本文關(guān)鍵詞：新型氯化鋰復(fù)合磷酸鈣骨水泥對成骨細(xì)胞增殖及分化的影響

  更多相關(guān)文章： 氯化鋰 磷酸鈣骨水泥 MC3T3-E1細(xì)胞 增殖分化 骨組織工程

【摘要】：目的：研究氯化鋰復(fù)合磷酸鈣骨水泥(Lithium doped calcium phosphate cement, Li/CPC)的理化性質(zhì)及體外生物活性,初步探究Li/CPC對成骨細(xì)胞增殖、分化能力的影響。方法：材料學(xué)實驗：以磷酸鈣骨水泥(Calcium phosphate cement, CPC)為空白對照組,不同鋰含量的Li/CPC為實驗組,檢測各組骨水泥理化性能及體外生物活性。用Gillmore雙針法測定骨水泥的初凝時間及終凝時間,用顯微CT (Micro-computed tomography, Micro-CT)檢測材料的孔徑分布和孔隙率,用電子動靜態(tài)萬能材料試驗機(jī)檢測材料的抗壓強(qiáng)度,用掃描電子顯微鏡(Scanning electron microscope, SEM)觀察材料的微觀形貌,使用X射線衍射法(X-ray deffractometer, XRD)和傅里葉變換紅外光譜法(Fourier-transform infrared spectroscopy, FTIR)檢測材料的組成成分及結(jié)構(gòu)。細(xì)胞學(xué)實驗：將骨水泥材料與MC3T3-E1細(xì)胞在體外共培養(yǎng),用SEM觀察細(xì)胞在骨水泥表面的粘附和生長形態(tài),用熒光電子顯微鏡觀察細(xì)胞骨架蛋白的染色,用CCK-8法檢測細(xì)胞增殖能力,用堿性磷酸酶(Alkaline phosphatase, ALP)檢測試劑盒檢測ALP活性,用ALP染色和茜素紅染色法觀察細(xì)胞成骨分化及細(xì)胞外基質(zhì)礦化能力,用RT-PCR方法檢測Ⅰ型膠原(COLL-1).骨鈣素(OCN)、骨保護(hù)素(OPG)、p-連環(huán)蛋白(p-Catenin)等成骨相關(guān)基因mRNA的表達(dá)情況。結(jié)果：材料學(xué)實驗：鋰的摻雜未明顯改變CPC的理化性質(zhì),包括凝固時間、孔徑分布和孔隙率、抗壓強(qiáng)度、組成成分及微觀形貌。細(xì)胞學(xué)實驗：SEM結(jié)果表明MC3T3-E1細(xì)胞能夠很好地在材料表面粘附生長,熒光顯微鏡下觀察Li/CPC組細(xì)胞骨架較為飽滿,肌動蛋白較伸展,CCK-8實驗表明Li/CPC能夠促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖,ALP活性、ALP染色和茜素紅染色結(jié)果表明Li/CPC能夠促進(jìn)成骨細(xì)胞的分化及礦化,基因檢測結(jié)果表明Li/CPC能夠促進(jìn)成骨細(xì)胞成骨相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)論：Li/CPC保持了CPC優(yōu)良理化性能,具有良好的體外生物活性和骨傳導(dǎo)性；Li/CPC能夠促進(jìn)成骨細(xì)胞的增殖及分化,具有一定的促成骨活性；將糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β, Glycogen synthase kinase-3β)無機(jī)離子抑制劑氯化鋰(Lithium chloride, LiCl)加入CPC或許是骨組織工程研究一個新的方向。
【關(guān)鍵詞】：氯化鋰 磷酸鈣骨水泥 MC3T3-E1細(xì)胞 增殖分化 骨組織工程
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R687
【目錄】：

• 個人簡歷3-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 前言10-13
• 第一章 氯化鋰復(fù)合磷酸鈣骨水泥的制備及理化性能檢測13-26
• 1、材料13-14
• 2、方法14-18
• 3、結(jié)果18-22
• 4、討論22-26
• 第二章 氯化鋰復(fù)合磷酸鈣骨水泥對成骨細(xì)胞增殖及分化的影響26-42
• 1、材料26-27
• 2、方法27-34
• 3、結(jié)果34-39
• 4、討論39-42
• 參考文獻(xiàn)42-50
• 中英文縮略詞表50-52
• 綜述52-75
• 參考文獻(xiàn)68-75
• 致謝75-76
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文76

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本文編號：903471