A型肉毒毒素關(guān)節(jié)腔注射對大鼠關(guān)節(jié)炎疼痛的治療作用及機制研究
發(fā)布時間:2023-04-08 17:48
目的:觀察踝關(guān)節(jié)注射A型肉毒毒素(Botulinum toxin type A,BoNT/A)對佐劑性關(guān)節(jié)炎大鼠疼痛行為及脊髓中樞水平小膠質(zhì)細胞激活、腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表達的影響,探討B(tài)oNT/A對佐劑性關(guān)節(jié)炎疼痛的治療作用及可能的機制。方法:實驗1.本研究隨機選取80只雄性SD大鼠左踝關(guān)節(jié)腔注射50μl完全弗氏佐劑(complete freund’s adjuvant,CFA)制作佐劑性關(guān)節(jié)炎疼痛模型,另選16只大鼠注射同等體積生理鹽水作為對照,并分別于建模前1天及建模后第1、3、7、14和21天對大鼠機械痛閾和熱痛閾進行測定以及應(yīng)用HE染色技術(shù)觀察踝關(guān)節(jié)病理變化。評估CFA造模情況。實驗2.造模成功后,對大鼠左踝關(guān)節(jié)腔注射BoNT/A進行干預(yù),并按照注射濃度不同分為1UBoNT/A組、5UBoNT/A組、10UBoNT/A組,CFA組及sham組再次注射同等體積生理鹽水。實驗過程中剔除造模失敗或死亡的大鼠,最終以每組16只SD大鼠納入實驗。即5組分別為sham組、CFA組、1UBoNT/A組、5UBoNT/A組、10UBo...
【文章頁數(shù)】:48 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
第一部分 經(jīng)踝關(guān)節(jié)腔注射完全弗氏佐劑制作佐劑型關(guān)節(jié)炎疼痛大鼠模型
材料和方法
1.實驗動物
2.主要實驗儀器與試劑藥品
2.1 主要實驗儀器
2.2 主要實驗試劑藥品
3.實驗分組
4.佐劑性關(guān)節(jié)炎疼痛模型制作
5.疼痛行為學(xué)測試
5.1 機械痛撤足閾值測試
5.2 熱痛閾潛伏期測試
6.踝關(guān)節(jié)病理組織學(xué)觀察
7.統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
討論
第二部分 A型肉毒毒素踝關(guān)節(jié)腔注射對佐劑性關(guān)節(jié)炎疼痛大鼠模型治療作用
材料與方法
1.實驗動物
2.主要實驗儀器及試劑藥品
2.1 主要實驗儀器
2.2 主要實驗試劑
3.動物分組
4.模型建立
5.BoNT/A關(guān)節(jié)腔注射
6.疼痛行為測試
6.1 機械痛撤足閾值測試
6.2 熱痛閾潛伏期測試
7.統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
討論
第三部分 A型肉毒毒素治療大鼠慢性炎癥性疼痛的作用機制研究
材料與方法
1.實驗動物及分組
2.主要實驗儀器與實驗試劑
3.組織獲取
4.組織總蛋白提取
5.Western Blot分析
6.免疫熒光組織化學(xué)
6.1 灌注取材
6.2 組織蠟塊的制作和切片
6.3 免疫熒光染色
7.定量RT-PCR分析
7.1 逆轉(zhuǎn)錄(RT)
7.2 引物設(shè)計
7.3 RT-PCR
8.ELISA檢測
9.同源性建模與分子對接
10.數(shù)據(jù)處理
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
參考文獻
攻讀學(xué)位期間的研究成果
附錄
致謝
本文編號:3786208
【文章頁數(shù)】:48 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
abstract
引言
第一部分 經(jīng)踝關(guān)節(jié)腔注射完全弗氏佐劑制作佐劑型關(guān)節(jié)炎疼痛大鼠模型
材料和方法
1.實驗動物
2.主要實驗儀器與試劑藥品
2.1 主要實驗儀器
2.2 主要實驗試劑藥品
3.實驗分組
4.佐劑性關(guān)節(jié)炎疼痛模型制作
5.疼痛行為學(xué)測試
5.1 機械痛撤足閾值測試
5.2 熱痛閾潛伏期測試
6.踝關(guān)節(jié)病理組織學(xué)觀察
7.統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
討論
第二部分 A型肉毒毒素踝關(guān)節(jié)腔注射對佐劑性關(guān)節(jié)炎疼痛大鼠模型治療作用
材料與方法
1.實驗動物
2.主要實驗儀器及試劑藥品
2.1 主要實驗儀器
2.2 主要實驗試劑
3.動物分組
4.模型建立
5.BoNT/A關(guān)節(jié)腔注射
6.疼痛行為測試
6.1 機械痛撤足閾值測試
6.2 熱痛閾潛伏期測試
7.統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
討論
第三部分 A型肉毒毒素治療大鼠慢性炎癥性疼痛的作用機制研究
材料與方法
1.實驗動物及分組
2.主要實驗儀器與實驗試劑
3.組織獲取
4.組織總蛋白提取
5.Western Blot分析
6.免疫熒光組織化學(xué)
6.1 灌注取材
6.2 組織蠟塊的制作和切片
6.3 免疫熒光染色
7.定量RT-PCR分析
7.1 逆轉(zhuǎn)錄(RT)
7.2 引物設(shè)計
7.3 RT-PCR
8.ELISA檢測
9.同源性建模與分子對接
10.數(shù)據(jù)處理
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
參考文獻
攻讀學(xué)位期間的研究成果
附錄
致謝
本文編號:3786208
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