本文關(guān)鍵詞：FN對(duì)酒精性大鼠成骨細(xì)胞凋亡的影響及其機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 探討纖維黏連蛋白(fibronectin,FN)對(duì)酒精引起的成骨細(xì)胞凋亡的影響,并探討其相關(guān)機(jī)制。方法 分離并培養(yǎng)SD大鼠乳鼠顱骨的成骨細(xì)胞,細(xì)胞純化后,堿性磷酸酶染色法對(duì)成骨細(xì)胞進(jìn)行鑒定,取生長(zhǎng)旺盛的第3代成骨細(xì)胞隨機(jī)分為正常組,酒精組和FN組:正常組不進(jìn)行任何干預(yù),酒精組加入100mmol/L酒精,FN組分別加100mmol/L酒精和不同濃度的纖維黏連蛋白(20μg/ml,40μg/ml,60μg/ml,80μg/ml)。分別于24h、48h通過(guò)MTT比色法檢測(cè)各組間成骨細(xì)胞的增殖情況。細(xì)胞培養(yǎng)48h行流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡率。同法再次分離并培養(yǎng)成骨細(xì)胞,以上方法分組后24h行RT-PCR檢測(cè)各組凋亡相關(guān)基因Bcl-2和Bax mRNA的表達(dá)變化。結(jié)果 使用酶消化成功分離出細(xì)胞,差速粘附法純化后,堿性磷酸酶染色可見陽(yáng)性細(xì)胞胞漿被染成棕褐色,若干核仁不等,證實(shí)具有成骨細(xì)胞表型,成功分離培養(yǎng)出成骨細(xì)胞。流式細(xì)胞儀分析顯示,與正常組(3.86±0.98%)相比,酒精組干預(yù)48h后細(xì)胞凋亡率增加(14.42±1.26%),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。FN組隨著纖維黏連蛋白濃度增加,凋亡率逐漸減少,分別為12.80±1.08%,8.51±1.02%,5.75±0.86%,5.52±0.82%。與酒精組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),RT-PCR結(jié)果示成骨細(xì)胞經(jīng)100mmol酒精干預(yù)后,與正常組比較,Bcl-2 mRNA表達(dá)強(qiáng)度降低,Bax mRNA表達(dá)強(qiáng)度增高,Bcl-2/Bax比值下降,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。FN組與酒精組比較,隨著纖維黏連蛋白濃度的增高,Bcl-2 mRNA表達(dá)強(qiáng)度增高,Bax mRNA表達(dá)強(qiáng)度降低,Bcl-2/Bax比值增大,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論(1)一定濃度的(100mmol/L)酒精可以明顯的促進(jìn)大鼠成骨細(xì)胞的凋亡。(2)隨著纖維黏連蛋白(FN)濃度的增加,經(jīng)酒精處理的大鼠成骨細(xì)胞凋亡逐漸減少,纖維黏連蛋白(FN)能干預(yù)影響酒精促進(jìn)成骨細(xì)胞凋亡的作用。(3)酒精引起成骨細(xì)胞凋亡及纖維黏連蛋白(FN)保護(hù)作用,與調(diào)節(jié)Bcl-2和Bax mRNA表達(dá)有關(guān),纖維黏連蛋白(FN)對(duì)酒精性成骨細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用,是通過(guò)調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)基因Bcl-2和Bax的蛋白表達(dá)實(shí)現(xiàn)的,有可能成為探索治療酒精性骨性損害疾病的途徑之一。
【關(guān)鍵詞】：成骨細(xì)胞 酒精 凋亡 FN
【學(xué)位授予單位】：新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R681
【目錄】：

• 摘要5-7
• Abstract7-9
• 前言9-13
• 1 材料與方法13-28
• 2 結(jié)果28-34
• 3 結(jié)論34-35
• 4 討論35-41
• 參考文獻(xiàn)41-45
• 綜述 酒精性骨質(zhì)疏松癥研究進(jìn)展45-62
• 參考文獻(xiàn)57-62
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況62-63
• 致謝63-64
• 個(gè)人簡(jiǎn)歷64

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本文編號(hào)：482273