脊髓損傷(spine cord injury,SCI)對患者造成的影響無疑是毀滅性的,同時也會帶來各種家庭及社會問題,近年來SCI發(fā)病率呈現(xiàn)逐年增高趨勢。脊髓損傷后,上下神經(jīng)傳導(dǎo)束的斷裂、潰變是造成損傷平面以下肢體感覺和運(yùn)動功能障礙的直接原因。脊髓損傷區(qū)繼發(fā)炎癥反應(yīng),組織壞死,形成空腔;膠質(zhì)細(xì)胞大量增生形成的瘢痕組織阻礙神經(jīng)纖維的再生,最終導(dǎo)致神經(jīng)元和神經(jīng)纖維的壞死、潰變。大鼠鼻黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞(Ectomesenchymal stem cells,EMSCs)具有取材簡變、易于分離和體外培養(yǎng),并且它可由供體提供而不涉及倫理問題,是用于細(xì)胞移植的理想種子細(xì)胞。在治療脊髓損傷方面,鼻黏膜EMSCs可以分泌細(xì)胞活性因子和細(xì)胞外基質(zhì),可改善脊髓損傷處微環(huán)境,填補(bǔ)壞死空腔,橋接脊髓斷端,恢復(fù)解剖結(jié)構(gòu),引導(dǎo)內(nèi)源性神經(jīng)纖維網(wǎng)絡(luò)再生。然而,由于脊髓損傷后局部微環(huán)境的改變,鼻黏膜EMSCs移植后,大量細(xì)胞不能很好地存活。音猬因子(Sonic hedgehog,SHH)是胚胎發(fā)育過程中由脊索產(chǎn)生的一種因子,SHH決定了神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育和分化過程。體外研究表明,SHH可誘導(dǎo)成體干細(xì)胞分化為運(yùn)動神經(jīng)元和少突膠...

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【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1：鼻黏膜EMSCs體外培養(yǎng)擴(kuò)增顯微鏡下表現(xiàn)A：原代培養(yǎng)5d顯微鏡下形態(tài)

三角形、細(xì)長型細(xì)胞聚集成團(tuán)同時開始出現(xiàn)細(xì)胞間連接（圖1B）；培養(yǎng)至10d后，此時的鼻黏膜EMSCs增殖能力明顯增強(qiáng)，細(xì)胞鋪滿瓶底90%以上，且形態(tài)開始均一，開始呈現(xiàn)出梭形生長(圖1C)。圖1：鼻黏膜EMSCs體外培養(yǎng)擴(kuò)增顯微鏡下表現(xiàn)A：原代培養(yǎng)5d顯微鏡下形....

圖2免疫熒光染色下鼻黏膜EMSCs對Nestin、Vimentin、Connexin-43及CD133蛋白的表達(dá)Bar=25μmFig.2ExpressionofNestin,Vimentin,Connexin-43andCD133proteininnasalmucosa

圖2免疫熒光染色下鼻黏膜EMSCs對Nestin、Vimentin、Connexin-43白的表達(dá)Bar=25μmFig.2ExpressionofNestin,Vimentin,Connexin-43andCD133proteininEMSCs....

圖4：SHH-EMSCs成骨誘導(dǎo)分化及成脂誘導(dǎo)分化A：SHH-EMSCs成骨誘導(dǎo)21d鈣

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文圖3第四代鼻黏膜EMSCs生長曲線Fig3：RelativecellgrowrateoffourthgenerationnasalmucosaEMSCs4.4鼻黏膜間充質(zhì)干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化及成脂誘導(dǎo)分化成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)基中定向成骨誘導(dǎo)分....

圖1SHH腺病毒對EMSCs的轉(zhuǎn)染效率及形態(tài)學(xué)觀察A:SHH-EMSCs于熒光顯微鏡下表現(xiàn)為綠色熒光B同一視角SHH-EMSC白光下形態(tài)Bar=25μm

江蘇大學(xué)碩士學(xué)位論文顯微鏡下使用紅色熒光激發(fā)出的帶綠光的SHH-EMSCs，同圖1C融合來看SHH基因轉(zhuǎn)染效率可達(dá)95%以上。這表明了經(jīng)293A細(xì)胞擴(kuò)增的SHH腺病毒對鼻黏膜EMSCs具有很高的轉(zhuǎn)染效率，同時轉(zhuǎn)染后不會對鼻黏膜EMSCs本身的細(xì)胞形態(tài)學(xué)有....

本文編號：3916026