本文關(guān)鍵詞：miRNA-137在骨肉瘤中的作用及機(jī)制研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：[目的]通過轉(zhuǎn)染miRNA-137至人骨肉瘤細(xì)胞MG-63,觀察細(xì)胞內(nèi)TWIST蛋白含量變化及其對細(xì)胞增殖活性的影響以探討miRNA-137在骨肉瘤中的作用及機(jī)制。[方法]Target Scan預(yù)測miRNA-137與TWIST結(jié)合靶位;PCR擴(kuò)增TWIST基因3’UTR區(qū)并克隆至熒光素酶報告基因表達(dá)載體;化學(xué)法合成miRNA-137 mimics,miRNA-137 inhibitor及NC序列,與熒光素酶報告基因表達(dá)載體共轉(zhuǎn)染293細(xì)胞,48 h后檢測熒光素酶活性;轉(zhuǎn)染miRNA-137至MG-63細(xì)胞,轉(zhuǎn)染后48 h,Real Time-PCR檢測轉(zhuǎn)染后細(xì)胞內(nèi)miRNA-137含量,Western-blot檢測細(xì)胞中TWIST蛋白含量變化;轉(zhuǎn)染后0~72 h,CCK-8檢測腫瘤細(xì)胞增殖活性。[結(jié)果]證實了miRNA-137與其靶基因TWIST的結(jié)合位點;miRNA-137 mimics轉(zhuǎn)染MG-63細(xì)胞,可明顯抑制細(xì)胞內(nèi)TWIST蛋白表達(dá),與對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),而miRNA-137 inhibitor轉(zhuǎn)染細(xì)胞后可明顯增強(qiáng)胞內(nèi)TWIST蛋白的表達(dá),與對照組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05));miRNA-137 mimics可明顯抑制MG-63細(xì)胞對數(shù)期增殖活性,而miRNA-137 inhibitor則使細(xì)胞增殖活性進(jìn)一步增強(qiáng),相同時間點與對照相比較,均有差異(P0.05)。[結(jié)論]miRNA-137可以通過抑制其靶基因TWIST表達(dá)來抑制MG-63細(xì)胞增殖活性。
【作者單位】： 解放軍第454醫(yī)院骨科;
【關(guān)鍵詞】： miRNA- MG- 熒光素酶 TWIST 細(xì)胞活性
【分類號】：R738
【正文快照】： 骨肉瘤是骨腫瘤的一種,臨床以惡性較為常見。骨肉瘤患者中有近80%能保留病肢,5年生存率大約為80%,但仍有至少半數(shù)的骨肉瘤患者死于腫瘤的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展,腫瘤靶向基因治療顯示出其良好的臨床應(yīng)用潛力,而且治療手段不斷改進(jìn)和提高。盡管骨肉瘤的基因研究

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9 朱U

本文編號：451104