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同種異體骨髓間充質(zhì)干細胞在比格犬體內(nèi)異位構(gòu)建組織工程骨

發(fā)布時間:2017-08-22 02:26

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【摘要】:背景:選用同種異體骨髓間充質(zhì)干細胞作為種子細胞成為將來組織工程領(lǐng)域發(fā)展的趨勢。目的:分析同種異體骨髓間充質(zhì)干細胞在比格犬體內(nèi)異位構(gòu)建組織工程骨的能力,并觀察骨髓間充質(zhì)干細胞在體內(nèi)成骨過程中的轉(zhuǎn)歸。方法:應(yīng)用氯甲基苯甲酰氨熒光染料(CM-Dil)標(biāo)記比格犬骨髓間充質(zhì)干細胞,MTT法檢測標(biāo)記細胞的體外增殖能力。將自體或異體骨髓間充質(zhì)干細胞分別接種珊瑚、β磷酸三鈣支架體外成骨誘導(dǎo)7d后,植入比格犬背部皮下,空白支架作為陰性對照。術(shù)后3 d及1,2,4,8,12周取材,蘇木精-伊紅染色觀察成骨情況,應(yīng)用ipp軟件統(tǒng)計分析成骨面積。PT-PCR和ELISA法檢測組織工程骨成骨過程中相關(guān)基因的表達。CM-Dil組冰凍切片熒光顯微鏡下示蹤骨髓間充質(zhì)干細胞在體內(nèi)的轉(zhuǎn)歸。結(jié)果與結(jié)論:(1)4-8周時異體組織工程骨的成骨面積小于自體組織工程骨,但到12周后2組無明顯差異;(2)4周自體組織工程骨表達骨γ羧基谷氨酸蛋白高于異體組織工程骨,提示后者先于前者進入骨礦化期;(3)ELISA檢測發(fā)現(xiàn)自體組織工程骨的堿性磷酸酶和骨鈣素表達量在4周左右高于異體組織工程骨,到12周后趨于一致;(4)通過CM-Dil標(biāo)記骨髓間充質(zhì)干細胞發(fā)現(xiàn)同種異體骨髓間充質(zhì)干細胞的數(shù)量相比自體骨髓間充質(zhì)干細胞有明顯的減少;(5)結(jié)果說明,同種異體組織工程骨在大動物體內(nèi)能夠異位成骨(12周),但早期(8周前)成骨效率低于自體組織工程骨,這種差別可能與骨髓間充質(zhì)干細胞同種異體移植后發(fā)生免疫反應(yīng)導(dǎo)致細胞數(shù)量減少有關(guān)。
【作者單位】: 泰山醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院骨科;泰安市中心醫(yī)院分院;
【關(guān)鍵詞】間質(zhì)干細胞 移植 同種 支架 組織工程 組織構(gòu)建 骨組織工程 骨髓間充質(zhì)干細胞 組織工程骨 異位成骨 CM-Dil 轉(zhuǎn)歸 山東省自然科學(xué)基金
【基金】:山東省自然科學(xué)基金(博士基金)(BS2015SW030) 山東省醫(yī)藥衛(wèi)生科技發(fā)展計劃項目(2016WS0614) 泰安市科技發(fā)展計劃項目(2015NS1136)~~
【分類號】:R318.08;R68
【正文快照】: 文章快速閱讀: 同種異體骨髓間充質(zhì)干細胞是否有能力在比格犬體內(nèi)異位構(gòu)建組織工程骨? 植入自體細胞-支架復(fù)合物移植結(jié)果說明: (1)同種異體組織工程骨在大動物體內(nèi)能夠異位成骨(12周),但早期(8周前)成骨效率低于自體組織工程骨; 植入異體細胞-支架復(fù)合物 (2)這種差別可能

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