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microRNA-365a-3p在腰椎關(guān)節(jié)突關(guān)節(jié)軟骨退變中的作用

發(fā)布時(shí)間:2023-12-09 19:36
  目的:探究microRNA-365a-3p在腰椎關(guān)節(jié)突軟骨退變過(guò)程中的調(diào)控作用,為治療腰椎小關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎提供潛在的分子理論依據(jù)。方法:選取因腰椎退行性病變接受手術(shù)治療的患者20名,因腰椎骨折接受手術(shù)治療的患者10名,術(shù)前所有患者均行腰椎CT和MRI檢查,采用Weishaupt等提出的關(guān)節(jié)突關(guān)節(jié)退變分級(jí)法將患者按退變嚴(yán)重程度依次分為2組(退變組和正常組),無(wú)菌條件下手術(shù)獲取并分離腰椎關(guān)節(jié)突關(guān)節(jié)軟骨組織,標(biāo)本番紅固綠染色處理;利用qRT-PCR觀察miRNA-365a-3p在正常和退變軟骨組織中的差異表達(dá);體外培養(yǎng)關(guān)節(jié)突軟骨細(xì)胞,用IL-1β分別做不同處理,在體外軟骨細(xì)胞中轉(zhuǎn)染miR-365a-3p mimic和inhibitor,通過(guò)CCK8法檢測(cè)軟骨細(xì)胞增殖;通過(guò)qRT-PCR及Western blot技術(shù)檢測(cè)過(guò)表達(dá)和過(guò)抑制前后II型膠原,蛋白聚糖,金屬蛋白酶MMP-13的差異表達(dá)。結(jié)果:聯(lián)合CT、MRI評(píng)級(jí)以及病理染色(番紅固綠法)將術(shù)中所取腰椎關(guān)節(jié)突軟骨組織分為2組,RT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)miR-365a-3p的mRNA在退變關(guān)節(jié)突關(guān)節(jié)軟骨組織中明顯下調(diào),具有差異表達(dá);無(wú)菌條件下體...

【文章頁(yè)數(shù)】:51 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
前言
研究材料(資料、內(nèi)容)與方法
    1 研究?jī)?nèi)容
    2 材料與方法
        2.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
        2.2 主要儀器及試劑
        2.3 腰椎小關(guān)節(jié)退變 CT 和 MRI 診斷分組
        2.4 關(guān)節(jié)突關(guān)節(jié)軟骨組織染色
        2.5 Real-time PCR 法檢測(cè) m RNA 和 mi RNA 的表達(dá)量
        2.6 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.7 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.8 細(xì)胞增殖
        2.9 Western blot 測(cè)定蛋白表達(dá)
    3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及讀研期間主要科研成果
致謝



本文編號(hào):3872023

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