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MiR-181a靶向RASSF1A促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移

發(fā)布時(shí)間:2017-08-09 06:22

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【摘要】:目的:探討miR-181a是否靶向調(diào)控抑癌基因RAS相關(guān)區(qū)域家族1A(Ras-association domain family 1,isoform A,RASSF1A),從而促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移。方法:采用real-time PCR檢測30例人骨肉瘤組織及其癌旁正常骨組織中miR-181a的表達(dá),并分析miR-181a表達(dá)水平與骨肉瘤患者臨床病理特征的相關(guān)性。在骨肉瘤細(xì)胞MG-63中瞬時(shí)轉(zhuǎn)染miR-181a模擬物和miR-181a抑制劑,分別采用MTT和transwell檢測miR-181a對(duì)骨肉瘤細(xì)胞生長和轉(zhuǎn)移的作用。隨后,預(yù)測并通過雙熒光素酶報(bào)告基因驗(yàn)證miR-181a與RASSF1A基因3'-非編碼區(qū)(3'-untranslated region,3'-UTR)的特異性結(jié)合作用。結(jié)果:與癌旁正常骨組織比較,miR-181a在骨肉瘤組織中高表達(dá)(P0.001),但其表達(dá)水平與骨肉瘤患者的性別、年齡、腫瘤大小及腫瘤病理分期等無明顯相關(guān)性(P0.05)。MTT及transwell結(jié)果顯示過表達(dá)miR-181a促進(jìn)了MG-63細(xì)胞生長、遷移和侵襲,顯著高于陰性對(duì)照組(P0.05);而抑制miR-181a的表達(dá)降低了MG-63細(xì)胞生長、遷移和侵襲,顯著低于陰性對(duì)照組(P0.05)。雙熒光素酶報(bào)告基因檢測結(jié)果顯示miR-181a可靶向結(jié)合RASSF1A基因3'-UTR,從而調(diào)控RASSF1A的表達(dá)。結(jié)論:miR-181a可特異性結(jié)合RASSF1A基因3'-UTR,下調(diào)RASSF1A基因的表達(dá),從而促進(jìn)人骨肉瘤細(xì)胞MG-63的生長和轉(zhuǎn)移。
【作者單位】: 中南大學(xué)湘雅三醫(yī)院骨科;中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】miR-a RASSFA 骨肉瘤細(xì)胞 生長和轉(zhuǎn)移
【基金】:湖南省自然科學(xué)基金(14JJ7019)~~
【分類號(hào)】:R738.1
【正文快照】: Methods:The level of mi R-181a in 30 human osteosarcoma tissues and corresponding bonetissues was detected by real-time PCR,and the correlation between the level of mi R-181a andclinicopathological characteristics of osteosarcoma was analyzed.Osteosarcom

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本文編號(hào):643871

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