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小牛血去蛋白提取物對苯扎氯銨誘導小鼠干眼的療效和機制

發(fā)布時間:2017-04-18 10:11

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【摘要】:目的探討小牛血去蛋白提取物滴眼液(DCBE)對苯扎氯銨誘導的小鼠干眼的治療作用及機制。方法選用C57BL/6雄性小鼠60只(120眼),使用0.2%的苯扎氯銨溶液滴眼在人工干燥環(huán)境下誘導干眼。通過觀測淚膜破裂時間、角膜熒光素鈉染色、眼表炎癥指數(shù)、淚液分泌量(酚紅棉線長度)的相應指標,對比正常小鼠的同類眼表數(shù)據(jù)。在誘導的第14天,選擇出符合入組指標的小鼠,隨機分成A、B、C、D四組。A組為干眼對照組,B、C、D組分別為溶劑對照組,小牛血去蛋白提取物滴眼液治療組,小牛自體血清治療組。治療后第0、1、4、7天進行淚眼分泌量、角膜炎癥程度、淚膜破裂時間及角膜上皮熒光素鈉染色評估。治療結(jié)束后摘取小鼠眼球,進行HE及過碘酸-希夫(PAS)染色,Ki-67免疫組化,K10及MUC1免疫熒光標記,組織原位凋亡檢測角膜上皮凋亡情況;以及Western blot檢測角結(jié)膜組織中K10表達水平,分析各組差異。結(jié)果經(jīng)篩選共72只眼入選進行治療實驗,每組18只眼。對所有小鼠眼睛進行分析和測算后:使用小牛血去蛋白提取物的小鼠相較于其他組淚膜破裂時間延長,角膜熒光素染色范圍縮小,評分下降,眼表炎癥指數(shù)有一定改善,淚液分泌量無明顯變化。小牛血去蛋白提取物亦能能減少角膜上皮細胞凋亡、減輕角膜鱗狀上皮化生(K10表達下降)、加快角膜上皮修復速度(Ki-67表達上升)和增加杯狀細胞數(shù)量(MUC5AC),穩(wěn)定淚膜。結(jié)論小牛血去蛋白提取物對苯扎氯銨誘導的小鼠干眼動物模型有一定的治療作用,作用機制可能與DCBE能夠促進角膜上皮修復,增加角膜粘蛋白的表達,維持淚膜穩(wěn)定等因素有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:干眼 治療 小牛血去蛋白提取物 小鼠 苯扎氯銨
【學位授予單位】:南華大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R777.34
【目錄】:
  • 摘要4-6
  • Abstract6-10
  • 第1章前言10-12
  • 第2章材料與方法12-16
  • 2.1 主要設(shè)備和耗材12-13
  • 2.2 主要耗材與試劑13-14
  • 2.3 小鼠干眼模型制作14-16
  • 第3章實驗過程16-24
  • 3.1 小鼠干眼模型臨床指標評估16-22
  • 3.1.1 淚膜破裂時間(Tear film break-up time, TBUT)16
  • 3.1.2 角膜熒光素染色16-17
  • 3.1.3 炎癥指數(shù)17
  • 3.1.4 淚液分泌量檢測17
  • 3.1.5 冰凍切片17
  • 3.1.6 蘇木素-伊紅染色(HE染色)17-18
  • 3.1.7 石蠟切片&過碘酸-希夫染色(periodic acid-schiff,PAS染色)18-19
  • 3.1.8 組織原位凋亡檢測19
  • 3.1.9 間接免疫熒光染色法19-20
  • 3.1.10 免疫組織化學染色法20-21
  • 3.1.11 Western Blot蛋白檢測21-22
  • 3.2 統(tǒng)計分析22-24
  • 第4章結(jié)果24-30
  • 4.1 0.2%BAC+人工干燥環(huán)境誘導小鼠干眼模型結(jié)果24
  • 4.2 DCBE能提高淚膜穩(wěn)定性,,修復上皮缺損24-26
  • 4.3 DCBE能減輕角膜鱗狀上皮化生26-27
  • 4.4 DCBE能減少角膜上皮細胞凋亡27
  • 4.5 DCBE能加快角膜上皮修復速度27-28
  • 4.6 DCBE增加杯狀細胞數(shù)量28-30
  • 第5章討論30-34
  • 第6章結(jié)論34-36
  • 參考文獻36-40
  • 綜述40-46
  • 參考文獻43-46
  • 附錄46-48
  • 作者攻讀學位期間的科研成果48-50
  • 致謝50

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本文編號:314631


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