溴美噴酯對(duì)瘢痕成纖維細(xì)胞相關(guān)纖維化活動(dòng)的影響
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【摘要】:目的探討溴美噴酯對(duì)瘢痕成纖維細(xì)胞增殖與Ⅰ型膠原、α平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)表達(dá)以及Smad3磷酸化的影響。方法分離提取人原代瘢痕成纖維細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),實(shí)驗(yàn)分為空白對(duì)照組和不同濃度的溴美噴酯(0.5、1.0、2.0 mg/m L)干預(yù)組,應(yīng)用CCK-8方法檢測(cè)溴美噴酯對(duì)細(xì)胞增殖的影響,RT-PCR方法檢測(cè)各組細(xì)胞中Ⅰ型膠原、α-SMA的mRNA表達(dá)變化,Western blot方法檢測(cè)各組細(xì)胞中Ⅰ型膠原、α-SMA、Smad3和磷酸化Smad3(pSmad3)的蛋白表達(dá)變化。結(jié)果細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)顯示不同濃度的溴美噴酯干預(yù)組較對(duì)照組細(xì)胞增殖降低,其中2.0 mg/m L降低最明顯。RT-PCR結(jié)果顯示不同濃度的溴美噴酯干預(yù)組中Ⅰ型膠原、α-SMA的mRNA表達(dá)較對(duì)照組減少(P0.05),在2.0 mg/m L時(shí)效果最顯著。Western blot結(jié)果同樣顯示不同濃度干預(yù)組中Ⅰ型膠原、α-SMA的蛋白合成減少(P0.05),而且干預(yù)組中pSmad3蛋白較對(duì)照組減少,但Smad3蛋白表達(dá)比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論溴美噴酯能夠抑制瘢痕成纖維細(xì)胞的增殖并減少Ⅰ型膠原、α-SMA的表達(dá),而且還能夠減少Smad3的活化,但對(duì)Smad3蛋白表達(dá)無明顯影響,表明溴美噴酯或許能夠通過抑制TGF-β1/Smad3信號(hào)通路中Smad3的磷酸化來降低瘢痕成纖維細(xì)胞的纖維化活動(dòng)。
【作者單位】: 第二軍醫(yī)大學(xué)附屬長(zhǎng)海醫(yī)院燒傷外科;
【關(guān)鍵詞】: 溴美噴酯 瘢痕成纖維細(xì)胞 增殖 膠原 pSmad
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81120108015,81571897) 國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展規(guī)劃項(xiàng)目(2012CB518100) “十二五”國(guó)家科技項(xiàng)目(AWS11J008)
【分類號(hào)】:R622
【正文快照】: 增生性瘢痕(hypertrophic scar,HPS)是一種皮膚小約為3 cm×3 cm×1 cm,本實(shí)驗(yàn)所取瘢痕組織應(yīng)纖維增生紊亂性疾病,任何影響到深層皮膚組織的損用已告知患者并簽訂知情同意書,并且經(jīng)第二軍醫(yī)傷均可能導(dǎo)致其發(fā)生,特別是深度燒傷、創(chuàng)傷等。HPS大學(xué)附屬長(zhǎng)海醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)
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本文編號(hào):689063
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