目的:通過調(diào)控核呼吸因子2(human epidermal growth factor receptor-2,NRF2)的表達(dá)水平,探討其對線粒體脫乙酰酶3(Sirtuin-3,SIRT3)蛋白表達(dá)及乳腺癌細(xì)胞增殖能力的影響。方法:分組:在乳腺癌MCF-7細(xì)胞系中通過轉(zhuǎn)染質(zhì)粒,建立NRF2基因高表達(dá)的細(xì)胞系為實(shí)驗(yàn)組1,shRNA干擾構(gòu)建NRF2基因低表達(dá)的細(xì)胞系為實(shí)驗(yàn)組2,共轉(zhuǎn)染構(gòu)建NRF2及SIRT3基因均高表達(dá)的細(xì)胞系為實(shí)驗(yàn)組3,同時(shí)設(shè)立陰性對照組。檢測方法:1、應(yīng)用熒光定量PCR檢測NRF2的mRNA在各組細(xì)胞系中的表達(dá)情況;2、應(yīng)用Western blot檢測SIRT3蛋白在各組細(xì)胞系中的表達(dá)情況;3、應(yīng)用MTT實(shí)驗(yàn)檢測各組乳腺癌細(xì)胞系的增殖情況。結(jié)果:1、NRF2的mRNA在實(shí)驗(yàn)組1中的相對表達(dá)量為(55.64±1.34),實(shí)驗(yàn)組2中為(0.52±0.08),實(shí)驗(yàn)組3中為(53.52±0.65),分別與陰性對照組(1.43±0.25)比較,P<0.05,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;NRF2的mRNA在實(shí)驗(yàn)組1與實(shí)驗(yàn)組3中較陰性對照組表達(dá)增加,實(shí)驗(yàn)組2較陰性對照組表達(dá)降低。2、...

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英漢縮略詞對照表
第1章 緒論
第2章 實(shí)驗(yàn)材料與實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
    2.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    2.3 RT-PCR法檢測mRNA表達(dá)水平
    2.4 Western blot法檢測蛋白表達(dá)水平
    2.5 MTT法檢測細(xì)胞增殖情況
    2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 轉(zhuǎn)染結(jié)果
    3.2 RT-PCR分析NRF2在MCF-7細(xì)胞中的RNA表達(dá)水平
    3.3 Western blot法分析SIRT3在MCF-7細(xì)胞中的表達(dá)水平
    3.4 MTT法檢測MCF-7乳腺癌細(xì)胞的增殖能力
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號：3855644