目的:基于全轉錄測序技術,研究在PMMA骨水泥材料誘導下產(chǎn)生的誘導膜的成骨機與低氧誘導因子-α信號通路(HIF-α信號通路)之間的關系。方法:采用隨機分組方式將18只雄性SD大鼠分為誘導膜組和對照組,每組各9只,兩組均在大鼠的左側股骨中段截取出長度為0.5cm的骨塊,并以鋼板固定。誘導膜組于大鼠股骨缺損處植入PMMA骨水泥塊,對照組不植入骨水泥。造模后所有大鼠均單籠飼養(yǎng),并于術后5天連續(xù)給與青霉素預防感染,觀察并統(tǒng)計兩組大鼠術后進食、行走、傷口愈合情況。造模6周后分別采集誘導膜組骨水泥表面附著生長的誘導膜組織和觀察組骨缺損周圍的骨膜組織,然后對兩組標本進行HE染色觀察組織病理學變化,行全轉錄組測序對比兩組的差異基因表達,對兩組樣本差異表達的m RNA所在基因進行篩選,排查HIF-α信號通路的差異基因的富集程度,篩選出可能與誘導膜成骨效應相關的細胞通路,最后行免疫熒光檢測驗證HIF-α信號通路相關的細胞因子。結果:兩組大鼠術后均正常進食、排便,傷口愈合良好,無明顯感染跡象。HE染色下誘導膜組織中含大量細胞,并且形成了豐富的與骨水泥方向平行的纖維組織,微血管網(wǎng)豐富。對照組細胞數(shù)及微血管數(shù)量...

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.已安置6周的PMMA骨水泥

中烘烤120分鐘，隨后取出切片，以二甲苯及乙化，以3%H2O2封閉5分鐘以消除內源性過氧化物各2分鐘，將切片放入檸檬酸鈉緩沖液中10分鐘2次各2分鐘，5%BSA封閉液孵育10分鐘，甩去抗小鼠HIF-1α抗體和大鼠抗小鼠VEGF抗體，濕片3....

圖2.對照組與誘導膜組的HE染色對比，可見誘導膜組細胞數(shù)及微血管數(shù)量均高于對照組

況及標本外觀情況18只大鼠均可正常進食及排便，術后3天內均所有大鼠傷口均愈合良好，傷口周圍無紅腫、誘導膜組織樣本和骨膜組織樣本外觀均呈灰白透明薄模樣組織，樣本表面均無膿性分泌物。觀察結果顯示，誘導膜組織中含大量細胞，并且形成了豐的纖維組織，微血管網(wǎng)豐富。對照組細胞數(shù)及膜組....

圖3.差異表達mRNA火山圖，有顯著性差異表達的mRNA用紅色點（上調）和綠色點（下調）表示，無顯著性差異表達的mRNA用藍色點表示

圖5.圖a：對照組HIF-1α染色；圖b：誘導膜組HIF-1α染色；圖c：對照組VEGF染色；圖d：誘導膜組VEGF染色

本文編號：3964135