本文關(guān)鍵詞：硫酸軟骨素酶ABC及Nogo-66受體拮抗劑聯(lián)合鼠胚神經(jīng)干細(xì)胞移植對(duì)大鼠脊髓損傷的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:研究硫酸軟骨素酶ABC(chondroitinase ABC,Ch ABC)、Nogo-66受體拮抗劑[Nogo-66(1-40)antagonist peptide,NEP1-40]及鼠胚神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cells,NSCs)聯(lián)合移植對(duì)大鼠損傷脊髓功能恢復(fù)的影響。方法:體外應(yīng)用全反式維甲酸(all-trans-retinoic acid,ATRA)(濃度1.0μmol/L)誘導(dǎo)NSCs(前期實(shí)驗(yàn)分離、培養(yǎng)并凍存的鼠胚NSCs),誘導(dǎo)后鑒定NSCs特異性標(biāo)志物,移植前通過(guò)5-溴脫氧尿嘧啶核苷(5-Bromo-2-deoxy Uridine,Brdu)標(biāo)記NSCs。將60只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組(A組,n=10)、損傷對(duì)照組(B組,n=10)、NSCs治療組(C組,n=10)、NSCs聯(lián)合Ch ABC治療組(D組,n=10)、NSCs聯(lián)合NEP1-40治療組(E組,n=10)、NSCs聯(lián)合Ch ABC和NEP1-40治療組(F組,n=10)。移植前分別對(duì)B、C、D、E及F組的大鼠制作胸段脊髓全橫斷損傷模型。術(shù)后3d,E和F組經(jīng)留置的導(dǎo)管注入NEP1-40 20μl/d,連續(xù)28d;術(shù)后8d,C、D、E及F組經(jīng)留置導(dǎo)管注入經(jīng)ATRA干預(yù)和Brd U標(biāo)記的NSCs 10μl;術(shù)后8d,D組和F組經(jīng)留置導(dǎo)管注入Ch ABC 10μl/d,連續(xù)7d;各時(shí)間點(diǎn)通過(guò)留置導(dǎo)管注入生理鹽水保持各組移植液等量。術(shù)前及術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn),用BBB評(píng)分和體感誘發(fā)電位(somatosensory evoked potentials,SEP)潛伏期對(duì)大鼠后肢神經(jīng)功能進(jìn)行評(píng)價(jià)。移植后8周通過(guò)HE染色觀(guān)察損傷脊髓組織情況,免疫熒光染色觀(guān)察移植NSCs存活、神經(jīng)元分化及軸突生長(zhǎng)情況。結(jié)果:體外應(yīng)用1.0μmol/L的ATRA誘導(dǎo)NSCs培養(yǎng),可提高NSCs向神經(jīng)元分化的比例。移植后2周開(kāi)始各組大鼠BBB評(píng)分、SEP潛伏期開(kāi)始觀(guān)察到改善,移植治療各組均優(yōu)于損傷對(duì)照組,組間BBB評(píng)分和SEP潛伏期有差異(P0.05);移植后2周、5周、8周各時(shí)間點(diǎn),B組與C、D、E及F組比較,BBB評(píng)分和SEP潛伏期較差(P0.05);在移植治療各組中,F組神經(jīng)功能的恢復(fù)最明顯,F組與C、D及E組比較具有較高的BBB評(píng)分和較短SEP潛伏期(P0.05)。移植后8周,HE染色顯示:A組細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整、排列規(guī)則;B組組織結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞,細(xì)胞排列紊亂,見(jiàn)大量較大的囊腔及膠質(zhì)瘢痕形成;C、D、E及F組細(xì)胞增生明顯,囊腔較少。免疫熒光染色顯示:C、D、E及F組內(nèi)可見(jiàn)橘紅色Brdu標(biāo)記陽(yáng)性細(xì)胞,F組陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)多于C、D和E組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。C、D、E、F組微管相關(guān)蛋白-2(microtubule-associated protein 2,MAP-2)標(biāo)記陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)多于B組,F組多于C、D、E組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);C、D、E、F組MAP-2標(biāo)記陽(yáng)性細(xì)胞面積大于B組,F組大于C、D、E組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:ATRA誘導(dǎo)后NSCs移植可促進(jìn)大鼠脊髓損傷功能的恢復(fù),且聯(lián)合Ch ABC和NEP1-40移植對(duì)損傷脊髓功能的恢復(fù)具有協(xié)同促進(jìn)作用。
【作者單位】： 四川醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院脊柱外科;
【關(guān)鍵詞】： 脊髓損傷 細(xì)胞移植 全反式維甲酸 神經(jīng)干細(xì)胞 硫酸軟骨素酶ABC Nogo-受體拮抗劑 大鼠
【分類(lèi)號(hào)】：R651.2
【正文快照】： 脊髓損傷(spinal cord injury,SCI)后,受損脊髓組織神經(jīng)細(xì)胞大量丟失,周?chē)h(huán)境發(fā)生不利改變,主要包括:內(nèi)源性生長(zhǎng)因子缺乏、損傷脊髓周?chē)蛩彳浌撬氐鞍锥嗵?chondroitin sulphate proteoglycans,CSPGs)及鞘磷脂相關(guān)抑制因子表達(dá)上調(diào),致使軸突的再生和生長(zhǎng)受到限制,脊髓功能

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 陳金榮;石增立;楊成;劉鳳;石磊;劉巍;袁文丹;;Nogo-66拮抗性多肽的篩選及其對(duì)脊髓損傷大鼠軸突再生的影響[J];神經(jīng)解剖學(xué)雜志;2010年01期

2 ;[J];;年期

  本文關(guān)鍵詞：硫酸軟骨素酶ABC及Nogo-66受體拮抗劑聯(lián)合鼠胚神經(jīng)干細(xì)胞移植對(duì)大鼠脊髓損傷的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：479789