目的:骨肉瘤(osteosarcoma,OS),起源于間葉組織,是兒童和青少年中最多見(jiàn)的原發(fā)性惡性骨腫瘤,約占所有原發(fā)惡性骨腫瘤的15%-23%。雖然手術(shù)結(jié)合新輔助化療的治療方式顯著改善了骨肉瘤患者的預(yù)后,但是,在過(guò)去30年里,病人的存活率并沒(méi)有顯著的提升,特別對(duì)于產(chǎn)生耐藥性的患者或在診斷時(shí)就己發(fā)生轉(zhuǎn)移的患者,臨床治療效果仍然欠佳,存活率仍然小于30%。因此,探討骨肉瘤發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制,并為骨肉瘤的治療、診斷和預(yù)后尋找新的生物標(biāo)志物是一項(xiàng)重要和迫切的任務(wù)。微小RNA(miRNA)是重要的轉(zhuǎn)錄后調(diào)控因子,這些非編碼小RNAs與特異性同源序列靶轉(zhuǎn)錄物的3’-非翻譯區(qū)(3’-UTR)相結(jié)合,通常會(huì)導(dǎo)致靶基因的翻譯抑制和基因的沉默。PDZD2是促進(jìn)胰島瘤細(xì)胞增殖的多PDZ結(jié)構(gòu)域蛋白,己明確其在前列腺腫瘤發(fā)生過(guò)程中上調(diào),但是PDZD2在骨肉瘤中的功能仍不清楚。miRNA的失調(diào)可以通過(guò)其對(duì)靶基因的調(diào)節(jié)促進(jìn)腫瘤的發(fā)生,增殖和轉(zhuǎn)移。本研究調(diào)查了 miR-363和PDZD2在骨肉瘤細(xì)胞MG-63中的功能,以及miR-363和PDZD2的相互作用關(guān)系,以探究miR-363對(duì)骨肉瘤細(xì)胞的調(diào)控作用及其分子...

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖２?ｍｉＲ－３６３與ＰＤＺＤ２的表達(dá)呈負(fù)調(diào)控關(guān)系??

通過(guò)對(duì)８對(duì)骨肉瘤組織和瘤旁組織的ｑＰＣＲ檢測(cè)并對(duì)比后發(fā)現(xiàn)骨肉瘤組織??中的ｍｉＲ－３６３呈現(xiàn)低表達(dá)，而ＰＤＺＤ２的表達(dá)則升高（圖１?），且二者表達(dá)呈現(xiàn)負(fù)??調(diào)控的趨勢(shì)（圖２）。結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。??１４??

圖３不同細(xì)胞株中ｍｉＲ－３６３的表達(dá)水平??Ｆｉｇ．?３?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ｍｉＲ－３６３?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ??

通過(guò)對(duì)成骨細(xì)胞株ｈＦＯＢｌ．１９和骨肉瘤細(xì)胞株ＭＧ－６３、ＨＯＳ和Ｓａｏｓ－２的??ｑＰＣＲ檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)ｍｉＲ－３６３在骨肉瘤細(xì)胞株中呈現(xiàn)低表達(dá)狀態(tài)，其中ＭＧ－６３細(xì)??胞的ｍｉＲ－３６３低表達(dá)與其他骨肉瘤細(xì)胞相比較顯著（

圖4設(shè)計(jì)合成的miR-363NC.mimics序列

ａ丄??＊??■?Ｔ??＊＊??丁??ｈＦＯＢ１．１９?ＭＧ－６３?ＨＯＳ?Ｓａｏｓ－２??圖３不同細(xì)胞株中ｍｉＲ－３６３的表達(dá)水平??Ｆｉｇ．?３?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｌｅｖｅｌ?ｏｆ?ｍｉＲ－３６３?ｉｎ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｅｌｌ?ｌｉｎｅｓ??３．３通過(guò)轉(zhuǎn)染使骨肉瘤細(xì)....

圖５轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中ｍｉＲ－３６３的表達(dá)??Ｆｉｇ．５?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ｍｉＲ－３６３?ｉｎ?ｃｅｌｌｓ?ａｆｔｅｒ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ??

３．３通過(guò)轉(zhuǎn)染使骨肉瘤細(xì)胞中ｍｉＲ－３６３過(guò)表達(dá)??首先設(shè)計(jì)合成ｍｉＲ－３６３ＮＣ、ｍｉｍｉｃｓ序列（圖４），轉(zhuǎn)染骨肉瘤細(xì)胞ＭＧ－６３；??然后用ｑＰＣＲ檢測(cè)轉(zhuǎn)染的效果，如圖５所示，相比ＭＧ－６３＋ＮＣ組，ＭＧ－６３＋ｍｉｍｉｃｓ??組中的ｍｉＲ－３６３含量顯著增高，表明轉(zhuǎn)染可提....

本文編號(hào)：3937000