方法采用RT-qPCR法檢測miR-101及zeste同源物2（EZH2）m RNA的表達(dá)。利用MTS法測定細(xì)胞增殖活性。通過流式細(xì)胞術(shù)法檢測細(xì)胞凋亡指數(shù),并通過測定半胱天蛋白酶-3（caspase-3）活性進(jìn)一步評估細(xì)胞凋亡情況。采用Western Blot法測定EZH2蛋白表達(dá)。利用生物信息學(xué)軟件,預(yù)測miR-101可能調(diào)控的靶基因,并通過雙熒光素酶報(bào)告分析和R... 

【文章來源】：鄭州大學(xué)河南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

通過RT-qPCR測定在LSCC細(xì)胞系（TU-177，AMC-HN-8，Hep-2，TU-212）和NHOK細(xì)胞中miR-101水平

4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果并采用 RT-qPCR 對 miR-101 過表達(dá)效率進(jìn)行分析，結(jié)果顯示（表 4.2-NC 轉(zhuǎn)染組相比，miR-101 模擬物轉(zhuǎn)染的喉癌細(xì)胞 Hep-2、TU-212 中 m水平明顯升高（P＜0.05）（圖 4.2），由此說明，通過轉(zhuǎn)染 miR-101 模擬構(gòu)建 miR-101 過表達(dá)細(xì)胞模型，轉(zhuǎn)染條件合適，轉(zhuǎn)染效率高，可用于研究。表 4.2 轉(zhuǎn)染后檢測 hep-2、TU-212 中 miR-101 的表達(dá)水平細(xì)胞類型 分組 CT 比值hep-2 miR-NC 1±0.082miR-101 4.7±0.513TU-212 miR-NC 1±0.089miR-101 5.802±0.512

4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表 4.3 過表達(dá) miR-101 對 hep-2、TU-212 細(xì)胞中增殖能力的影響（OD 比值）類型 分組 0h 24h 48h 7-2 miR-NC 0.23±0.032 0.514±0.051 0.800±0.089 1.298miR-101 0.22±0.030 0.310±0.054 0.431±0.051 0.521±212 miR-NC 0.21±0.029 0.531±0.049 0.818±0.076 1.305±miR-101 0.21±0.030 0.380±0.027 0.491±0.054 0.631±

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]ABO blood group is a predictor of survival in patients with laryngeal cancer[J]. Ting Jin,Pei-Jing Li,Xiao-Zhong Chen,Wei-Han Hu.  Chinese Journal of Cancer. 2016(12)
[2]Incidence and mortality of laryngeal cancer in China, 2011[J]. Lingbin Du,Huizhang Li,Chen Zhu,Rongshou Zheng,Siwei Zhang,Wanqing Chen.  Chinese Journal of Cancer Research. 2015(01)



本文編號：3610500