LncRNA H19介導(dǎo)miR-188調(diào)控LCoR表達(dá)對(duì)小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化作用的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2024-04-18 18:53
研究背景:臨床工作中,因暴力所致的骨折是創(chuàng)傷骨科、手足外科等四肢創(chuàng)傷修復(fù)科室最常見(jiàn)的疾病,特點(diǎn)是成因比較復(fù)雜、損傷位置多樣、累及人群廣泛等,往往給患者及家庭帶來(lái)較重的身心障礙與經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。盡管骨具有較強(qiáng)的愈合能力,但依然有約10%的骨折愈合將受到不同程度干擾,如感染、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因素等問(wèn)題造成的骨缺損、骨髓炎、骨壞死、骨折不愈合或畸形愈合等并發(fā)癥同樣是治療中的難點(diǎn)[1]。所以,探討新生骨組織形成的生理過(guò)程與成骨調(diào)節(jié)機(jī)制,能夠?yàn)榕R床治療提供新的思路與靶點(diǎn)。骨折,是指骨結(jié)構(gòu)的連續(xù)性被完全或部分破壞。機(jī)體為恢復(fù)骨骼原有的功能及結(jié)構(gòu),將觸發(fā)一個(gè)多因素調(diào)控的復(fù)雜再生修復(fù)過(guò)程。Giannoudis等[2]曾提出影響骨折愈合過(guò)程的四個(gè)主要因素:相關(guān)生長(zhǎng)因子、骨組織支架、間充質(zhì)干細(xì)胞和力學(xué)環(huán)境,而這幾方面也是治療骨折的重要切入點(diǎn)。其中,間充質(zhì)干細(xì)胞分化在促進(jìn)骨組織形成和骨折愈合修復(fù)的全過(guò)程里扮演著重要角色。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)又稱骨髓源性的間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow-deri...
【文章頁(yè)數(shù)】:114 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第1章 緒論
1.1 概述
1.2 Lnc RNA與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
1.2.1 Lnc RNA的分類、結(jié)構(gòu)與功能
1.2.2 Lnc RNA對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的調(diào)控
1.3 mi RNA與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
1.3.1 mi RNA的結(jié)構(gòu)與功能
1.3.2 mi RNA調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
1.4 總結(jié)和展望
第2章 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離、培養(yǎng)與鑒定
2.1 引言
2.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.2.2 主要儀器與耗材
2.2.3 主要試劑與溶液
2.2.4 實(shí)驗(yàn)方法
2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.3.1 m BMSCs形態(tài)學(xué)觀察
2.3.2 MTT法檢測(cè)m BMSCs增殖能力
2.3.3 流式細(xì)胞術(shù)鑒定m BMSCs表面標(biāo)志物
2.3.4 茜素紅染色鑒定m BMSCs成骨分化
2.3.5 油紅O染色鑒定m BMSCs成脂分化
2.4 討論
2.5 小結(jié)
第3章 Lnc RNA H19、mi R-188 與LCo R在m BMSCs中的相互作用
3.1 引言
3.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
3.2.1 主要儀器與耗材
3.2.2 主要試劑與溶液
3.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.3.1 微陣列芯片顯示mi RNA、Lnc RNA和m RNA的差異表達(dá)
3.3.2 q RT-PCR檢測(cè)mi R-188、Lnc RNA H19、LCo R在m BMSCs中的表達(dá)水平
3.3.3 Western blot檢測(cè)LCo R的蛋白表達(dá)水平
3.3.4 驗(yàn)證Lnc RNA H19與mi R-188 之間的關(guān)系
3.3.5 驗(yàn)證mi R-188 與LCo R之間的關(guān)系
3.4 討論
3.5 小結(jié)
第4章 LCo R在調(diào)控m BMSCs成骨及成脂分化過(guò)程中的作用機(jī)制和體內(nèi)研究
4.1 引言
4.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
4.2.1 主要儀器與耗材
4.2.2 主要試劑與溶液
4.2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
4.2.4 實(shí)驗(yàn)方法
4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.3.1 GO分析和KEGG分析明確信號(hào)通路相互作用網(wǎng)絡(luò)
4.3.2 體外驗(yàn)證LCo R影響m BMSCs成骨成脂分化的信號(hào)通路
4.3.3 LCo R對(duì)骨折愈合影響的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究
4.4 討論
4.5 小結(jié)
第5章 全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及在讀期間發(fā)表論文情況
致謝
本文編號(hào):3957598
【文章頁(yè)數(shù)】:114 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
abstract
第1章 緒論
1.1 概述
1.2 Lnc RNA與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
1.2.1 Lnc RNA的分類、結(jié)構(gòu)與功能
1.2.2 Lnc RNA對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的調(diào)控
1.3 mi RNA與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
1.3.1 mi RNA的結(jié)構(gòu)與功能
1.3.2 mi RNA調(diào)控骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞
1.4 總結(jié)和展望
第2章 小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離、培養(yǎng)與鑒定
2.1 引言
2.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.2.2 主要儀器與耗材
2.2.3 主要試劑與溶液
2.2.4 實(shí)驗(yàn)方法
2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
2.3.1 m BMSCs形態(tài)學(xué)觀察
2.3.2 MTT法檢測(cè)m BMSCs增殖能力
2.3.3 流式細(xì)胞術(shù)鑒定m BMSCs表面標(biāo)志物
2.3.4 茜素紅染色鑒定m BMSCs成骨分化
2.3.5 油紅O染色鑒定m BMSCs成脂分化
2.4 討論
2.5 小結(jié)
第3章 Lnc RNA H19、mi R-188 與LCo R在m BMSCs中的相互作用
3.1 引言
3.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
3.2.1 主要儀器與耗材
3.2.2 主要試劑與溶液
3.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
3.3.1 微陣列芯片顯示mi RNA、Lnc RNA和m RNA的差異表達(dá)
3.3.2 q RT-PCR檢測(cè)mi R-188、Lnc RNA H19、LCo R在m BMSCs中的表達(dá)水平
3.3.3 Western blot檢測(cè)LCo R的蛋白表達(dá)水平
3.3.4 驗(yàn)證Lnc RNA H19與mi R-188 之間的關(guān)系
3.3.5 驗(yàn)證mi R-188 與LCo R之間的關(guān)系
3.4 討論
3.5 小結(jié)
第4章 LCo R在調(diào)控m BMSCs成骨及成脂分化過(guò)程中的作用機(jī)制和體內(nèi)研究
4.1 引言
4.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
4.2.1 主要儀器與耗材
4.2.2 主要試劑與溶液
4.2.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
4.2.4 實(shí)驗(yàn)方法
4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
4.3.1 GO分析和KEGG分析明確信號(hào)通路相互作用網(wǎng)絡(luò)
4.3.2 體外驗(yàn)證LCo R影響m BMSCs成骨成脂分化的信號(hào)通路
4.3.3 LCo R對(duì)骨折愈合影響的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究
4.4 討論
4.5 小結(jié)
第5章 全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及在讀期間發(fā)表論文情況
致謝
本文編號(hào):3957598
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