發(fā)布時間：2017-08-27 05:23

  本文關鍵詞：優(yōu)化肝移植供肝灌流液的基礎研究

  更多相關文章： 肝移植 綠茶多酚 溶解氧 低溫機器灌注

【摘要】：背景肝移植對于終末期肝病是一個常規(guī)的有效治療手段,雖然有較好的療效,但是仍然存在很大的挑戰(zhàn)。其中供肝短缺就是一個主要的問題。所以擴大供肝范圍,如何合理利用邊緣供肝,提高供肝質量成為一個緊急迫切的事情。眾多實驗證明供肝通過機器灌注后可以有效改善供肝質量,提高移植術后生存率。所以現(xiàn)在尋找一種可以增加供肝保存時間以及減少供肝氧自由基、炎癥介質的灌流液成為當務之急。本實驗通過對臨床常用灌流液HTK液中增加綠茶多酚以及溶解氧對大鼠的肝臟進行機器灌注,來研究新型灌流液對于供肝的保護作用。方法綠茶多酚+HTK液改良灌流液：將SD大鼠隨機分配成一下兩組：(1)HTK對照試驗組(n=6); (2) HTK+綠茶多酚(GTP) (60μg/ml)(n=6)。 O2+HTK液改良灌流液：將SD大鼠隨機分配成一下兩組：(1)HTK對照試驗組(n=6); (2) HTK灌流液中持續(xù)充氣(95%氧氣和5%二氧化碳混合氣體)(n=6)。對大鼠肝臟進行門靜脈以及膽管插管,之后從大鼠中取下,通過門靜脈導管與機器灌流系統(tǒng)連接,以5rpm的流速進行灌注。在7個時間點進行灌流液的收集(0h,1h,3h,6h,8h,10h,12h)來檢測肝功能(谷丙轉氨酶(ALT),谷草轉氨酶(AST),乳酸脫氫酶(LDH))以及電解質(Na, K, Cl)。同時我們保留肝組織的一部分為了之后的組織學研究(HE染色)。收集新鮮的肝組織樣本保存于-80℃為了之后的研究(丙二醛(MDA),髓過氧化物酶(MPO))。結果通過HTK對照組以及GTP實驗組的比較,ALT(8h,10h:p0.05;12h:p0.01), AST(10h:p0.05;12h:p0.01),LDH (lh,3h,6h,8h,10h,12h:p0.05) MPO(p0.05),MDA(p0.01)在對照組中普遍高于實驗組。病理學方面HTK對照組炎細胞浸潤明顯,肝竇及中央靜脈充血明顯。兩組干濕重比沒有明顯差異。HTK對照組與HTK+O2實驗組比較:ALT(6h,8h,10h:p0.05), AST(8h,10h,12h:p0.05), LDH(6h,8h,10h: p0.05) MPO(p0.05),MDA (p0.05)在對照組中普遍高于實驗組。病理學方面,HTK對照組炎細胞浸潤明顯,肝竇及中央靜脈充血明顯。兩組干濕重比沒有明顯差異。結論在低溫機器灌注下綠茶多酚以及溶解氧對于大鼠肝移植中的供肝有保護作用。
【關鍵詞】：肝移植 綠茶多酚 溶解氧 低溫機器灌注
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R657.3
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 中英文縮略語10-15
• 前言15-17
• 第一章：綠茶多酚+HTK液改良灌流液17-30
• 材料與方法17-21
• 1 材料17-18
• 1.1 實驗動物17
• 1.2 主要試劑17
• 1.3 主要儀器及耗材17-18
• 2 手術方法及取材18
• 3 實驗指標測定18-20
• 3.1 肝功能及電解質檢測19
• 3.2 病理組織學檢查19
• 3.3 丙二醛(MDA)測定19-20
• 3.4 髓過氧化物酶(MPO)測定20
• 3.5 干濕重比測定20
• 4 統(tǒng)計學處理20-21
• 結果21-27
• 1 肝功能及電解質21-23
• 2 組織病理23-25
• 3 MPO25
• 4 MDA25-26
• 5 干濕重比(D/W)26-27
• 討論27-30
• 第二章：O_2+HTK液改良灌流液30-42
• 材料與方法30-34
• 1 材料30-31
• 1.1 實驗動物30
• 1.2 主要試劑30
• 1.3 主要儀器及耗材30-31
• 2 手術方法及取材31-32
• 3 實驗指標測定32-33
• 3.1 肝功能及電解質檢測32
• 3.2 病理組織學檢查32-33
• 3.3 丙二醛(MDA)測定33
• 3.4 髓過氧化物酶(MPO)測定33
• 3.5 干濕重比測定33
• 4 統(tǒng)計學處理33-34
• 結果34-40
• 1 肝功能及電解質34-36
• 2 組織病理36-38
• 3 MPO38
• 4 MDA38-39
• 5 干濕重比(D/W)39-40
• 討論40-42
• 參考文獻42-46
• 綜述46-64
• 參考文獻56-64
• 作者簡歷及在學期間主持課題和發(fā)表論文64-65

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本文編號：744591