發(fā)布時(shí)間：2017-09-22 17:17

  本文關(guān)鍵詞：孕晚期嗎啡暴露對子代鼠成癮易感性及伏隔核NR2A和NR2B表達(dá)的影響

  更多相關(guān)文章： 妊娠 嗎啡 CPP N-甲基-D-天冬氨酸 伏隔核

【摘要】：目的:產(chǎn)前嗎啡暴露不僅會(huì)嚴(yán)重影響身心健康,且作用長久,乃至?xí)绊懴乱淮X結(jié)構(gòu)和行為的改變。相關(guān)文獻(xiàn)證明:胚胎期被動(dòng)暴露于嗎啡的新生大鼠會(huì)有行為和大腦神經(jīng)化學(xué)遞質(zhì)的改變,其中包括嗎啡心理依賴;且發(fā)現(xiàn)孕晚期嗎啡暴露可使伏隔核和杏仁核的阿片受體增加,而伏隔核和杏仁核都是與調(diào)控成癮藥物獎(jiǎng)賞效應(yīng)的腦獎(jiǎng)賞通路密切相關(guān)的。于是,我們推測:產(chǎn)前嗎啡暴露可使子代鼠的成癮易感性得到明顯增強(qiáng)。本實(shí)驗(yàn)運(yùn)用條件位置偏愛模型來檢測子代鼠的成癮易感性,并通過檢測伏隔核NR2A和NR2B的表達(dá)來探究其神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制。本實(shí)驗(yàn)?zāi)康闹饕?(1)大鼠孕晚期嗎啡暴露模型的建立;(2)探究孕晚期嗎啡暴露對子代鼠體重及其死亡率的影響;(3)關(guān)于孕晚期嗎啡暴露對子代鼠成癮易感性影響的研究;(4)檢測孕晚期嗎啡暴露的子代鼠伏隔核NMDA受體亞基NR2A和NR2B的表達(dá),從而進(jìn)一步研究孕晚期嗎啡暴露致子代鼠成癮易感性增加的神經(jīng)生物學(xué)機(jī)制。方法:孕14d的SD大鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法分為2組,對照組(C組)和嗎啡組(M組)。M組于孕14~20天頸背部皮下注射嗎啡,每天2次(9:00 am和5:00 pm),嗎啡的首日劑量為2mg/kg,逐日遞增1mg/kg,至6mg/kg維持;C組采用同樣方法用生理鹽水替代嗎啡。(1)對兩組子代鼠出生時(shí)的體重、4周體重、8周體重進(jìn)行稱重并統(tǒng)計(jì)出生后3天、4周及8周的死亡率;(2)隨機(jī)選取上述2組中子代鼠正常喂養(yǎng)到8周后進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)步驟:1)預(yù)實(shí)驗(yàn)階段(1-3d)每組子代鼠在箱的兩側(cè)自由活動(dòng)15min,1次/d,連續(xù)3d,從而使其適應(yīng)實(shí)驗(yàn)箱環(huán)境;并將第2,3天每天大鼠在箱兩側(cè)停留時(shí)間的平均值記為CPP基線值(T0)。將其停留時(shí)間長的一側(cè)箱記為偏愛箱,停留時(shí)間短的一側(cè)箱記為伴藥箱(大鼠在注射嗎啡后放入該側(cè))來訓(xùn)練大鼠。2)條件化訓(xùn)練階段(4-10d)將每組子代鼠皮下注射嗎啡后放入伴藥箱45min,在間隔8h以同樣的方法注射同體積的生理鹽水后放入偏愛側(cè)45min。嗎啡的劑量恒定為3mg/kg,連續(xù)訓(xùn)練7天。3)測試階段(11d)每組子代鼠放在實(shí)驗(yàn)箱兩側(cè)自由活動(dòng)15min,將其在伴藥側(cè)的停留時(shí)間記為CPP測試值(T1)。子代鼠的成癮易感性可通過CPP分值(T=T1-T0)來進(jìn)行評價(jià)。我們根據(jù)CPP分值(T)的大小將M組子代鼠按20%、60%、20%的比例分為高偏愛組(H)、中偏愛組、低偏愛組(L)。為了更為明顯的比較子代鼠嗎啡成癮易感性的差異,我們僅對高偏愛組(H)、低偏愛組(L)與對照組(C)的子代鼠進(jìn)行比較研究。(3)H組,L組和N組每組隨機(jī)取出10只子代鼠,麻醉后斷頭取其伏隔核組織;(4)免疫組化法檢測各組子代鼠伏隔核NR2A和NR2B的表達(dá)。(5)Westernblot-ting法檢測各組子代鼠伏隔核NR2A和NR2B的表達(dá)。結(jié)果:(1)經(jīng)各組子代鼠稱重發(fā)現(xiàn):出生體重M組小于N組(P0.01),出生4周及8周體重M組均小于N組(P0.01)。M組出生3天、4周、8周死亡率均明顯高于N組(P0.01)。(2)經(jīng)過連續(xù)7天的嗎啡條件化訓(xùn)練后,與C組子代鼠比較,M組子代鼠在伴藥側(cè)的停留時(shí)間明顯延長(P0.01);H組子代鼠CPP分值明顯高于L組和C組的子代鼠(P0.01,P0.01),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(3)免疫組化結(jié)果示H組子代鼠伏隔核內(nèi)NR2A及NR2B的表達(dá)明顯高于L組和C組(P0.01)。(4)Westernblotting結(jié)果示H組子代鼠伏隔核內(nèi)NR2A及NR2B的表達(dá)明顯高于L組和C組(P0.01)。結(jié)論:(1)孕晚期嗎啡暴露會(huì)導(dǎo)致子代鼠體重在不同年齡段的減輕且會(huì)增加其生長發(fā)育過程中不同時(shí)期的死亡率。(2)孕晚期嗎啡暴露對子代鼠成癮易感性有明顯的增強(qiáng)作用。(3)孕晚期嗎啡暴露致子代鼠成癮易感性增強(qiáng)可能與伏隔核內(nèi)NR2A和NR2B的水平上調(diào)有關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：妊娠 嗎啡 CPP N-甲基-D-天冬氨酸 伏隔核
【學(xué)位授予單位】：皖南醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R614
【目錄】：

