發(fā)布時(shí)間：2017-09-11 12:13

  本文關(guān)鍵詞：SIRT1調(diào)控凋亡對(duì)人退變終板軟骨細(xì)胞的影響

  更多相關(guān)文章： 沉默信息調(diào)節(jié)因子2同源物1 CEP Bcl-2 caspase-3 凋亡

【摘要】：目的探討人退變終板軟骨(cartilage endplate,CEP)中凋亡和沉默信息調(diào)節(jié)因子2同源物1(silent information regulation 2homolog-1,SIRT1)的表達(dá)情況,探討SIRT1是否可以抑制退變CEP細(xì)胞的凋亡。方法CEP取材于重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院腰椎間盤(pán)突出(lumbar disc herniation,LDH)和腰椎骨折(lumbar vertebrae fracture,LVF)的手術(shù)患者(時(shí)間從2014年6月到2015年5月),用Pfirrmann分級(jí)評(píng)價(jià)人椎間盤(pán)退變程度。HE染色觀察正常和退變CEP的細(xì)胞形態(tài)和細(xì)胞數(shù)量,免疫組織化學(xué)觀察正常和退變CEP中SIRT1,caspase3,Ⅱ型膠原的表達(dá)。單層培養(yǎng)CEP細(xì)胞,取p2代CEP細(xì)胞完成實(shí)驗(yàn)。細(xì)胞經(jīng)過(guò)白藜蘆醇和SIRT1干擾RNA或尼克酰胺處理后,westernblot檢測(cè)SIRT1、Bcl-2和caspase3的表達(dá),流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。結(jié)果HE染色結(jié)果表明終板組織細(xì)胞為類(lèi)圓形軟骨細(xì)胞類(lèi)型,退變CEP細(xì)胞數(shù)量減少。免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示,退變CEP中SIRT1和Ⅱ型膠原的表達(dá)下降,凋亡相關(guān)因子caspase-3的表達(dá)上升。白藜蘆醇處理CEP細(xì)胞后SIRT1和Bcl2的表達(dá)上升,凋亡相關(guān)蛋白caspase-3的蛋白表達(dá)下降,細(xì)胞凋亡率下降;經(jīng)SIRT1干擾RNA或尼克酰胺處理后SIRT1和Bcl2的表達(dá)下降,caspase3表達(dá)上升,細(xì)胞凋亡率上升。結(jié)論CEP的退變與細(xì)胞凋亡有關(guān),退變CEP細(xì)胞凋亡增加;SIRT1可以抑制退變CEP細(xì)胞的凋亡。
【關(guān)鍵詞】：沉默信息調(diào)節(jié)因子2同源物1 CEP Bcl-2 caspase-3 凋亡
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R681.5
【目錄】：

• 英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照5-6
• 中文摘要6-8
• 英文摘要8-10
• 前言10-12
• 1 材料與方法12-19
• 1.1 材料12-16
• 1.1.1 實(shí)驗(yàn)標(biāo)本來(lái)源12-13
• 1.1.2 主要試劑13-15
• 1.1.3 主要儀器15-16
• 1.2 方法16-19
• 1.2.1 主要試劑的配制16-17
• 1.2.2 CEP組織的分離和細(xì)胞培養(yǎng)17
• 1.2.3 HE染色17-18
• 1.2.4 免疫組化18
• 1.2.5 si RNA轉(zhuǎn)染18
• 1.2.6 流式細(xì)胞學(xué)18
• 1.2.7 Western blot檢測(cè)18-19
• 1.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析19
• 2 結(jié)果19-26
• 2.1 CEP收取情況19-20
• 2.2 典型的正常和退變CEP組織20
• 2.3 CEP HE染色結(jié)果20-21
• 2.4 免疫組織化學(xué)結(jié)果21-22
• 2.5 正常和退變CEP組織SIRT1和caspase3蛋白表達(dá)結(jié)果22-23
• 2.6 CEP細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察23-24
• 2.7 SIRT1可以促進(jìn)退變CEP細(xì)胞抗凋亡蛋白Bcl-2 的表達(dá)，，抑制凋亡關(guān)鍵蛋白caspase-3 的表達(dá)24
• 2.8 SIRT1可以降低退變CEP細(xì)胞的凋亡率24-26
• 3 討論26-29
• 參考文獻(xiàn)29-32
• 文獻(xiàn)綜述32-37
• 參考文獻(xiàn)35-37
• 致謝37-38
• 攻讀碩士學(xué)位期間參與的科研項(xiàng)目及發(fā)表的學(xué)術(shù)論文38

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