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玻璃化凍存方案對(duì)同種異體瓣膜免疫原性的影響及MitoQ對(duì)VS83方案組織活性提升作用研究

發(fā)布時(shí)間:2024-05-19 09:33
  研究背景:同種瓣具有良好的血流動(dòng)力學(xué)和較高的抗感染特性,但在部分接受同種瓣移植的患者中出現(xiàn)衰敗加速的問(wèn)題,其原因主要與瓣膜本身的免疫原性和凍存過(guò)程中造成的組織損傷有關(guān)。近年來(lái),幾種組織玻璃化保存方法被提出,研究顯示玻璃化方案具有降低組織免疫原性的作用。但一方面,其免疫調(diào)節(jié)機(jī)制不明確,且玻璃化組織活性與免疫原性間的關(guān)系存在爭(zhēng)議,另一方面VS83方案中存在嚴(yán)重組織活性損害,需要進(jìn)一步改進(jìn)。目的:(1)探究VS55方案對(duì)帶瓣主動(dòng)脈組織免疫原性的影響及其與NLRP3炎性小體激活的聯(lián)系,闡明玻璃化組織活性與其免疫原性間的聯(lián)系。(2)在VS83方案中加入抗氧化劑Mito Q,探索該方案對(duì)組織活性的提升作用及其對(duì)組織細(xì)胞線粒體動(dòng)力學(xué)的影響。方法和結(jié)果:第一部分研究使用新西蘭兔帶瓣主動(dòng)脈作為實(shí)驗(yàn)材料,為消除不同保存方法內(nèi)皮殘留不同對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成的影響,我們首先對(duì)組織進(jìn)行了脫內(nèi)皮處理。將脫內(nèi)皮后的組織,隨機(jī)分為新鮮對(duì)照組、梯度降溫組(CFC組)和VS55方案組(IFC組),并使用不同方案保存。8周后取出保存的組織,進(jìn)行組織復(fù)溫,對(duì)復(fù)溫后組織的活性和組織內(nèi)ATP水平以及NLRP3炎性小體激活情況進(jìn)行檢測(cè),...

【文章頁(yè)數(shù)】:56 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.1組織去內(nèi)皮效果A:HE染色(100)B:掃描電鏡

圖1.1組織去內(nèi)皮效果A:HE染色(100)B:掃描電鏡

學(xué)分析使用GraphPadPrism6.0軟件進(jìn)行分析,所得結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差形較采用t-檢驗(yàn),P<0.05時(shí)認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果培養(yǎng)結(jié)果細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果均為陰性,提示組織處理過(guò)程中不存在微生物污染的皮效果(圖1.1)染色顯示,主動(dòng)脈組織內(nèi)皮細(xì)胞去除完全,除內(nèi)....


圖1.2帶瓣主動(dòng)脈組織VG染色結(jié)果(40):新鮮組(A),CFC組(B),IFC組(C)

圖1.2帶瓣主動(dòng)脈組織VG染色結(jié)果(40):新鮮組(A),CFC組(B),IFC組(C)

圖1.2帶瓣主動(dòng)脈組織VG染色結(jié)果(40):新鮮組(A),CFC組(B),IFC組(C)4組織活性和ATP含量(圖1.3)如圖所示,在組織活性方面,與對(duì)照組相比,CFC組(80.2±1.61%)與IFC組(72%)內(nèi)活性均有較高程度的保留;CFC....


圖1.3不同組內(nèi)組織活性(A)和ATP含量(B)檢測(cè)結(jié)果

圖1.3不同組內(nèi)組織活性(A)和ATP含量(B)檢測(cè)結(jié)果

性纖維斷裂的表現(xiàn)。圖1.2帶瓣主動(dòng)脈組織VG染色結(jié)果(40):新鮮組(A),CFC組(B),IFC組(C)2.4組織活性和ATP含量(圖1.3)如圖所示,在組織活性方面,與對(duì)照組相比,CFC組(80.2±1.61%)與IFC組(77.91±2%)內(nèi)....


圖1.4Westernblot法和real-timePCR法測(cè)定NLRP3炎性小體的激活情況

圖1.4Westernblot法和real-timePCR法測(cè)定NLRP3炎性小體的激活情況

圖1.4Westernblot法和real-timePCR法測(cè)定NLRP3炎性小體的激活情況養(yǎng)6h后由real-timePCR法測(cè)得NLRP3(A)、IL-1β(B)、caspase-1(C)在轉(zhuǎn)錄水<0.01與新鮮組比較;*P<0.....



本文編號(hào):3977925

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