本文關鍵詞：miR-126對腺樣囊性癌生物學行為影響的機制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:淚腺腺樣囊性癌(LACC)是最常見的淚腺惡性上皮性腫瘤,在淚腺腫瘤中,僅次于多形性腺瘤,占29%。由于LACC具有惡性程度高,易復發(fā),易轉移等生物學特點,目前對LACC的治療主要采用以手術切除為主,術后輔以放化療的綜合治療方案,但該方法對腫瘤局部復發(fā)和遠處轉移的控制尚不理想。微小RNA是一類長度為18~25個核苷酸的內源性單鏈非編碼小分子RNA,通過與靶基因的m RNA堿基配對,使m RNA降解或抑制m RNA的翻譯,參與細胞的增殖、分化和凋亡等過程。已有報道m(xù)i R-126作為抑癌因子,在多種腫瘤中均有下調,其抑制作用及機制在肺癌、乳腺癌、胃癌等中均得到證實,但在LACC中尚未見報道。本實驗旨在研究mi R-126在腺樣囊性癌中的表達及其作用和可能的調控機制。方法:首先,應用實時定量PCR方法檢測mi R-126在腺樣囊性癌高轉移株ACC-M和低轉移株ACC-2細胞中的差異表達;然后構建pc DNA3/pri-mi R-126質粒、p Silencer/antigo-mi R-126質粒,應用實時定量PCR方法檢測兩種質粒的有效性,同時在熒光顯微鏡下檢測細胞的轉染效率;之后,在腺樣囊性癌細胞系ACC-M中,過表達或封閉mi R-126后,通過MTT、細胞集落形成、遷移與侵襲實驗檢測ACC-M細胞表型的變化;最后,應用生物信息學方法篩選出VEGF-A為mi R-126的候選靶基因,通過Western blot技術檢測在mi R-126水平不同的ACC-M各組細胞中靶基因蛋白水平的變化。結果:Real-time PCR結果顯示,mi R-126在腺樣囊性癌高轉移株ACC-M中的表達明顯低于低轉移株ACC-2;轉染質粒后,在熒光顯微鏡下觀察到綠色熒光,證明轉染成功;分別轉染過表達mi R-126或封閉mi R-126質粒,通過q RT-PCR發(fā)現(xiàn)ACC-M細胞中mi R-126的表達水平出現(xiàn)明顯提高或下降;在ACC-M細胞中,過表達mi R-126增強其功能后,細胞生長活性下降,集落形成能力明顯降低,遷移與侵襲能力亦明顯下降,而封閉mi R-126后則結果相反;通過生物信息學對靶基因篩選,結果表明,VEGF-A為mi R-126的候選靶基因,Western blot結果表明,mi R-126能夠影響VEGF-A蛋白的表達水平。結論:mi R-126在腺樣囊性癌細胞中低表達;在ACC-M細胞中,過表達mi R-126能夠抑制細胞的增殖、侵襲和遷移能力,發(fā)揮抑癌基因的作用;而且通過Western blot實驗表明,mi R-126與VEGF-A存在負性調控作用。通過闡明mi R-126在腺樣囊性癌中的作用及可能作用機制,有助于我們對腺樣囊性癌的發(fā)生、發(fā)展有更深入的了解,同時也為LACC的臨床診斷與治療提供新的方向。
【關鍵詞】：淚腺 腺樣囊性癌 miR-126 細胞增殖 細胞遷移 細胞侵襲 VEGF-A
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R739.7
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 縮略語/符號說明9-10
• 前言10-13
• 研究現(xiàn)狀、成果10-12
• 研究目的12
• 研究方法12-13
• 對象和方法13-28
• 結果28-36
• 討論36-40
• 結論40-41
• 參考文獻41-45
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明45-46
• 綜述 MicroRNA-126的研究進展46-62
• 綜述參考文獻55-62
• 致謝62

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據庫 前5條

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本文編號：306518