目的:研究人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體(hucMSCs-exo)對減輕大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞氧糖剝奪/復(fù)氧損傷水腫的作用及機(jī)制。方法:超高速離心法分離提取hucMSCs-exo,western blot方法檢測細(xì)胞內(nèi)AQP4蛋白的表達(dá)量,活細(xì)胞工作站檢測細(xì)胞體積,電鏡觀察細(xì)胞水腫超微結(jié)構(gòu)的變化。通過應(yīng)用JNK抑制劑sp600125抑制JNK蛋白的表達(dá),檢測細(xì)胞體積、AQP4表達(dá)及p-JNK蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:hucMSCs-exo干預(yù)OGD6h/R24h后的脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞,電鏡可見細(xì)胞中線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的水腫減輕,溶酶體數(shù)量減少;活細(xì)胞工作站測量細(xì)胞水腫的體積顯著降低(3683.78±954.17);western blot檢測細(xì)胞AQP4的表達(dá)量較對照組明顯減少(P<0.05)。應(yīng)用hucMSCs-exo與SP600125抑制JNK后細(xì)胞中p-JNK表達(dá)明顯降低(P<0.05),同時細(xì)胞中AQP4表達(dá)也隨之減少(P<0.05),細(xì)胞水腫的體積變小(3751.37±736.42)。結(jié)論:1.高濃度的hucMSCs-exo能明顯降低OGD6h/R24h后脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞中...

【文章頁數(shù)】：43 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一部分 hucMSCs及hucMSCs-exo的分離提取及鑒定
    1 材料與方法
        1.1 主要材料
        1.2 主要儀器
        1.3 主要試劑配制
        1.4 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.5 hucMSCs-exo的提取及初步鑒定
        1.6 統(tǒng)計分析
    2 結(jié)果
        2.1 光鏡下觀察原代人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞
        2.2 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的純度鑒定
        2.3 hucMSCs-exo鑒定
    3 討論
    4 結(jié)論
第二部分 hucMSCs-exo對OGD6h/R24h后大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞水腫的影響
    1 材料與方法
        1.1 主要抗體、試劑及耗材
        1.2 主要儀器
        1.3 主要試劑配制
        1.4 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.5 氧糖剝奪/復(fù)氧(OGD/R)模型的建立
        1.6 利用活細(xì)胞工作站檢測細(xì)胞體積
        1.7 Western blot檢測星形膠質(zhì)細(xì)胞蛋白的表達(dá)
        1.8 統(tǒng)計分析
    2 結(jié)果
        2.1 hucMSCs-exo對OGD/R后脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞水腫體積的影響
        2.2 透射電鏡觀察OGD/R后星形膠質(zhì)細(xì)胞水腫超微結(jié)構(gòu)的變化
        2.3 hucMSCs-exo對OGD/R后脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞AQP4蛋白表達(dá)的影響
    3 討論
    4 結(jié)論
第三部分 研究hucMSCs-exo對OGD/R后大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞水腫的機(jī)制
    1 材料與方法
        1.1 主要試劑、抗體及材料
        1.2 主要儀器
        1.3 主要試劑配制
        1.4 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.5 氧糖剝奪/復(fù)氧模型建立
        1.6 利用活細(xì)胞工作站檢測細(xì)胞的體積
        1.7 Westernblot檢測星形膠質(zhì)細(xì)胞蛋白的表達(dá)
        1.8 統(tǒng)計分析
    2 結(jié)果
        2.1 SP600125對OGD/R后大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞體積的影響
        2.2 hucMSCs-exo、SP600125對OGD/R后大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞AQP4蛋白的表達(dá)及核中JNK活化的影響
    3 討論
    4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 間充質(zhì)干細(xì)胞來源外泌體在脊髓損傷中的作用研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
個人簡歷



本文編號：3858696