目的:通過構建pVAX1-Der p2-A20真核表達載體,并經聚乳酸-羥基乙酸共聚物[poly（lactic-co-glycolic acid）,PLGA]包載為PLGA-pVAX1-Der p2-A20（PpDA）納米DNA疫苗,探討其對重組屋塵螨Der p2變應原誘導的變應性鼻炎（Allergic rhinitis,AR）模型小鼠的特異性免疫治療效果及其機制,為AR的治療策略提供新的思路。方法:（1）采用乳化溶液蒸發(fā)法制備PpDA,掃描電鏡觀察其形態(tài)學特點,體外細胞轉染實驗驗證其在細胞中的表達。（2）大量誘導表達、純化Der p2重組蛋白,采用ELISA和蛋白免疫印跡（Western blot）分析其免疫學特性。（3）50只健康雌性Balb/c小鼠,6-8W齡,隨機分為5組,正常組（NC）、模型組（AR）、納米疫苗治療組（PpDA）、空白納米治療組（PLGA）和裸質粒pVAX1-Der p2-A20治療組（pDA）。AR組、PpDA組、PLGA組和pDA組分別在第0,7,14天經腹腔注射100μg Der p2重組蛋白和15μg霍亂毒素（Cholera toxin,CT）進行致敏... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學貴州省

【文章頁數】：79 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

重組質粒pVAX1-Derp2-A20（pDA）的部分測序圖

重組質粒 pVAX1-Der p2-A20（pDA）的部分測encing map of recombinant plasmid pVAX1-Der p2-征封的納米粒溶液外觀呈乳白色，均質，半干燥后，為白色粉末，可溶于水，表明成功 SEM 下呈橢圓形、光滑的顆粒，外形完為（292±2.34）nm，結果見圖 2。

遵義醫(yī)科大學碩士學位論文 胡文會3.2.3 PpmDA 的體外表達體外細胞轉染實驗結果如圖 3 所示，PpmDA轉染組和 pmDA 轉染組均能在激光共聚焦顯微鏡下檢測到熒光。然而，空白 PLGA 組和 NC 組中未檢測到熒光，表明質粒 pDA 在經 PLGA 包封后可以在細胞內表達，并保持其生物活性。

【參考文獻】：
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本文編號：3421792