發(fā)布時(shí)間：2023-10-21 12:20

　　目的周圍神經(jīng)缺損傷廣泛發(fā)生于嚴(yán)重外傷后,常引起支配區(qū)域的感覺(jué)和運(yùn)動(dòng)功能障礙,極大影響患者生活質(zhì)量,且療效不佳。神經(jīng)導(dǎo)管的應(yīng)用逐漸成為替代方案。為了最大限度地模擬體內(nèi)生長(zhǎng)環(huán)境,理想的神經(jīng)導(dǎo)管應(yīng)具備機(jī)械引導(dǎo)、電流傳導(dǎo)和刺激血管再生的功能。然而大部分神經(jīng)導(dǎo)管只能起到機(jī)械性通道的作用,因此神經(jīng)修復(fù)情況仍不滿意。本課題將制備氧化石墨烯納米粒/聚己內(nèi)酯導(dǎo)電神經(jīng)導(dǎo)管,并探究其在促進(jìn)周圍神經(jīng)長(zhǎng)段缺損再生中的作用,同時(shí)探討潛在修復(fù)機(jī)制。方法采用一體成型工藝制備氧化石墨烯/聚己內(nèi)酯神經(jīng)導(dǎo)管,通過(guò)掃描電鏡和透射電鏡分別觀察導(dǎo)管表面結(jié)構(gòu)和氧化石墨烯納米顆粒結(jié)構(gòu);此外,檢測(cè)氧化石墨烯與聚己內(nèi)酯間作用力、神經(jīng)導(dǎo)管彈性模量、斷裂伸長(zhǎng)率及導(dǎo)電能力。分別制備氧化石墨烯/聚己內(nèi)酯支架和聚己內(nèi)酯支架,體外實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)施旺細(xì)胞,觀察施旺細(xì)胞在不同支架上的形態(tài)結(jié)構(gòu),通過(guò)活死細(xì)胞染色、CCK法、免疫熒光染色、Western Blot、q-PCR法檢測(cè)細(xì)胞毒性、增殖、黏附水平及神經(jīng)標(biāo)記物表達(dá)。建立15mm大鼠坐骨神經(jīng)缺損模型,在術(shù)后6周、12周和18周評(píng)估功能學(xué)、電生理學(xué)、組織形態(tài)學(xué)水平,同時(shí)檢測(cè)損傷區(qū)域微血管化程度,并測(cè)定血管形成相...

【文章頁(yè)數(shù)】：116 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中文部分
    第一章 緒論
        1.1 研究背景
        1.2 研究現(xiàn)狀
            1.2.1 神經(jīng)導(dǎo)管的種類和特點(diǎn)
            1.2.2 神經(jīng)導(dǎo)管的內(nèi)外微環(huán)境
            1.2.3 電刺激與導(dǎo)電神經(jīng)導(dǎo)管
    第二章 氧化石墨烯/聚己內(nèi)酯神經(jīng)導(dǎo)管的制備與表征
        2.1 引言
        2.2 材料與方法
            2.2.1 氧化石墨烯/聚己內(nèi)酯神經(jīng)導(dǎo)管制備
            2.2.2 氧化石墨烯/聚己內(nèi)酯神經(jīng)導(dǎo)管表征
            2.2.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
        2.3 結(jié)果
        2.4 討論
        2.5 本章小結(jié)
    第三章 氧化石墨烯/聚己內(nèi)酯神經(jīng)導(dǎo)管的體外生物相容性實(shí)驗(yàn)
        3.1 引言
        3.2 材料與方法
            3.2.1 神經(jīng)導(dǎo)管支架材料準(zhǔn)備與消毒
            3.2.2 施旺細(xì)胞培養(yǎng)
            3.2.3 施旺細(xì)胞增殖、毒性實(shí)驗(yàn)
            3.2.4 施旺細(xì)胞微觀形態(tài)掃描電鏡實(shí)驗(yàn)
            3.2.5 倒置熒光顯微鏡觀察實(shí)驗(yàn)
            3.2.6 蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)、實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增檢測(cè)(quantitative PCR)
            3.2.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
        3.3 結(jié)果
        3.4 討論
        3.5 本章小結(jié)
    第四章 氧化石墨烯/聚己內(nèi)酯神經(jīng)導(dǎo)管修復(fù)坐骨神經(jīng)缺損實(shí)驗(yàn)
        4.1 引言
        4.2 材料與方法
            4.2.1 建立大鼠坐骨神經(jīng)缺損模型
            4.2.2 大體觀察
            4.2.3 功能學(xué)檢測(cè)——步態(tài)分析
            4.2.4 電生理學(xué)檢測(cè)
            4.2.5 組織形態(tài)學(xué)檢測(cè)
            4.2.6 免疫組織化學(xué)染色檢測(cè)
            4.2.7 蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)
            4.2.8 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
        4.3 結(jié)果
        4.4 討論
        4.5 本章小結(jié)
    第五章 全文總結(jié)
英文部分
    Chapter 1 Introduction
        1.1 Background
        1.2 Research Status
            1.2.1 Types and Characteristics of Nerve Conduits
            1.2.2 Internal and External Microenvironment of Nerve Conduits
            1.2.3 Electrical Stimulation and Conductive Nerve Conduits
    Chapter 2 Preparation and Characterization of Graphene Oxide/Polycaprolactone Nerve Conduit
        2.1 Introduction
        2.2 Materials and Methods
            2.2.1 Preparation of GO/PCL Nerve Conduit
            2.2.2 Characterization of GO/PCL Nerve Conduit
            2.2.3 Statistical Analysis
        2.3 Results
        2.4 Discussion
        2.5 Conclusion
    Chapter 3 In Vitro Biocompatibility Studies of Graphene Oxide/Polycaprolactone Nerve Conduit
        3.1 Introduction
        3.2 Materials and Methods
            3.2.1 Preparation and Disinfection of Nerve Conduit Materials
            3.2.2 Schwann Cell Culture
            3.2.3 Schwann Cell Proliferation and Toxicity Assays
            3.2.4 Microscopic Morphology of Schwann Cells with SEM
            3.2.5 Cell Observation with Inverted Fluorescence Microscopy
            3.2.6 Western Blot and Real-time Quantitative PCR
            3.2.7 Statistical Analysis
        3.3 Results
        3.4 Discussion
        3.5 Conclusion
    Chapter 4 In Vivo Repair of Sciatic Nerve Defects by Graphene Oxide/Polycaprolactone Nerve Conduit
        4.1 Introduction
        4.2 Materials and Methods
            4.2.1 Rat Sciatic Nerve Defect Model
            4.2.2 General Observation
            4.2.3 Functional Evaluation-Gait Analysis
            4.2.4 Electrophysiological Tests
            4.2.5 Histomorphological Evaluation
            4.2.6 Immunohistochemical Staining Evaluation
            4.2.7 Western Blot
            4.2.8 Statistical Analysis
        4.3 Results
        4.4 Discussion
        4.5 Conclusion
    Chapter 5 Overall Conclusions
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀博士學(xué)位期間已發(fā)表或錄用的論文
八年制學(xué)位論文要求



本文編號(hào)：3855821