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PDGF-bb聯(lián)合BMP-2生長(zhǎng)因子對(duì)骨膜來(lái)源干細(xì)胞在二維培養(yǎng)和可注射水凝膠Gelatin-Hpa中增殖及成骨分化能力的

發(fā)布時(shí)間:2024-04-21 18:40
  前言: 前交叉韌帶(ACL)損傷后往往出現(xiàn)關(guān)節(jié)穩(wěn)定性差,引起膝關(guān)節(jié)反復(fù)損傷,這樣會(huì)加快關(guān)節(jié)軟骨逐步退化。膝關(guān)節(jié)交叉韌帶重建術(shù)后的腱骨愈合是一個(gè)非常復(fù)雜和漫長(zhǎng)的過(guò)程,長(zhǎng)期以來(lái)一直是運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域治療的熱點(diǎn)、難點(diǎn)問(wèn)題。目前所有針對(duì)交叉韌帶重建術(shù)后促進(jìn)腱骨愈合的方法很多,但遠(yuǎn)期療效均不是十分理想,在這種情況下,作為一種可選擇性的替代療法,以干細(xì)胞為核心的組織工程方法為促進(jìn)腱骨愈合提供了新的方法。通常組織工程方法促進(jìn)隧道內(nèi)的腱骨愈合需要具備以下三個(gè)條件:首先組織來(lái)源的干細(xì)胞數(shù)量必須充足,生物功能正常,具有向成骨分化能力的種子干細(xì)胞;其次需要具備良好生物相容性,可以細(xì)胞無(wú)毒性降解、孔隙直徑和孔隙率適合的三維生物支架;最后需要包含有調(diào)節(jié)種子干細(xì)胞增殖、分化并能維持干細(xì)胞表型特征的細(xì)胞生長(zhǎng)因子。 骨膜來(lái)源干細(xì)胞(Periosteum-Dirved Stem Cells, PDSCs)是來(lái)自骨膜內(nèi)層的成體干細(xì)胞,由于其比其他成體干細(xì)胞來(lái)源充足,取材方便,而且在體外培養(yǎng)的條件下骨膜來(lái)源干細(xì)胞具有很強(qiáng)的傳代增殖和穩(wěn)定的定向分化能力。PDSCs與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone-marrow mesenchymal...

【文章頁(yè)數(shù)】:133 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

圖6:不同代的PDSCs在成骨培養(yǎng)基作用下械性確酸酵!^活性在第7,14天的時(shí)候表現(xiàn)不同代的PDSCs在成骨培養(yǎng)基作用下,7天及14天后,均表現(xiàn)出較強(qiáng)的堿性

圖6:不同代的PDSCs在成骨培養(yǎng)基作用下械性確酸酵!^活性在第7,14天的時(shí)候表現(xiàn)不同代的PDSCs在成骨培養(yǎng)基作用下,7天及14天后,均表現(xiàn)出較強(qiáng)的堿性

其減性碟酸醇活性也相應(yīng)的降低,其中P3與P7之同有顯著性區(qū)別(包括第7天和第14天)(見(jiàn)圖6)。3.5骨膜來(lái)源干細(xì)胞生長(zhǎng)曲線25


圖7:不同代PDSCs在培養(yǎng)9天后的生長(zhǎng)曲線

圖7:不同代PDSCs在培養(yǎng)9天后的生長(zhǎng)曲線

圖7:不同代PDSCs在培養(yǎng)9天后的生長(zhǎng)曲線細(xì)胞生長(zhǎng)曲線呈S形(圖7),第3代骨膜細(xì)胞接種后經(jīng)至潛伏期為3d左右,之后細(xì)胞進(jìn)入增殖較快的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,7天后細(xì)胞基本融合鋪滿瓶底,這時(shí)細(xì)胞進(jìn)入下個(gè)階段平臺(tái)期,細(xì)胞明顯增殖緩慢。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)第3代與第7代骨膜細(xì)胞增殖能力相似,雖然增殖能力略....


圖3:免疫磁珠細(xì)胞分離操作示意圖

圖3:免疫磁珠細(xì)胞分離操作示意圖

浙江大學(xué)博士學(xué)位論文 第一部分離器進(jìn)行分離,并成功分離出PDSCs眾所周知克隆形成能力是干細(xì)胞的重要特征。PDSCs在極低密度培養(yǎng)條件下表現(xiàn)出很強(qiáng)的自我復(fù)制能力并形成克隆。這表明PDSCs具有很強(qiáng)的增殖能力,具有從一個(gè)單細(xì)胞形成克隆的潛能。到目前為止,尚未有研究顯示找到特異性表面....


圖4:骨膜來(lái)源干細(xì)胞分別在單獨(dú)PDGF-bb或者聯(lián)合BMP-2生長(zhǎng)因子作用下的堿性碟酸酶活力與對(duì)照組(0M)比較,單獨(dú)添加BMP-2或者聯(lián)合添加BMP-2和PDGF-bb組的堿

圖4:骨膜來(lái)源干細(xì)胞分別在單獨(dú)PDGF-bb或者聯(lián)合BMP-2生長(zhǎng)因子作用下的堿性碟酸酶活力與對(duì)照組(0M)比較,單獨(dú)添加BMP-2或者聯(lián)合添加BMP-2和PDGF-bb組的堿

g I Im150ng/mlPDGF-bb、 <5 、 免Day圖3:第三代骨?來(lái)源干細(xì)胞在含有不同濃度PDGF-bb生長(zhǎng)因子(1Ong/mL20ng/ml,50ng/ml,100ng/ml.]50ng/ml)培養(yǎng)基作用下分別培養(yǎng)3,5,7,9天后增殖情況表現(xiàn)結(jié)....



本文編號(hào):3961300

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