目的周圍神經(jīng)缺損傷廣泛發(fā)生于嚴重外傷后,常引起支配區(qū)域的感覺和運動功能障礙,極大影響患者生活質(zhì)量,且療效不佳。神經(jīng)導管的應用逐漸成為替代方案。為了最大限度地模擬體內(nèi)生長環(huán)境,理想的神經(jīng)導管應具備機械引導、電流傳導和刺激血管再生的功能。然而大部分神經(jīng)導管只能起到機械性通道的作用,因此神經(jīng)修復情況仍不滿意。本課題將制備氧化石墨烯納米粒/聚己內(nèi)酯導電神經(jīng)導管,并探究其在促進周圍神經(jīng)長段缺損再生中的作用,同時探討潛在修復機制。方法采用一體成型工藝制備氧化石墨烯/聚己內(nèi)酯神經(jīng)導管,通過掃描電鏡和透射電鏡分別觀察導管表面結(jié)構(gòu)和氧化石墨烯納米顆粒結(jié)構(gòu);此外,檢測氧化石墨烯與聚己內(nèi)酯間作用力、神經(jīng)導管彈性模量、斷裂伸長率及導電能力。分別制備氧化石墨烯/聚己內(nèi)酯支架和聚己內(nèi)酯支架,體外實驗培養(yǎng)施旺細胞,觀察施旺細胞在不同支架上的形態(tài)結(jié)構(gòu),通過活死細胞染色、CCK法、免疫熒光染色、Western Blot、q-PCR法檢測細胞毒性、增殖、黏附水平及神經(jīng)標記物表達。建立15mm大鼠坐骨神經(jīng)缺損模型,在術(shù)后6周、12周和18周評估功能學、電生理學、組織形態(tài)學水平,同時檢測損傷區(qū)域微血管化程度,并測定血管形成相...

【文章頁數(shù)】：116 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中文部分
    第一章 緒論
        1.1 研究背景
        1.2 研究現(xiàn)狀
            1.2.1 神經(jīng)導管的種類和特點
            1.2.2 神經(jīng)導管的內(nèi)外微環(huán)境
            1.2.3 電刺激與導電神經(jīng)導管
    第二章 氧化石墨烯/聚己內(nèi)酯神經(jīng)導管的制備與表征
        2.1 引言
        2.2 材料與方法
            2.2.1 氧化石墨烯/聚己內(nèi)酯神經(jīng)導管制備
            2.2.2 氧化石墨烯/聚己內(nèi)酯神經(jīng)導管表征
            2.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
        2.3 結(jié)果
        2.4 討論
        2.5 本章小結(jié)
    第三章 氧化石墨烯/聚己內(nèi)酯神經(jīng)導管的體外生物相容性實驗
        3.1 引言
        3.2 材料與方法
            3.2.1 神經(jīng)導管支架材料準備與消毒
            3.2.2 施旺細胞培養(yǎng)
            3.2.3 施旺細胞增殖、毒性實驗
            3.2.4 施旺細胞微觀形態(tài)掃描電鏡實驗
            3.2.5 倒置熒光顯微鏡觀察實驗
            3.2.6 蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)、實時熒光定量核酸擴增檢測(quantitative PCR)
            3.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
        3.3 結(jié)果
        3.4 討論
        3.5 本章小結(jié)
    第四章 氧化石墨烯/聚己內(nèi)酯神經(jīng)導管修復坐骨神經(jīng)缺損實驗
        4.1 引言
        4.2 材料與方法
            4.2.1 建立大鼠坐骨神經(jīng)缺損模型
            4.2.2 大體觀察
            4.2.3 功能學檢測——步態(tài)分析
            4.2.4 電生理學檢測
            4.2.5 組織形態(tài)學檢測
            4.2.6 免疫組織化學染色檢測
            4.2.7 蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)
            4.2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析
        4.3 結(jié)果
        4.4 討論
        4.5 本章小結(jié)
    第五章 全文總結(jié)
英文部分
    Chapter 1 Introduction
        1.1 Background
        1.2 Research Status
            1.2.1 Types and Characteristics of Nerve Conduits
            1.2.2 Internal and External Microenvironment of Nerve Conduits
            1.2.3 Electrical Stimulation and Conductive Nerve Conduits
    Chapter 2 Preparation and Characterization of Graphene Oxide/Polycaprolactone Nerve Conduit
        2.1 Introduction
        2.2 Materials and Methods
            2.2.1 Preparation of GO/PCL Nerve Conduit
            2.2.2 Characterization of GO/PCL Nerve Conduit
            2.2.3 Statistical Analysis
        2.3 Results
        2.4 Discussion
        2.5 Conclusion
    Chapter 3 In Vitro Biocompatibility Studies of Graphene Oxide/Polycaprolactone Nerve Conduit
        3.1 Introduction
        3.2 Materials and Methods
            3.2.1 Preparation and Disinfection of Nerve Conduit Materials
            3.2.2 Schwann Cell Culture
            3.2.3 Schwann Cell Proliferation and Toxicity Assays
            3.2.4 Microscopic Morphology of Schwann Cells with SEM
            3.2.5 Cell Observation with Inverted Fluorescence Microscopy
            3.2.6 Western Blot and Real-time Quantitative PCR
            3.2.7 Statistical Analysis
        3.3 Results
        3.4 Discussion
        3.5 Conclusion
    Chapter 4 In Vivo Repair of Sciatic Nerve Defects by Graphene Oxide/Polycaprolactone Nerve Conduit
        4.1 Introduction
        4.2 Materials and Methods
            4.2.1 Rat Sciatic Nerve Defect Model
            4.2.2 General Observation
            4.2.3 Functional Evaluation-Gait Analysis
            4.2.4 Electrophysiological Tests
            4.2.5 Histomorphological Evaluation
            4.2.6 Immunohistochemical Staining Evaluation
            4.2.7 Western Blot
            4.2.8 Statistical Analysis
        4.3 Results
        4.4 Discussion
        4.5 Conclusion
    Chapter 5 Overall Conclusions
參考文獻
致謝
攻讀博士學位期間已發(fā)表或錄用的論文
八年制學位論文要求



本文編號：3855821