研究背景:臨床工作中,因暴力所致的骨折是創(chuàng)傷骨科、手足外科等四肢創(chuàng)傷修復(fù)科室最常見的疾病,特點是成因比較復(fù)雜、損傷位置多樣、累及人群廣泛等,往往給患者及家庭帶來較重的身心障礙與經(jīng)濟負擔。盡管骨具有較強的愈合能力,但依然有約10%的骨折愈合將受到不同程度干擾,如感染、神經(jīng)營養(yǎng)因素等問題造成的骨缺損、骨髓炎、骨壞死、骨折不愈合或畸形愈合等并發(fā)癥同樣是治療中的難點^[1]。所以,探討新生骨組織形成的生理過程與成骨調(diào)節(jié)機制,能夠為臨床治療提供新的思路與靶點。骨折,是指骨結(jié)構(gòu)的連續(xù)性被完全或部分破壞。機體為恢復(fù)骨骼原有的功能及結(jié)構(gòu),將觸發(fā)一個多因素調(diào)控的復(fù)雜再生修復(fù)過程。Giannoudis等^[2]曾提出影響骨折愈合過程的四個主要因素:相關(guān)生長因子、骨組織支架、間充質(zhì)干細胞和力學環(huán)境,而這幾方面也是治療骨折的重要切入點。其中,間充質(zhì)干細胞分化在促進骨組織形成和骨折愈合修復(fù)的全過程里扮演著重要角色。骨髓間充質(zhì)干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)又稱骨髓源性的間充質(zhì)干細胞(bone marrow-deri...

【文章頁數(shù)】：114 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第1章 緒論
    1.1 概述
    1.2 Lnc RNA與骨髓間充質(zhì)干細胞
        1.2.1 Lnc RNA的分類、結(jié)構(gòu)與功能
        1.2.2 Lnc RNA對骨髓間充質(zhì)干細胞的調(diào)控
    1.3 mi RNA與骨髓間充質(zhì)干細胞
        1.3.1 mi RNA的結(jié)構(gòu)與功能
        1.3.2 mi RNA調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細胞
    1.4 總結(jié)和展望
第2章 小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分離、培養(yǎng)與鑒定
    2.1 引言
    2.2 實驗材料與方法
        2.2.1 實驗動物
        2.2.2 主要儀器與耗材
        2.2.3 主要試劑與溶液
        2.2.4 實驗方法
    2.3 實驗結(jié)果
        2.3.1 m BMSCs形態(tài)學觀察
        2.3.2 MTT法檢測m BMSCs增殖能力
        2.3.3 流式細胞術(shù)鑒定m BMSCs表面標志物
        2.3.4 茜素紅染色鑒定m BMSCs成骨分化
        2.3.5 油紅O染色鑒定m BMSCs成脂分化
    2.4 討論
    2.5 小結(jié)
第3章 Lnc RNA H19、mi R-188 與LCo R在m BMSCs中的相互作用
    3.1 引言
    3.2 實驗材料與方法
        3.2.1 主要儀器與耗材
        3.2.2 主要試劑與溶液
        3.2.3 實驗方法
    3.3 實驗結(jié)果
        3.3.1 微陣列芯片顯示mi RNA、Lnc RNA和m RNA的差異表達
        3.3.2 q RT-PCR檢測mi R-188、Lnc RNA H19、LCo R在m BMSCs中的表達水平
        3.3.3 Western blot檢測LCo R的蛋白表達水平
        3.3.4 驗證Lnc RNA H19與mi R-188 之間的關(guān)系
        3.3.5 驗證mi R-188 與LCo R之間的關(guān)系
    3.4 討論
    3.5 小結(jié)
第4章 LCo R在調(diào)控m BMSCs成骨及成脂分化過程中的作用機制和體內(nèi)研究
    4.1 引言
    4.2 實驗材料與方法
        4.2.1 主要儀器與耗材
        4.2.2 主要試劑與溶液
        4.2.3 實驗動物
        4.2.4 實驗方法
    4.3 實驗結(jié)果
        4.3.1 GO分析和KEGG分析明確信號通路相互作用網(wǎng)絡(luò)
        4.3.2 體外驗證LCo R影響m BMSCs成骨成脂分化的信號通路
        4.3.3 LCo R對骨折愈合影響的動物實驗研究
    4.4 討論
    4.5 小結(jié)
第5章 全文總結(jié)
參考文獻
作者簡介及在讀期間發(fā)表論文情況
致謝



本文編號：3957598