本文關(guān)鍵詞：分化抑制因子1基因?qū)MP-2促進(jìn)兔椎間盤軟骨終板細(xì)胞軟骨特性基因表達(dá)的影響

  更多相關(guān)文章： BMP- 分化抑制因子 椎間盤軟骨終板細(xì)胞 基因轉(zhuǎn)染 兔

【摘要】：目的探討通過(guò)慢病毒干擾細(xì)胞分化抑制因子1(inhibitor of differentiation 1,Id1)基因表達(dá),對(duì)BMP-2促進(jìn)兔椎間盤軟骨終板細(xì)胞軟骨特異性基因Ⅱ型膠原、蛋白多糖表達(dá)的影響。方法取新西蘭大白兔椎間盤軟骨終板組織分離培養(yǎng)軟骨終板細(xì)胞,取第2代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。使用綠色熒光蛋白慢病毒、高表達(dá)Id1基因慢病毒及RNA干擾(RNA interference,RNAi)Id1基因慢病毒轉(zhuǎn)染椎間盤軟骨終板細(xì)胞,采用熒光顯微鏡、實(shí)時(shí)熒光定量PCR及Western blot法觀察慢病毒轉(zhuǎn)染情況以及對(duì)細(xì)胞Id1基因和蛋白表達(dá)的影響。使用上述慢病毒與BMP-2慢病毒共同轉(zhuǎn)染軟骨終板細(xì)胞,并設(shè)置BMP-2慢病毒轉(zhuǎn)染對(duì)照,通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR、ELISA法觀察Id1基因表達(dá)差異對(duì)BMP-2促進(jìn)椎間盤終板軟骨細(xì)胞合成Ⅱ型膠原和蛋白多糖的影響。結(jié)果慢病毒轉(zhuǎn)染對(duì)細(xì)胞形態(tài)無(wú)明顯影響,高表達(dá)Id1基因和RNAi Id1基因慢病毒能有效轉(zhuǎn)染軟骨終板細(xì)胞,并干擾內(nèi)源性Id1基因的表達(dá)。BMP-2慢病毒和高表達(dá)Id1基因慢病毒共同轉(zhuǎn)染軟骨終板細(xì)胞后,Ⅱ型膠原、蛋白多糖基因表達(dá)和蛋白合成均顯著高于BMP-2慢病毒、高表達(dá)Id1基因慢病毒單獨(dú)轉(zhuǎn)染,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。Id1基因表達(dá)下降后,軟骨終板細(xì)胞Ⅱ型膠原、蛋白多糖合成明顯下調(diào)(P0.05)。結(jié)論 Id1基因表達(dá)上調(diào)能協(xié)同BMP-2促進(jìn)軟骨終板細(xì)胞Ⅱ型膠原、蛋白多糖表達(dá)。
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】： BMP- 分化抑制因子 椎間盤軟骨終板細(xì)胞 基因轉(zhuǎn)染 兔
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81272039)~~
【分類號(hào)】：R681.5
【正文快照】： 椎間盤是人體最大的無(wú)血管組織,其營(yíng)養(yǎng)主要經(jīng)過(guò)終板滲透獲得[1]。軟骨終板對(duì)椎間盤營(yíng)養(yǎng)供給、維持椎間盤形態(tài)以及椎間盤內(nèi)細(xì)胞正常生理功能均有重要作用,Gu等[2]研究發(fā)現(xiàn)椎間盤營(yíng)養(yǎng)供給減少可誘發(fā)椎間盤退變。再生治療即通過(guò)轉(zhuǎn)入基因或細(xì)胞,增加細(xì)胞外基質(zhì)合成,延緩或逆轉(zhuǎn)椎間

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本文編號(hào)：676351