目的探究TRPM8在氧糖剝奪/復(fù)糖復(fù)氧誘導(dǎo)神經(jīng)元PC12細(xì)胞凋亡中的分子機(jī)制。方法體外建立氧糖剝奪/復(fù)糖復(fù)氧模型模擬脊髓缺血再灌注損傷,流式細(xì)胞儀檢測(cè)PC12細(xì)胞的凋亡,RT-PCR和western blot檢測(cè)TRPM8、UCP4和c AMP、p-PKA、Bax、Bcl-2的表達(dá)變化;向PC12細(xì)胞分別加入AMTB(TRPM8阻斷劑)和轉(zhuǎn)染UCP4質(zhì)粒,western blot檢測(cè)c AMP、p-PKA、UCP4、Bax、Bcl-2的表達(dá)水平;抑制PKA信號(hào),檢測(cè)UCP4、Bax、Bcl-2的蛋白表達(dá)水平。結(jié)果氧糖剝奪/復(fù)糖復(fù)氧導(dǎo)致脊髓神經(jīng)元PC12細(xì)胞發(fā)生凋亡,TRPM8過(guò)表達(dá),UCP4表達(dá)下降,抑制c AMP-PKA信號(hào)。抑制TRPM8表達(dá),則細(xì)胞凋亡減少,c AMPPKA信號(hào)被激活,且UCP4的表達(dá)有所恢復(fù)。抑制TRPM8和c AMP-PKA信號(hào),UCP4的表達(dá)減少,細(xì)胞凋亡增加。結(jié)論在氧糖剝奪/復(fù)糖復(fù)氧模型中,PC12細(xì)胞TRPM8過(guò)表達(dá),且通過(guò)c AMP-PKA/UCP4誘導(dǎo)神經(jīng)元PC12細(xì)胞凋亡。

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圖1氧糖剝奪/復(fù)糖復(fù)氧誘導(dǎo)的神經(jīng)元細(xì)胞TRPM8和UCP4的表

TRPM8UCP46ConOGB/R543210RelativemRNAexpressionTRPM8UCP4β-actinConOGB/RTRPM8UCP4ConOGB/R4.03.53.02.52.01.51.00.50Relativeproteinexpression圖1氧....

圖1氧糖剝奪/復(fù)糖復(fù)氧誘導(dǎo)的神經(jīng)元細(xì)胞TRPM8和UCP4的表達(dá)**

TRPM8UCP46ConOGB/R543210RelativemRNAexpressionTRPM8UCP4β-actinConOGB/RTRPM8UCP4ConOGB/R4.03.53.02.52.01.51.00.50Relativeproteinexpression圖1氧....

圖2TRPM8對(duì)氧糖剝奪/復(fù)糖復(fù)氧后神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響

表明TRPM8可100101102103104AYCon104103102101100PIOGD/ROGD/R+AMTB100101102103104AY104103102101100PI104103102101100PI100101102103104AYAConOGD/ROGD....

圖2TRPM8對(duì)氧糖剝奪/復(fù)糖復(fù)氧后神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響

表明TRPM8可100101102103104AYCon104103102101100PIOGD/ROGD/R+AMTB100101102103104AY104103102101100PI104103102101100PI100101102103104AYAConOGD/ROGD....

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