本文關鍵詞：微粒皮移植治療皮膚色素脫失相關問題的實驗研究

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【摘要】：目的：1.通過觀察不同剪切時間下微粒皮形態(tài)和活力的比較,來確定微粒皮移植中最佳的剪皮時間；2.在裸鼠背部表皮內注射一定濃度培養(yǎng)好的入表皮黑色素細胞,觀察其局部是否出現(xiàn)色素區(qū),該區(qū)域能否隨時間擴大,最大擴展范圍等,為臨床應用積累理論依據(jù)。方法：第一部分：不同剪切時間下微粒皮形態(tài)和活力的比較隨機選取患者8名.每名選取大腿外側刃厚皮(電動刀刻度定為厚0.25mmm)5cm2,切割成五等分,每份1cm2·,其中4份剪成微粒,剪切時間分別為5、10、15、20分鐘,另一份不剪,作為正常對照組。然后對各組進行組織琥珀酸脫氫酶(SDH)和氧耗量的測定。測定完畢后,送部分組織作常規(guī)HE染色.第二部分：人表皮黑色素細胞裸鼠皮內注射后皮膚組織學的初步觀察細胞實驗：購買美國ScienCell公司的人表皮黑色素細胞-深色(HEM-d)原代細胞,復蘇并培養(yǎng)、傳代、凍存等,在倒置相差顯微鏡觀察HEM-d原代及各代細胞的形態(tài)并拍照；首批細胞主要用來觀察和積累培養(yǎng)經(jīng)驗。第二批HEM-d,原代細胞復蘇并傳為一代后,一部分細胞用來做動物實驗,另一部分細胞繼續(xù)傳代培養(yǎng).動物實驗：雄性SPF級裸鼠(BALB/c-nu)5只,背部表皮下注射培養(yǎng)良好的HEM-d一代細胞,此注射的為含有培養(yǎng)基的細胞,濃度為4×104個/ml；設置對照試驗,皮下注射HEM-d的完全培養(yǎng)基.注射后連續(xù)觀察裸鼠表皮是否出現(xiàn)色素變化,色素區(qū)域是否隨時間擴大;并分別于第1d、15d、30d、60d取注射細胞部位的全層皮膚,于4%多聚甲醛溶液中固定保存,做HE染色,在顯微鏡下觀察黑色素細胞或黑色素顆粒是否存在及其存在的位置。結果：1.微粒皮剪切有個最佳時間點,時間過長微粒皮的活力逐漸減低。2.人表皮黑色素細胞-深色(HEM-d)注射裸鼠表皮內能夠使其皮膚顯黑色,HE染色顯示裸鼠表皮內存在黑色素細胞,且注射后的細胞已成活,黑色著色區(qū)域實驗期間內逐漸擴大。結論：1.微粒皮剪切有一個最合適的時間,剪切時間過長,顆粒大小變化不大,但其活力逐漸降低。2.體外培養(yǎng)的人表皮黑色素細胞注射裸鼠表皮內能夠使其皮膚顯黑色,并隨著時間逐漸變大;HE染色可見種植部位黑色素細胞形態(tài)正常。這為臨床實踐提供了理論依據(jù)。
【關鍵詞】：微粒皮 琥珀酸脫氫酶 氧耗 黑色素細胞 細胞注射
【學位授予單位】：中國人民解放軍醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R622
【目錄】：

• 英文縮略詞表5-6
• 中文摘要6-8
• ABSTRACT8-10
• 第一部分：不同剪切時間下微粒皮形態(tài)和活力的比較10-16
• 前言10
• 材料與方法10-12
• 結果12-14
• 討論14-15
• 參考文獻15-16
• 第二部分：人表皮黑色素細胞裸鼠皮內注射后組織學的初步觀察16-26
• 前言16
• 材料與方法16-21
• 結果21-24
• 討論24
• 參考文獻24-26
• 全文總結26-28
• 文獻綜述28-41
• 參考文獻36-41
• 攻讀學位期間發(fā)表文章情況41-42
• 致謝42

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本文編號：914280