• 英文縮略詞5-8
• 摘要8-10
• Abstract10-14
• 前言14-19
• 材料與方法19-29
• 1. 研究材料19-22
• 1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物19-20
• 1.2 主要實(shí)驗(yàn)藥物和試劑20-21
• 1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器21-22
• 2. 實(shí)驗(yàn)方法22-28
• 2.1 孕晚期嗎啡暴露對子代鼠體重及死亡率的影響22
• 2.1.1 建立孕晚期嗎啡暴露模型22
• 2.1.2 檢測子代鼠的體重及其死亡率22
• 2.2 條件位置偏愛實(shí)驗(yàn)22-24
• 2.2.1 主要實(shí)驗(yàn)裝置22-23
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)過程23-24
• 2.3 免疫組化法檢測子代鼠伏隔核內(nèi)NR2A及NR2B的表達(dá)24-25
• 2.3.1 伏隔核標(biāo)本的制作24
• 2.3.2 免疫組化法步驟24-25
• 2.4 Western-blot法檢測子代鼠伏隔核內(nèi)NR2A及NR2B的表達(dá)25-28
• 2.4.1 主要實(shí)驗(yàn)過程25-26
• 2.4.2 提取蛋白26
• 2.4.3Western操作流程26-28
• 3. 統(tǒng)計(jì)方法28-29
• 結(jié)果29-37
• 1. 孕晚期嗎啡暴露對子代鼠體重及其死亡率的影響29-30
• 2. 孕晚期嗎啡暴露對子代鼠嗎啡成癮易感性的影響30-32
• 3. 孕晚期嗎啡暴露對子代鼠伏隔核NR2A和NR2B表達(dá)的影響32-37
• 3.1 免疫組化結(jié)果32-33
• 3.2 Western-blot結(jié)果33-37
• 討論37-45
• 結(jié)論45-46
• 參考文獻(xiàn)46-55
• 綜述 NMDA受體在阿片成癮中的作用55-69
• 參考文獻(xiàn)62-69
• 作者簡介及讀研期間主要科研成果69-70
• 致謝70

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 陳鎮(zhèn)燕;李婧;黃光英;;Effect of Bushen Yiqi Huoxue Recipe on Placental Vasculature in Pregnant Rats with Fetal Growth Restriction Induced by Passive Smoking[J];Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences);2013年02期

2 姚亞麗;曹文宇;徐楊;鐘小林;羅雁威;劉丹;李芳;張建一;李昌琪;;大鼠配對前經(jīng)歷嗎啡成癮及戒斷對子代掠食行為的影響[J];中國藥物依賴性雜志;2011年06期

3 宋月晗;李峰;劉曉蘭;劉洋;焦瑩;趙雪松;劉燕;張蓉;;大鼠嗎啡精神依賴時(shí)伏核和前額葉皮質(zhì)中NR2A、NR2B表達(dá)的變化[J];中國藥物依賴性雜志;2008年06期

4 黃春桃;吳錫南;劉蘋;;N-甲基-D-天冬氨酸受體在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的研究進(jìn)展[J];中國行為醫(yī)學(xué)科學(xué);2006年04期

5 鄭明嵐,朱永平;谷氨酸遞質(zhì)在藥物成癮中的作用[J];國外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生學(xué)分冊);2005年03期

6 張瑞嶺,郝偉,劉克菊,岳偉華,徐錫萍;NMDA受體在慢性嗎啡處理大鼠伏隔核神經(jīng)元突觸可塑性改變中的作用[J];中國臨床康復(fù);2004年13期

，

本文編號：902074