纖維肉瘤是一種起源于間充質(zhì)的罕見的惡性腫瘤。它具有高侵襲性,可以通過血液循環(huán)或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到肺、骨骼系統(tǒng)、肝臟等身體其它部位。相比于其他的軟組織肉瘤,纖維肉瘤具有更高的復發(fā)率,預后較差。目前纖維肉瘤主要是通過手術(shù)切除進行治療,但這種方法不適用于位于深部組織的腫瘤。此外,特異性生物標志物的缺乏使得難以準確診斷纖維肉瘤。因此,尋找能特異性識別纖維肉瘤的分子探針對疾病的早期診斷、靶向治療和精準預后都有著重大意義。核酸適體作為一種探針分子,由于其具有高親和力、高特異性、低免疫原性等特性而被廣泛用于生物醫(yī)學、生物化學等領(lǐng)域。在本工作中,我們用非SELEX方法發(fā)現(xiàn)DNA核酸適體S11e可以識別纖維肉瘤HT1080細胞,但對人胚肺成纖維細胞MRC-5無識別能力。S11e對HT1080細胞具有良好的結(jié)合親和力,結(jié)合的平衡解離常數(shù)值在納摩爾的范圍內(nèi)。體內(nèi)和體外熒光成像進一步證實S11e可以識別HT1080異種移植裸鼠模型和纖維肉瘤病人臨床組織中的腫瘤樣本。在激光共聚焦下,我們發(fā)現(xiàn)核酸適體S11e在生理條件下可以內(nèi)化到HT1080細胞中,并結(jié)合到線粒體上。CCK-8毒性試驗和膜聯(lián)蛋白Annexin V-F...

【文章頁數(shù)】：64 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 緒論
    1.1 纖維肉瘤
        1.1.1 纖維肉瘤的定義及分類
        1.1.2 纖維肉瘤的病因
        1.1.3 纖維肉瘤的臨床及病理表現(xiàn)
        1.1.4 纖維肉瘤的分級及預后
        1.1.5 纖維肉瘤的診斷及治療
    1.2 核酸適體
        1.2.1 核酸適體的定義及特點
        1.2.2 核酸適體的應用
    1.3 線粒體
        1.3.1 線粒體與細胞死亡
        1.3.2 線粒體與腫瘤
        1.3.3 線粒體與腫瘤能量代謝
    1.4 本論文開展的工作
第2章 纖維肉瘤核酸適體的檢測及性質(zhì)考察
    2.1 前言
    2.2 實驗部分
        2.2.1 實驗中用到的試劑、核酸序列、細胞系及儀器
        2.2.2 實驗方法
    2.3 結(jié)果與討論
        2.3.1 鑒定與HT1080 細胞結(jié)合的核酸適體
        2.3.2 核酸適體二級結(jié)構(gòu)預測
        2.3.3 核酸適體的截短優(yōu)化
        2.3.4 核酸適體的親和性
        2.3.5 核酸適體的穩(wěn)定性
        2.3.6 核酸適體靶標類型檢測
        2.3.7 核酸適體內(nèi)化分析
        2.3.8 組織芯片結(jié)果分析
        2.3.9 活體成像結(jié)果分析
    2.4 小結(jié)
第3章 S11e對HT1080細胞的促凋亡及抑制遷移能力的檢測
    3.1 前言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 實驗中用到的試劑、及儀器
        3.2.2 實驗方法
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 共定位實驗結(jié)果
        3.3.2 毒性實驗結(jié)果
        3.3.3 流式凋亡實驗結(jié)果
        3.3.4 劃痕實驗結(jié)果
    3.4 小結(jié)
結(jié)論與展望
參考文獻
附錄 A 攻讀學位期間所發(fā)表的學術(shù)論文目錄
致謝



本文編號：3965346