目的:基于全轉(zhuǎn)錄測(cè)序技術(shù),研究在PMMA骨水泥材料誘導(dǎo)下產(chǎn)生的誘導(dǎo)膜的成骨機(jī)與低氧誘導(dǎo)因子-α信號(hào)通路(HIF-α信號(hào)通路)之間的關(guān)系。方法:采用隨機(jī)分組方式將18只雄性SD大鼠分為誘導(dǎo)膜組和對(duì)照組,每組各9只,兩組均在大鼠的左側(cè)股骨中段截取出長(zhǎng)度為0.5cm的骨塊,并以鋼板固定。誘導(dǎo)膜組于大鼠股骨缺損處植入PMMA骨水泥塊,對(duì)照組不植入骨水泥。造模后所有大鼠均單籠飼養(yǎng),并于術(shù)后5天連續(xù)給與青霉素預(yù)防感染,觀察并統(tǒng)計(jì)兩組大鼠術(shù)后進(jìn)食、行走、傷口愈合情況。造模6周后分別采集誘導(dǎo)膜組骨水泥表面附著生長(zhǎng)的誘導(dǎo)膜組織和觀察組骨缺損周圍的骨膜組織,然后對(duì)兩組標(biāo)本進(jìn)行HE染色觀察組織病理學(xué)變化,行全轉(zhuǎn)錄組測(cè)序?qū)Ρ葍山M的差異基因表達(dá),對(duì)兩組樣本差異表達(dá)的m RNA所在基因進(jìn)行篩選,排查HIF-α信號(hào)通路的差異基因的富集程度,篩選出可能與誘導(dǎo)膜成骨效應(yīng)相關(guān)的細(xì)胞通路,最后行免疫熒光檢測(cè)驗(yàn)證HIF-α信號(hào)通路相關(guān)的細(xì)胞因子。結(jié)果:兩組大鼠術(shù)后均正常進(jìn)食、排便,傷口愈合良好,無(wú)明顯感染跡象。HE染色下誘導(dǎo)膜組織中含大量細(xì)胞,并且形成了豐富的與骨水泥方向平行的纖維組織,微血管網(wǎng)豐富。對(duì)照組細(xì)胞數(shù)及微血管數(shù)量...

【文章頁(yè)數(shù)】：43 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.已安置6周的PMMA骨水泥

中烘烤120分鐘，隨后取出切片，以二甲苯及乙化，以3%H2O2封閉5分鐘以消除內(nèi)源性過(guò)氧化物各2分鐘，將切片放入檸檬酸鈉緩沖液中10分鐘2次各2分鐘，5%BSA封閉液孵育10分鐘，甩去抗小鼠HIF-1α抗體和大鼠抗小鼠VEGF抗體，濕片3....

圖2.對(duì)照組與誘導(dǎo)膜組的HE染色對(duì)比，可見(jiàn)誘導(dǎo)膜組細(xì)胞數(shù)及微血管數(shù)量均高于對(duì)照組

況及標(biāo)本外觀情況18只大鼠均可正常進(jìn)食及排便，術(shù)后3天內(nèi)均所有大鼠傷口均愈合良好，傷口周圍無(wú)紅腫、誘導(dǎo)膜組織樣本和骨膜組織樣本外觀均呈灰白透明薄模樣組織，樣本表面均無(wú)膿性分泌物。觀察結(jié)果顯示，誘導(dǎo)膜組織中含大量細(xì)胞，并且形成了豐的纖維組織，微血管網(wǎng)豐富。對(duì)照組細(xì)胞數(shù)及膜組....

圖3.差異表達(dá)mRNA火山圖，有顯著性差異表達(dá)的mRNA用紅色點(diǎn)（上調(diào)）和綠色點(diǎn)（下調(diào)）表示，無(wú)顯著性差異表達(dá)的mRNA用藍(lán)色點(diǎn)表示

圖5.圖a：對(duì)照組HIF-1α染色；圖b：誘導(dǎo)膜組HIF-1α染色；圖c：對(duì)照組VEGF染色；圖d：誘導(dǎo)膜組VEGF染色

本文編號(hào)：3964135