目的:肝移植是治療終末期肝病的唯一有效手段。但是,供肝的短缺制約肝移植手術(shù),亦使很多病人在等待移植期間死亡。在我國,由于沒有腦死亡標(biāo)準(zhǔn)的法律規(guī)定,因此心臟死亡供者(donors of cardiac death,DCD)將成為我國器官捐獻(xiàn)最主要的來源。DCD相對于腦死亡供者(donors after brain death,DBD)經(jīng)歷了熱缺血損傷,更易于出現(xiàn)早期移植物功能不良(poor early graft function,PEGF)、原發(fā)性移植物無功能(primary non-function,PNF)以及缺血性膽道疾病等,導(dǎo)致移植物的長期存活率下降,影響肝移植病人的預(yù)后。所以,如何評估與改善供器官質(zhì)量是移植研究的重要課題。缺血再灌注損傷(ischemia-reperfusion?injury,IRI)是肝移植術(shù)后導(dǎo)致肝內(nèi)膽管疾病和移植物丟失的主要原因。如何減輕IRI、提高器官利用率、擴大移植物來源、降低術(shù)后并發(fā)癥、改善移植受者生存質(zhì)量是目前DCD肝移植的研究熱點。關(guān)于IRI發(fā)生的機制,目前研究比較明確的有:氧自由基爆發(fā)、細(xì)胞內(nèi)鈣超載、炎癥反應(yīng)等,最新的研究表明,細(xì)胞自噬也參與...

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 :DCD肝移植中GSK-3β表達(dá)及肝細(xì)胞自噬的變化規(guī)律及意義
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 研究對象和分組
        2.3 實驗方法
            2.3.1 大鼠DCD肝移植模型的建立
            2.3.2 巴馬小型豬DCD肝移植
            2.3.3 組織形態(tài)學(xué)檢查
            2.3.4 蛋白免疫印跡法檢測肝組織LC3、p62、AMPK的表達(dá)
            2.3.5 血清酶學(xué)
    3 結(jié)果
        3.1 大鼠DCD肝移植檢測指標(biāo)的結(jié)果
            3.1.1 組織形態(tài)學(xué)
            3.1.2 蛋白免疫印跡法檢測肝組織LC3、p62、AMPK的表達(dá)
            3.1.3 血清酶學(xué)
        3.2 豬DCD肝移植檢測指標(biāo)的結(jié)果
            3.2.1 組織形態(tài)學(xué)
            3.2.2 蛋白免疫印跡法檢測肝組織LC3、p62、AMPK的表達(dá)
            3.2.3 血清酶學(xué)
    4 討論
    5 小結(jié)
第二部分 :GSK-3β調(diào)控細(xì)胞自噬對IRI肝細(xì)胞活性的影響及途徑
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑及實驗儀器
            2.1.1 主要試劑
            2.1.2 主要儀器
        2.2 研究對象和分組
        2.3 實驗方法
            2.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)
            2.3.2 細(xì)胞轉(zhuǎn)染
            2.3.3 肝細(xì)胞無氧-復(fù)氧培養(yǎng)
            2.3.4 蛋白免疫印跡法檢測不同功能的GSK-3β影響L02 肝細(xì)胞LC3、p62、AMPK的表達(dá)
            2.3.5 免疫熒光檢測不同功能的GSK-3β影響L02 肝細(xì)胞LC3、p62、AMPK的表達(dá)
            2.3.6 MTS法檢測不同功能的GSK-3β對L02 肝細(xì)胞活性的影響
    3 結(jié)果
        3.1 不同功能的GSK-3β影響L02 肝細(xì)胞LC3、p62、AMPK的表達(dá)
            3.1.1 Western Blot檢測自噬相關(guān)蛋白表達(dá)變化
            3.1.2 免疫熒光檢測自噬相關(guān)蛋白表達(dá)變化
        3.2 不同功能的GSK-3β對L02 肝細(xì)胞活性的影響
    4 討論
    5 小結(jié)
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述
    1.自噬
    2.自噬與肝臟缺血再灌注損傷
    3.小結(jié)
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷



本文編號：3806564